צנטריפוגו את תאי הלוויין שבודדו ב-FAC והשליכו את הסופר-נטנט. שטפו את התאים במיליליטר אחד של PBS, צנטריפוגה, ודגרו עליהם במאגר מיצוי גרעיני קר של מיליליטר אחד על קרח למשך 20 דקות. הוסף 20 מיקרוליטר של Concanavalin חרוזים מגנטיים מצופים לתוך צינור 1.5 מיליליטר המכיל 850 מיקרוליטר של חיץ קשירה קר.
לאחר מכן באמצעות מתלה מגנטי, שטפו את החרוזים פעמיים עם מיליליטר אחד של חיץ קשירה קר ואפשרו לחרוזים להצטבר בצד הצינור על המדף במשך חמש דקות לפני שתלו אותם מחדש בעדינות ב -300 מיקרוליטר של חיץ קשירה קר. לאחר מכן, צנטריפוגו את הגרעינים והשעו אותם מחדש בעדינות ב-600 מיקרוליטר של מאגר מיצוי גרעיני. לאחר מכן מערבבים 600 מיקרוליטר של גרעינים שחולצו עם 300 מיקרוליטר של תמיסת חרוזים Concanavalin A ודגרים בארבע מעלות צלזיוס למשך 10 דקות.
לאחר הסרת הסופרנאטנט באמצעות מתלה מגנטי, השהה מחדש את גרעיני החרוזים עם מיליליטר אחד של חיץ חוסם קור. שוב, הסירו את הסופרנאטנט ושטפו את גרעיני החרוזים פעמיים עם מיליליטר אחד של חיץ כביסה קרה. להפריד את supernatant, בעדינות resuspend את מתחמי חרוזי הגרעין עם נוגדן ראשוני מסוים לדגור בארבע מעלות צלזיוס לילה עם תסיסה עדינה.
למחרת, הסירו את הסופרנאטנט ושטפו את גרעיני החרוזים לפני שתשהו מחדש ב-100 מיקרוליטר של חיץ לשטיפה קרה. הוסיפו 100 מיקרוליטר של חלבון A-micrococcal nuclease מדולל ל-100 מיקרוליטר של גרעינים הקשורים לחרוזים ודגרו בארבע מעלות צלזיוס למשך שעה אחת עם תסיסה. לאחר הדגירה, הסירו את הסופרנאטנט ושטפו את גרעיני החרוזים פעמיים לפני שתשעו אותם מחדש ב-150 מיקרוליטר של חיץ לשטיפה קרה.
לאחר מכן, להוסיף שלושה מיקרוליטר של 100 מילימולר סידן כלורי, לערבב במהירות על ידי הבהוב לדגור על קרח במשך 30 דקות. עצור את התגובה על ידי הוספת 150 מיקרוליטר של חיץ עצירה ודגר ב 37 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות. צנטריפוגות את הדגימות ומעבירים את הסופרנאטנט לצינור מיקרוצנטריפוגה חדש, תוך השלכת הגלולה והחרוזים.
לאחר מכן להוסיף שלושה מיקרוליטרים של 10% נתרן דודציל סולפט ו 2.5 מיקרוליטר של 20 מיליגרם למיליליטר פרוטאינאז K.Mix על ידי היפוך ולדגור במשך 10 דקות ב 70 מעלות צלזיוס. לאחר מכן להוסיף 300 מיקרוליטר של פנול:chloroform:isoamyl אלכוהול ומערבולת לפני המעבר לשני צינורות נעילת שלב מיליליטר. צנטריפוגה ולהוסיף 300 מיקרוליטר כלורופורם לאותו צינור.
צנטריפוגה שוב ולאסוף את supernatant לתוך צינור 1.5 מיליליטר. לאחר מכן, הוסיפו מיקרוליטר אחד של גליקוגן, ולאחר מכן 750 מיקרוליטר של 100% אתנול, ואפשרו לדנ"א לזרז בן לילה במינוס 20 מעלות צלזיוס. למחרת, גלולה את הדנ"א על ידי צנטריפוגה, ולאחר מכן לשטוף את הגלולה עם מיליליטר אחד של 100% אתנול וצנטריפוגה פעמיים לפני הסרת אתנול שאריות עם פיפטה.
ייבשו את הגלולה באוויר למשך חמש דקות והשעו אותה מחדש ב-25 מיקרוליטר של חיץ tris-EDTA. ה-H3KME2 וה-H3K27AC הועשרו סביב ה-TSS של PAC7, ITGA7, LAM2, CXCR4 ו-VCAM1. עם זאת, H3K4ME2 ו-H3K27AC לא הועשרו באלה של ITGAM, PTPRC, PECAM, CKM או MHY3.
כמעט ולא התקבל אות עם דגימת IgG. ניתוח המוטיבים הידועים של HOMER, פסגות AR ותאי לוויין ואזורי מטרה אחוזיים מוצגים. ניתוח המחפשים חשף כמעט 500 פסגות עם ציון שיא גבוה מ-50, כאשר יותר מ-200 מהן עם ציון גבוה מ-100.
