לאחר תרבית דגימת דם מופשרת בהקפאה, הקרינו אותה במנות הרנטגן הנדרשות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, הוסף 1.62 מיליליטר של מדיום תרבית סל"ד חם לכל באר. כדי לעורר את חלוקת התא בלימפוציטים T, להוסיף 40 מיקרוליטר של phytohemagglutinin לכל באר resuspend ביסודיות.
דוגרים על הצלחת בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני למשך 23 שעות. למחרת, הוסיפו שמונה מיקרוליטרים של ציטוכלסין B לכל באר כדי לחסום את הציטוקינזיס. לאחר 70 שעות, להסיר את הצלחת מן האינקובטור ולהעביר את השעיית התא צינור 15 מיליליטר.
שטפו היטב כל באר בשני מיליליטר PBS והוסיפו PBS זה לצינור ה-15 מיליליטר. צנטריפוגו את מתלה התא ב 180 G במשך שמונה דקות ולזרוק את supernatant, משאיר 500 מיקרוליטר מעל הכדור. תוך כדי ערבוב הכדור, מוסיפים שני מיליליטר אשלגן כלורי קר לתוך הצינור.
שוב, צנטריפוגה ולהשליך את הסופרנאטנט כפי שהודגם בעבר. מערבלים את הגלולה על ידי הוספה איטית של שני מיליליטר של קיבוע קר 1 ודגרים לילה בארבע מעלות צלזיוס. למחרת, צנטריפוגה ולהשליך את הסופרנטנט.
תוך כדי ערבול טיפת הכדור, מוסיפים שני מיליליטר של קיבוע קר 2 לצינור. השאירו את הצינור למשך הלילה בטמפרטורה של ארבע מעלות צלזיוס. צנטריפוגות את הדגימה ומעבירים את הסופרנאטנט לצינור אחר כדי לרכז את התאים בהתאם לגודל הכדור.
נקה את המגלשות עם איזופרופנול ותייג אותן כראוי. לאחר ערבוב הכדורית, הוסף 40 מיקרוליטר של תרחיף תאים קבוע על מגלשה. לאחר הייבוש, לטבול את המגלשה בכתם כתום אקרידין במשך דקה אחת.
לאחר מכן, שטפו את המגלשה במהירות במים מזוקקים לפני שתניחו אותה במאגר פוספט למשך דקה אחת. יבש את גב המגלשה והנח אותה על נייר טישו נקי. הוסיפו 20 מיקרוליטר של חיץ פוספט למגלשה וכסו אותה בכיסוי נקי, תוך הימנעות מבועות אוויר.
אטמו את המגלשה במלט סיליקון. הניחו את המגלשה מתחת למיקרוסקופ פלואורסצנטי ובחנו תאים דו-ספרתיים. לבסוף, ספור ידנית את המיקרו-גרעינים.
נוכחותם של תאים דו-חיים מעוגלים הצביעה על שליפה מוצלחת של תאים בריאים בני קיימא מדגימות דם שלמות שמורות בהקפאה. עם מינונים מוגברים של קרינה, נצפתה עלייה ריבועית ליניארית בתפוקת המיקרוגרעין. תפוקת המיקרו-גרעין ברקע בדגימות ביקורת המוקרנות דמה נבעה בעיקר מכרומוזומים מפגרים.
