JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

We have established a model of pericardial patch angioplasty that can be used in either small-diameter veins or arteries. This model can be used to compare venous and arterial neointimal hyperplasia formation.

Abstract

טלאי קרום לב משמשים בכירורגיה של כלי דם כדי לסגור כלי. כדי להקל על מחקרים של היפרפלזיה neointimal הנוצרת על התיקון, פיתחנו מודל עכברוש של אנגיופלסטיקה תיקון שיכול לשמש גם וריד או עורק, וייצור טלאי venoplasty או תיקון arterioplasty, בהתאמה. היבטים טכניים של מודל זה הם דנו. IVC אינפרא כליות או אבי העורקים הם גזור ואז הידק proximally ו distally. Venotomy או arteriotomy 3 מ"מ מתבצע הווריד או אב העורקים הנבובים הנחים infrarenal של 6 עד 8 חולדות Wistar שבועות בן. כתם קרום לב שור (3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ) לאחר מכן נעשה שימוש כדי לסגור את האתר באמצעות תפר ניילון 10-0. לעומת תיקוני עורקים, תיקוני ורידי להראות גדל עובי neointimal על יום לאחר הניתוח 7. זה מודל הרומן של אנגיופלסטיקה תיקון קרום הלב יכול לשמש כדי לבחון היפרפלזיה neointimal על biomaterials וסקולרית, כמו גם להשוות את ההבדלים בין עורקים ורידיסביבות.

Introduction

מנתחי דם כלי דם קרוב כלל עם טלאי קרום לב, או שור או חזירי, כדי להפחית את הסיכון של restenosis 1, 2. בניתוח עורק, אנגיופלסטיקה תיקון קרום לב מפחיתה את שיעור restenosis לעומת סגר עיקרי 3, 4. תיקון venoplasty גם מבוצע באופן דומה לסגור ורידים, למרות בתדירות נמוכה יותר בהשוואה להליכים עורקי 5, 6. תיקונים בדרך כלל לפתח היפרפלזיה neointimal על משטחים לומינל שלהם; עם זאת, המנגנון של היווצרות neointimal עדיין לא ברור, במיוחד בהשוואה של הבדלים במבנה neointimal בין העורקים וסביבות ורידים. הראינו בעבר כי טלאי קרום לב למשוך ובתאים הם בעורקי סביבות הוורידים וכי אנגיופלסטיקה תיקון ורידי תערוכות יותרהיווצרות neointimal ggressive לעומת מדבקות העורקים 7, 8.

במחקר זה, אנו מתארים את מודל העכברים של אנגיופלסטיקה תיקון קרום לב משותפת סגירת שני ורידים ועורקים וכי ניתן להשתמש כדי ללמוד היווצרות neointimal; שיטה זו היא דגם בזעיר חיה של טכניקה פעילה הנפוצה בחולים אנושיים. מודל העכברוש בעל קוטר גדול יותר מאשר דגם העכבר, דבר המקל על היבטים טכניים של הניתוח ושיפור עקומת הלמידה עבור הדגם.

Protocol

אישור ועדת האשפוז במוסד סיעודי בעלי החיים והשימוש המתאים יש לקבל, המציין כי הפרוטוקול שלך ערוך בהתאם להנחיות של ועדת האתיקה במחקר בבעלי החיים של המוסד שלך.

1. הרדמה ונהלים טרום ניתוחיים

  1. להרדים זכר חולדות Wistar, במשקל של כ -200 גרם, עם 3% isoflurane מתאדה 1 חמצן L / min מנוהל לתוך תא אינדוקציה אקריליק.
  2. אשר הרדמה נאותה דרך חוסר תגובת קמצוץ בוהן וזנב. מניח משחה על העיניים כדי למנוע יובש בעוד החיות נמצאות תחת הרדמה. מקם את כל עכברוש פרקדן על צלחת ניתוח פלאסטי ולמקם מסכה סיליקון לספק מתאדה 2 - 3% isoflurane משאיפת רציפה. אל תשאירו חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal.
  3. בזמן חבישת כפפות סטריליות, להסיר את שיער בטן הגחון באמצעות מסיר שיער. Buprenorphine, או תת-עורית או intraperitoneally, ניתן לעתים קרובות בשלב זה.

