כדי להתחיל, לתת שיכוך כאבים תת עורית לחולדה מורדמת כי הוזרק בעבר intrarebroventricularly עם קוקטייל שחרור. הרכיבו את החולדה על המסגרת הסטריאוטקסית. אבטחו את הראש באמצעות מוטות אוזניים, וודאו שהתנועה הסיבובית לכיוון החלק הקדמי והאחורי אינה מופרעת.
ייצבו את הראש כלפי מטה בזווית של 40 מעלות כדי להאריך כראוי את החלק האחורי של הצוואר. לגלח את פרוות הצוואר באמצעות סכין גילוח ולחטא את העור עם שלושה סיבובים לסירוגין של 10% יוד פובידון ואלכוהול באמצעות צמר גפן סטרילי, שפשוף בכיוונים שונים במשך שלוש עד חמש שניות בכל פעם. בעזרת קצה האצבע, זהה את האזור הדיכאוני בצורת עגול בין הבליטה העורפית לעמוד השדרה של האטלס.
סמן נקודה זו באמצעות סמן. הצמידו מזרק של מיליליטר אחד למסגרת הסטריאוטקסית. מקם את המחט כדי ליצור מגע עם העור בסימן.
בעזרת מלקחיים, מרימים את העור תוך החדרת המזרק דרך שכבות העור. משכו את הבוכנה לאחור בעדינות כדי ליצור לחץ שלילי בתוך המזרק. הכנס בהדרגה את המחט עד שנוזל עמוד השדרה המוחי נראה במזרק.
החזק את המחט יציבה במיקום זה ואפשר זרימה איטית של נוזל עמוד השדרה המוחי. לאט להסיר את נוזל השדרה המוחי עד 120 מיקרוליטר. שלפו בזהירות את המזרק.
יש לתת מיליליטר אחד של סרום רגיל תוך צפקי כדי לתמוך בחידוש הנוזלים של חיית הניסוי. שלב את הביופסיה הנוזלית עם 400 מיקרוליטר של תווך תאי גזע עצביים ואחסן את צינור מיקרו צנטריפוגה בארבע מעלות צלזיוס לשימוש מאוחר יותר. לאחר מכן העבירו את בעל החיים לאזור הניטור שלאחר הניתוח.
ביופסיות חליבה הניבו תרביות תאי גזע עצביים עם פוטנציאל מעבר ממוצע של 3.17, שהגיעו אפילו לתשעה מעברים. התאים שנאספו צופו על בארות מצופות פולי-D-ליזין, שם הם גדלו הן כחד-שכבות דבקות ולעתים רחוקות יותר כנוירוספרות. תאים שבודדו טריים שהיו חיוביים ל-GFAP היו גם חיוביים לחיסון עבור הסמן השקט ID3 והיו בעלי מאפיין מורפולוגיה דו-קוטבית של NSE.
השוואה אימונוציטוכימית בין תאים שמקורם בביופסיה לבין תאים שמקורם לאחר המוות הראתה כי הפרופיל של התאים שנאספו היה דומה לתאי האזור התת-אפנדימלי האנדוגני. גורם הגדילה הביא לעלייה מקבילה ומשמעותית בתאי SOX2 ולירידה בנוירובלסטים חיוביים לקורטין כפול בשתי הדגימות.
