In Vivo Visible Light Optical Coherence Tomography (OCT) Mouse Retinal Imaging

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

184 Views

•

02:20 min

•

June 30th, 2023

DOI :

10.3791/200342-v

June 30th, 2023

•

Shichu Chang¹, Wenjin Xu¹, Weijia Fan², John A. McDaniel¹, Marta Grannonico¹, David A. Miller², Mingna Liu¹, Hao F. Zhang², Xiaorong Liu¹^,³^,⁴^,⁵

¹Department of Biology, University of Virginia, ²Department of Biomedical Engineering, Northwestern University, ³Department of Ophthalmology, University of Virginia, ⁴Program in Fundamental Neuroscience, University of Virginia, ⁵Department of Psychology, University of Virginia

Transcript

התחילו בהצבת העכבר המורדם על מחזיק בעל החיים ואבטחו אותו באמצעות שתי רצועות סקוטש. הפעל את המחשב ופתח את התוכנה כדי להפעיל את הלייזר. כוונן את מחזיק בעל החיים כך שירכז את הלייזר בעין העכבר.

דמיינו את החלק האחורי באמצעות תצוגה מקדימה על הפנים, את שדה הראייה של מקלעת כלי הדם השטחית, סריקת B ואת חתך הרשתית בתוך שדה הראייה. רכוש טומוגרפיה קוהרנטית אופטית של אור נראה, או עוצמת קול vis-OCT לאחר ביצוע התאמות קלות במיקוד האופטי. יישר את ראש העצב האופטי בכל אחת מארבע פינות שדה הראייה כדי לכסות אזורי רשתית שונים.

השתמש בשיטת סף מבוססת עוצמה כדי לזהות את משטח הרשתית, וצור גרמים של סיבי vis-OCT מהנפח. חתוך את שכבת סיבי עצב הרשתית, או RNFL, על ידי בחירת עומק 16 מיקרומטר הראשונים. לאחר מכן, חשב את הקרנת העוצמה הממוצעת לאורך כיוון הציר כדי ליצור את תמונת גרם הסיב המורכבת מצרורות אקסון של תאי גנגליון ברשתית וכלי הדם שמסביב.

יישר את כלי הדם באמצעות עורך גרפי כדי לבצע מונטאז' לארבע התמונות לאחר העיבוד. גרם סיבי vis-OCT מרוכבים מושווה לתמונה קונפוקלית מקבילה של רשתית שטוחה עם TUJ1 עבור אקסונים RGC. כלי הדם מציגים מבנים מסתעפים מובחנים אשר ניתן להתאים עם כלי הדם המסומנים ICAM II על התמונה הקונפוקלית.

השוואה בין מיקרוסקופ קונפוקלי ex vivo לבין in vivo vis-OCT חשפה רשתות צרור אקסון RGC זהות וכלי הדם ברשתית שמסביב.

Explore More Videos

JoVE

From the series

יישור פיברגרם OCT של רשתית העכבר עם תמונות קונפוקליות