2. נוהלי Operative

  1. תיקון venoplasty
    1. לפני הניתוח, חתוך את תיקון קרום הלב שור באמצעות microscissor לגודל 3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ. משרים את התיקון ב 10 מ"ל של תמיסת מלח מעוקרות במשך 5 דקות בצלחת תרבית תאים.
    2. הכן את אתר החתך עם חיטוי אקטואלי פי הפרוטוקול המוסדי שלך ולהחיל לעטוף כירורגית. יש להשתמש בכפפות ומכשירים סטרילי לשמור טכניקה אספטי לאורך כל הניתוח. הרדמה מקומית ניתן להזריק לתוך האתר של החתך בעור המתוכנן.
    3. באמצעות אזמל, לעשות חתך בבטן קו אמצע המשתרע ברמת xiphoid רק מעל החיק.
    4. הכנס מפשק ו לעקור מעיים כל מעי מחלל הבטן כלפי הצד הימני. עוטף את המעיים בגזה ספוגה מלוח.
    5. לחשוף את iוריד נבוב nfrarenal (IVC). האתר של השתלת תיקון הוא כ 2 מ"מ מתחת לרמה של מוצא ורידי הכליות; לנתח את IVC חינם באתר זה. ולקשור ולחלק את כל הוורידים המותני ו יובל ברמה זו באמצעות 6-0 תפרים ניילון.
    6. מניחים שני קליפים המיקרו-כירורגיה ברחבי הן הפרוקסימלית ומ infarenal דיסטלי IVC. בצע venotomy עם מחט 25 G על ידי ניקוב הקיר הקדמי של IVC, ולאחר מכן להרחיב אותו סביב 3 מ"מ באמצעות מספריים (איור 1 א).
    7. סגור את venotomy עם המדבקה באמצעות ריצה או מופרע 10-0 תפרי ניילון (איור 1B).
    8. השלם את הסגר venoplasty. הסר את מהדק דיסטלי הראשון לפרוק את התיקון ולאחר מכן הסר את מהדק הפרוקסימלית לשחזר את זרימת הדם אל IVC.
    9. אשר המוסטאסיס ידי התבוננות למשך 30 שניות ללא דחיסה. החזר את המעיים למצב הטבעי שלהם. סגור את הבטן עם תפר פועל על פי פרוטוקולי חיה אושרה.
  2. תיקון arterioplasty
    1. לפני הניתוח, חתוך את תיקון קרום הלב שור באמצעות microscissor לגודל 3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ. משרים אותו מלוחים מעוקרים.
    2. הכן את אתר החתך עם חיטוי אקטואלי ולהחיל לעטוף כירורגית. יש להשתמש בכפפות ומכשירים סטרילי לשמור טכניקה אספטי לאורך כל הניתוח.
    3. באמצעות אזמל, לעשות חתך בבטן קו אמצע המשתרע ברמת xiphoid רק מעל החיק.
    4. הכנס מפשק ו לעקור מעיים כל מעי מחלל הבטן כלפי הצד הימני. עוטף את המעיים בגזה ספוגה מלוח.
    5. לחשוף את אבי העורקים. האתר של השתלת תיקון הוא כ 2 מ"מ מתחת לרמה של מוצא העורקים הכליות; לנתח את אבי העורקים חינם באתר זה. ולקשור ולחלק את כל העורקים המותני ברמה זו באמצעות 6-0 תפרים ניילון.
    6. הצמד את אבי העורקים infrarenal. שימוש במחט 25 G לבצע arteriotomy ידי puncturing הקיר הקדמי של אבי העורקים, ולאחר מכן להרחיב אותו סביב 3 מ"מ באמצעות מספריים (איור 1 ג).
    7. סגור את arteriotomy עם המדבקה באמצעות ריצת 10-0 תפרי ניילון (1D איור). השלם את הסגר arterioplasty. הסר את מהדק דיסטלי הראשון לפרוק את התיקון ולאחר מכן הסר את מהדק הפרוקסימלית לשחזר את זרימת הדם אל אבי העורקים.
    8. אשר המוסטאסיס ידי התבוננות למשך 30 שניות ללא דחיסה. החזר את המעיים למצב הטבעי שלהם. סגור את הבטן עם תפר פועל על פי פרוטוקולי חיה אושרה.

