כדי להתחיל, הניחו את העכברים המורדמים על משטח הניתוח. לאחר גזיזת השיער, יש למרוח משחת עיניים על שתי העיניים כדי למנוע מהן להתייבש. לאחר מכן קבע את העכברים על מנגנון סטריאוטקסי עבור immobilization.
בצע חתך קטן מתחת למיקרוסקופ כדי לחשוף את הגולגולת במלואה. הכינו שני מזרקים של 10 מיקרוליטר, אחד המכיל קולטן AAV2/5-אדנוזין 2A shRNA, והשני מכיל ערבוב AAV2/5. לאחר מכן השתמש במיקרוסקופ כדי לאתר את הברגמה והלמדא וקבע את נקודת הקואורדינטות על מזרק 10 מיקרוליטר בהתבסס על האטלס הסטריאוטקסי של מוח העכבר.
קדח חור קטן בגולגולת בנקודת הקואורדינטות שנקבעה. הזריקו שני מיקרוליטרים של נגיף shRNA קולטן AAV2/5-אדנוזין 2A לחדר המוח באמצעות הזרקה צידית בקצב קבוע של 100 ננוליטר לדקה. שמור את המחט במקום במשך 10 דקות לפני הנסיגה.
אטמו את העור הפגוע מיד באמצעות דבק ביו פיברין רפואי כדי למנוע אובדן וירוסים. הניחו את העכבר על כרית חימום, תוך שמירה על טמפרטורת הגוף שלו בערך 37 מעלות צלזיוס כדי להקל על ההתאוששות. הזריקו שני מיקרוליטרים של CRE-TAT Recombinase לכל חדר צדדי של עכבר עגבניות Arosa L-D-L-T-D עבור קבוצת הניסוי, ושני מיקרוליטרים של PBS סטרילי עבור קבוצת הביקורת.
שבועיים לאחר הזרקת CRE-TAT Recombinase, הכינו קטעי רקמות קפואות, בצעו צביעה גרעינית והכינו את השקופית להדמיה הפלת קולטן אדנוזין 2A במקלעת הכורואיד בעכבר הומוזיגוטי אדנוזין 2A, באמצעות CRE-TAT, הובילה לירידה בציונים הקליניים של EAE. באופן דומה, הפלת מקלעת כורואיד בעכברי בר מסוג קולטן אדנוזין 2A, באמצעות AAV2/5 shRNA הפחיתה את התוצאות הקליניות של EAE. ניתוח QPCR הראה כי רמות ה-mRNA של קולטן אדנוזין 2A ירדו בקבוצות AAV2/5 shRNA ו-CRE-TAT, בהשוואה לכל קבוצת ביקורת.
השתקת קולטן אדנוזין 2A, במיוחד במקלעת הכורואידים, הפחיתה את חדירת תאי מערכת החיסון לחוט השדרה.