התחילו בהנחת עכבר זכר בן שבעה עד שמונה שבועות על משטח ספסל נקי. חותכים את עור הבטן של העכבר עם זוג מספריים לכיוון הבטן התחתונה. הבלו את רקמת השומן מהירכיים הפנימיות.
הניחו את הרקמה שנכרתה בצינור C על קרח המכיל 2.5 מיליליטר של תערובת אנזימים D, R, A ו-2.35 מיליליטר DMEM/F12 ללא FBS או אנטיביוטיקה. בעזרת מספריים, חותכים את רקמת השומן לשתי חתיכות בגודל מילימטר רבוע בקירוב. סגור היטב את מכסה צינור C והפוך את הצינור.
חבר את הצינור לשרוול של מפיץ רקמות ועכל את הדגימות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 40 דקות. לאחר מכן, מדיה חמה מראש DMEM/F12 המכילה FBS ואנטיביוטיקה ל 37 מעלות צלזיוס. לאחר הדגירה, הסר את צינור C ממפזר הרקמה ועצור את העיכול על ידי הוספת חמישה מיליליטר של DMEM/F12 עם FBS ואנטיביוטיקה.
פיפטה עדינה ארבע פעמים. צנטריפוגה את המתלה ב 700 גרם במשך 10 דקות ב 20 מעלות צלזיוס. מבלי להפריע לפלטת התא, שאפו בזהירות את הסופרנטנט.
יש להשהות מחדש את הגלולה ב-10 מיליליטר של DMEM/F12 המכיל FBS ואנטיביוטיקה, ולקפוץ פיפטה בעדינות חמש פעמים. סנן את תרחיף התא דרך מסננת תאים בקוטר 70 מיקרון המונחת על צינור 50 מיליליטר. צנטריפוגה את התסנין ב 250 גרם במשך חמש דקות.
להשעות מחדש את הגלולה ב 10 מיליליטר של PBS. לפני הציפוי, צנטריפוגה את השעיית התא ב 500 גרם במשך חמש דקות. השליכו את הסופרנטנט.
יש להשהות מחדש את הגלולה ב-10 מיליליטר DMEM/F12 המכילים FBS ואנטיביוטיקה. מערבבים על ידי פיטום המתלה בעדינות, 10 פעמים. צלחת 10 מיליליטר של התרחיף על צלחת מצופה קולגן 10 ס"מ.
מניחים את המנה באינקובטור תרבית תאים. שאפו את המדיום ושטפו את התאים שלוש פעמים עם שלושה מיליליטר PBS לכל שטיפה. הוסף 10 מיליליטר של DMEM/F12 המכיל FBS ואנטיביוטיקה ודגור.
צביעת שמן אדום O הראתה אדיפוציטים עמוסי שומנים שבעה ימים לאחר גרימת התמיינות אדיפוציטים. מידת ההבחנה המלאה אושרה על ידי ניתוח ביטוי mRNA של רגולטורים אדיפוגנזה. רוזיגליטזון גרם להשפעה תלוית מינון על רמות הביטוי של גנים ספציפיים לשומן חום כגון Ucp1 ו- Ppargc1a.
עם זאת, עבור Fabp4, ההשפעה רוויה בריכוז 0.1 מיקרומול rosiglitazone. ניתן להשתמש באדיפוציטים מובחנים לניתוחים פונקציונליים ומכניסטיים שונים כגון ניתוח קצב צריכת חמצן ומשקעים חיסוניים של כרומטין.