נהלים 3. לאחר ניתוח

  1. לאחר סגירת הבטן, להפסיק את ההרדמה. החל טיפול שלאחר הניתוח, כולל שיכוך כאבים וטיפול הפצע, בהתאם להוראות שהומלצו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש.
  2. על שיכוך כאבים, השתמש עצירות ברמה של 0.1 מ"ג / ק"ג לשריר ולא פחות מאחת 12 שעות במשך 24 שעות אחריing הליכים כירורגיים. בדוק את מצב החיה כל יום בחדר החיה, הבטחת שחזור מתאים מתקופת פרי הניתוח וכן טיפול הולם של כאב לאחר ניתוח. אל תחזרו בעל חיים אשר עבר ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים עד שהוא התאושש לחלוטין.

תוצאות

לאחר אנגיופלסטיקה תיקון, אין פקקת או ורידי (N = 42) או עורקים (n = 24) קבוצות התיקון. הישרדות ביום 7 היה 100% בשני הקבוצות גם עם ורידים או תיקון עורק.

המדבקות נבצרו ביום 7 ומוכתמים hematoxylin ו eosin, ואת עובי neoint...

Discussion

אנו מתארים מודל אנגיופלסטיקה תיקון בחולדה שיכול לשמש גם בוורידים או בעורקים, יצירת venoplasty תיקון או תיקון arterioplasty, בהתאמה. באמצעות מודל תיקון קרום הלב הזה, הראינו היפרפלזיה neointimal אגרסיבי ויציב בחולדה IVC venoplasty לעומת arterioplasty אבי העורקים (איור 2) 7,

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקים R56-HL095498, R01-HL-095,498 (לספירה), R01-HL128406, מריט סקירה פרס I01-BX002336 מארצות הברית המחלקה לענייני יוצאי צבא ביו מעבדה למחקר תוכנית הפיתוח (לספירה), מחלקת ייל של הפרס כירורגיה Ohse (לספירה), מלגת קרן לב וכלי דם סרנוף (כדי JMS), ודרך משאבים ושימוש במתקני מערכת הבריאות לענייני ותיקי קונטיקט (West Haven, CT ). טלאי קרום לב שור סופקו בנדיבות על ידי Inc. דם למטר (Burlington, MA).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Bovine pericardial patchLeMaitre Vascular
Vascular clampRoboz Surgical Instrument Co.RS-5424
Clamp applying forcepsRoboz Surgical Instrument CoRS-5410
10-0 Prolene sutureArosurgical Co.T05A10N10-13

References

  1. Muto, A., Nishibe, T., Dardik, H., Dardik, A. Patches for carotid artery endarterectomy: current materials and prospects. J Vasc Surg. 50 (1), 206-213 (2009).
  2. Li, X., et al. Current usage and future directions for the bovine pericardial patch. Ann Vasc Surg. 25 (4), 561-568 (2011).
  3. Biasi, G. M., Sternjakob, S., Mingazzini, P. M., Ferrari, S. A. Nine-year experience of bovine pericardium patch angioplasty during carotid endarterectomy. J Vasc Surg. 36 (2), 271-277 (2002).
  4. Papakostas, J. C., et al. Use of the vascu-guard bovine pericardium patch for arteriotomy closure in carotid endarterectomy. Early and long-term results. Ann Vasc Surg. 28 (5), 1213-1218 (2014).
  5. Ohwada, S., et al. Glutaraldehyde-fixed heterologous pericardium for vena cava grafting following hepatectomy. Hepatogastroenterology. 46 (26), 855-858 (1999).
  6. Mori, A., et al. Standard hepatic vein reconstruction with patch plasty using the native portal vein in adult living donor liver transplantation. Liver Transpl. 18 (5), 602-607 (2012).
  7. Bai, H., et al. Pericardial patch venoplasty heals via attraction of venous progenitor cells. Physiological Reports. 4 (12), (2016).
  8. Li, X., et al. Pericardial patch angioplasty heals via an Ephrin-B2 and CD34 positive cell mediated mechanism. PLoS One. 7 (6), 38844 (2012).
  9. Bai, H., et al. Pretreatment of pericardial patches with antibiotics does not alter patch healing in vivo. J Vasc Surg. 63 (4), 1063-1073 (2016).
  10. Muto, A., et al. Eph-B4 prevents venous adaptive remodeling in the adult arterial environment. J Exp Med. 208 (3), 561-575 (2011).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

120arteriotomyvenotomyvenoplastyneointimal

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved