Surgical Protocol for the Selective Photoconversion of Lung Metastases

לאחר הכנת העכבר לניתוח, זהה את אזור המטרה, שבעה מילימטרים משמאל לעצם החזה וכשבעה מילימטרים מעל השוליים התת-קוסטליים. הרימו את העור מעל האזור המזוהה באמצעות מלקחיים ובצעו חתך עגול בקוטר 10 מ"מ באמצעות מספריים חדים לחיתוך העור בלבד. לאחר מכן להסיר את הרקמה הרכה מעל כלוב הצלעות ולצרוב את כל כלי הדם העיקריים בשני הקצוות באמצעות עט cautery.

הרימו את הצלע השישית או השביעית במלקחיים והשתמשו בלהב יחיד של מספריים מנתחים זעירים קהים כדי לחדור את השריר הבין-קוסטלי. כעת סובבו בעדינות את המספריים ובצעו חתך של כ -10 מ"מ בחלל הבין-קוסטלי תוך הימנעות ממגע עם רקמת הריאה והצלעות. שחררו אוויר דחוס בפרק כף היד או ביד בעדינות כדי לקבוע את חוזק הזרימה המתאים ולנקות את הזרבובית מפסולת.

לאחר מכן יש למרוח פרצי אוויר קצרים על החתך כדי למנוע פגיעה ריאתית. בעזרת המלקחיים, הרימו את הצלע השישית או השביעית והכניסו את המשחזר לחתך הבין-קוסטלי עם להבים מקבילים לקיר החזה. לאחר מכן שחררו את הידית בזהירות כדי לאפשר לנשלף להיפתח ולחשוף את הריאה בהדרגה.

כעת יש לטפטף שתיים עד שלוש טיפות של PBS סטרילי המחומם ל-37 מעלות על רקמת הריאה החשופה כדי למנוע ממנה להתייבש. לכסות חתיכת נייר אלומיניום עם מגרעת קטנה מעל העכבר, מיקום אותו ישירות על רקמת הריאה החשופה. ודא שהמגרעת מראה רק את בית החזה הפתוח ואת הרקמה הסמוכה להמרה ממוקדת של צילום ריאות.

לאחר מכן מקמו קופסה עם מגרעת מעל העכבר ורדיד אלומיניום, וודאו שהמגרעת מתיישרת עם הריאה החשופה. והגדר את מנורת המרת התמונות ישירות מעל המגרעת בקופסה. לאחר מכן הפעל את מנורת המרת התמונות כדי להאיר את רקמת הריאה החשופה למשך פרק זמן רציף של שש דקות.

לאחר המרת התמונה, השבת את המנורה ונקה את קופסת המנורה ואת מסכת רדיד האלומיניום הרחק מהעכבר. יש להפריד את הריאה מדופן בית החזה על ידי הזרמת אוויר בשורש כף היד, ולאחר מכן לפרוק אוויר בחתך החזה. אחזו היטב בידית הנשלף ולחצו אותה כדי לסגור את הלהבים.

בזהירות לתמרן את retractor סגור מתוך החלל intercostal, להבטיח לא מגע עם רקמת הריאה. לאחר מכן השתמש בתפר משי 5-0 כדי לסגור את החתך הבין-קוסטלי בתבנית תפר רציפה פשוטה, ולהבטיח כי הצלע משני צידי החתך משולבת. משוך את התפר בחוזקה כדי להבטיח שקצוות הפצע יתיישרו, ולבסס מחדש את שלמות דופן בית החזה.

אבטחו את התפר על ידי קשירת הקצה ארבע פעמים. חותכים את זנבות התפרים קרוב ככל האפשר לקשר, וסוגרים את העור באמצעות סיכות כירורגיות. כדי להסיר אוויר עודף מחלל בית החזה, הכנס מזרק של מיליליטר אחד עם מחט של 28 מד מתחת לתהליך הקסיפואיד.

מחזירים את המזרק לכמיליליטר אחד. הסר את המזרק מהעכבר ופרוק את האוויר. מוצגות תמונות של Dendra2 חשופות המבטאות גרורות ריאה לפני חשיפה לאור כחול.

חשיפת Dendra2 המבטא גרורות ריאה לאור כחול הראתה כי חשיפה של שש דקות הפיקה את האות הבהיר ביותר בערוץ המומר בתמונה הן בדגימות ex vivo והן בדגימות in vivo. תאים שהומרו לתמונה ותאים שאינם מומרים לתמונה זוהו בכל שלושת סוגי הרקמה מעכברים שעברו ניתוח עם חשיפה לאור כחול. רק תאי גידול שהומרו בצילום נמצאו ברקמות של עכברים שעברו ניתוח ללא חשיפה לאור כחול.