Arteriovenous Blood Sampling Technique in Mice Using Sulzer's Vein and Left Ventricle for Metabolomic Analysis

כדי להתחיל, מקם את העכבר על מגש דיסקציה המצויד בחרוט אף למסירת הרדמה. בדוק את הרפלקסים של החיה, כגון נסיגת כפות, כדי לוודא שההרדמה הגיעה לעומק מתאים. לאחר מכן, מקם את העכבר כדי לחשוף את העור הגבי.

יש להרטיב את העור עם אתנול בכמות מספקת של 70% כדי למנוע ניתוק שיער. בצע חתך לאורך הגב, החל מהחלק התחתון של בית החזה והרחב אותו עד הצוואר. בעזרת מלקחיים מכופפים, הרימו בעדינות את רקמת השומן החומה הבין-סקפולרית וחתכו בזהירות את הרקמה המצורפת.

הרימו את כרית השומן לכיוון הראש והמשיכו לחתוך את הרקמות המחוברות כדי לפתוח בזהירות את האזור עד לחשיפת וריד הזולצר. עכשיו, לחתוך בזהירות את הווריד של זולצר. בעזרת קצה פיפטה חתוך תחתון 200 מיקרוליטר ופיפטה P100, לאסוף כ 40 מיקרוליטר דם ולאחסן את הדם שנאסף בצינור איסוף דם.

יש לשמור את הצינורית על קרח עד לתהליך איסוף הסרום. יש להרטיב את עור הגחון בנדיבות עם 70% אתנול למניעת ניתוק שיער. באמצעות מספריים, בזהירות לפתוח את חלל החזה כדי לחשוף את הלב.

באמצעות מזרק של מיליליטר אחד המצויד במחט בגודל 29 אינץ ', לנקב במדויק את אזור הקודקוד של החדר השמאלי. הכנס שני שלישים מהמחט כשלושה עד חמישה מילימטרים לאופקי הימני של קודקוד הלב, ומשוך את המזרק לאחור כדי לאסוף דם מהחדר השמאלי. לאחר מכן, צנטריפוגה דגימות הדם ב 10, 000G במשך 10 דקות בארבע מעלות צלזיוס.

באמצעות פיפטה, לאסוף את supernatant ולהמשיך עם מיצוי מטבוליטים וניתוח.