Drug Screening Method for Sleep Regulation in an Elderly Drosophila melanogaster Model

כדי להתחיל, לקחת בקבוק של זבובים, להעביר אותם לתוך בקבוק חדש כל שבעה ימים בסנכרון עם מחזור הצמיחה שלהם. אספו את הדור הבא של הזבובים שבוקעים מהבקבוק הראשוני שלושה ימים לאחר העברתם, והכניסו אותם לבקבוק טרי. לאחר מכן, מניחים את צינור הזכוכית לתוך כד גדול.

ממלאים אותו במים מזוקקים כפול ומרתיחים במשך 20 דקות. לאחר מכן הסר וצרור את צינור הזכוכית. שטפו שלוש עד חמש פעמים במים מזוקקים כפול, והכניסו את צינור הזכוכית לתנור לייבוש.

בעזרת פיפטה, מוסיפים ארבעה מיליליטר של חיץ דגימה ורסרפיין לכוס קטנה של 10 מיליליטר. עבור קבוצת הביקורת השלילית, הוסף dimethyl sulfoxide עד שהריכוז מגיע 0.2%בזהירות להכניס אורך מתאים של צינור זכוכית לתוך קטנה כדי להקל על זרימת המדיום. חכו שהמדיום התרבותי יתגבש במלואו.

לפני הסרת צינור הזכוכית, נגב את הקיר החיצוני כדי לרכוש צינור זכוכית ניטור וודא שקצה אחד מכיל את מדיום התרבית עם סמים. לאחר מכן מחממים פרפין מוצק בכוס ב 70 מעלות צלזיוס עד שהוא נמס. טובלים את קצה צינור הזכוכית בפרפין הנוזלי כחמישה מילימטרים ומסירים אותו במהירות.

המתן עד שהפרפין יתמצק כדי לאטום את קצה המזון של צינור הזכוכית. הכניסו את הזבובים המורדמים לצינורות זכוכית אטומים בפרפין וחסמו את הקצה שאינו מזון בעזרת כדור צמר גפן סופג. טען את הצינורות על צג אינפרא אדום כדי להשגיח עליהם.

יישרו כל צינור כך שקרני האינפרא אדום יעברו אנכית דרך מרכז טווח הפעילות של הזבובים. מקמו את הצג בתוך אינקובטור השוכן בחדר החושך של הזבובים.