חתכו סרט פחמן מוליך והדביקו אותו בין פרוסות הסיליקון המורכבות עם חלקי תאי לבלב ושלב דגימת SEM. לאחר מכן, הגדר את מתח ההאצה של FESEM לשני קילו-וולט עם מרחק עבודה של ארבעה מילימטרים. בשורת התפריטים העליונה, לחץ על סמל HL.
לאחר מכן, בהגדלה נמוכה, כוונו את החלק הראשון של רצועות פרוסת היעד, ושוב, לחצו על סמל HL כדי לעבור למצב הגדלה גבוהה. אסוף תמונה מתאימה למבנה העניין על-ידי התאמת הבהירות, הניגודיות וההגדלה של התמונה. לאחר מכן, בחר תצוגת פרוייקט, לאחר מכן פתח נתונים וייבא את קבצי התמונה לניתוח לתוכנה.
יישר את התמונות על-ידי לחיצה על יישור פרוסות ועריכה. לאחר מכן, בשורת התפריטים השמאלית התחתונה, התאימו את הערך 'טווח עוצמה' באמצעות שינוי שקיפות התמונה. בחרו במודול 'חלץ אמצעי אחסון משנה' ולחץ על ערכות הנתונים המיושרות כך שיתאימו לגודל החלק החופף של הערימה כולה.
לאחר מכן, תחת תת-המקטע סגמנטציה, בחר דגימה מחדש, לאחר מכן סגמנטציה, ולחץ על שמור. לאחר מכן, בחרו בסף של מטה הקסמים ובגודל הכלי מברשת כדי לבחור את הטווח הנכון. מתפריט בחירה, לחץ על הוסף סמל כדי להוסיף את האזור שנבחר.
לאחר השלמת הפילוח האזורי, צור קובץ תמונה העוקב אחר התוצאות הטובות ביותר עבור גודל האובייקט ורזולוציית התמונה. לחץ על עורך החיתוך, ובתיבה מחוון וירטואלי, הזן את המספר שש. לאחר מכן, מהתפריט הנפתח השמאלי, לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני על האזור האפור תחת סעיף המשנה Project ובחר צור משטח ולאחר מכן צור והחל.
בקובץ שנוצר, באמצעות מודול Surface View, צור את מבנה פני השטח ואת הייצוג התלת-ממדי. התמונות הדו-ממדיות של FESEM חושפות כי בקבוצת הביקורת, המיטוכונדריה התפזרו באופן שווה עם מבני קריסטה רגילים. לעומת זאת, קבוצת RSL3 הראתה מיטוכונדריה מכווצת עם צפיפות ממברנות מוגברת ומבנים מעורפלים.
עם זאת, לא כל הקריסטות המיטוכונדריאליות התנוונו בקבוצת RSL3, שכן חלקן נותרו ללא פגע. בהשוואה לקבוצת RSL3, לקבוצת המעכבים היו בעיקר מבני כריסטה שלמים ורק מעטים מהם לא נראו לעין. התמונות התלת-ממדיות של קבוצת הביקורת סיפקו תצוגה מדויקת יותר של המיטוכונדריה ומבני הקריסטות שלהם.
התמונות התלת-ממדיות של קבוצת RSL3 הראו מיטוכונדריה לא סדירה ומרוקנת, בעוד שקבוצת המעכבים הציגה צורות שונות של משברים. כימות השינויים במיטוכונדריה הראה כי בקבוצת RSL3 נרשמה ירידה משמעותית באורך ובנפח המיטוכונדריה, בהשוואה לקבוצת הביקורת, בעוד שקבוצת המעכבים הראתה תוצאות ביניים. RSL3 גרם גם לתפקוד לקוי של המיטוכונדריה ושינה את חילוף החומרים התאי על ידי שינוי המורפולוגיה של המיטוכונדריה והפעלת פרופטוזיס.
