Isolation of Extracellular Vesicle (EV)-Rich Plasma from Human Blood and Detection of Activated Clotting Time

כדי להתחיל, צנטריפוגה את הדם האנושי ב 120 G במשך 20 דקות בטמפרטורת החדר כדי להסיר את תאי הדם. לאחר מכן מעבירים את החצי העליון של הסופרנאטנט לצינור חדש. לאחר מכן, צנטריפוגו את הפלזמה העשירה בטסיות כדי להסיר את הטסיות, והעבירו את החצי העליון של הסופרנאטנט לצינור חדש.

לאחר מכן להסיר את פסולת התא על ידי צנטריפוגה טסיות לפלזמה שלנו ב 13, 000 G במשך שתי דקות. מעבירים את החצי העליון של הסופרנאטנט לצינור חדש. הפעל את מנתח הקריש כדי לזהות שלפוחית חוץ-תאית, או זמן קרישה המופעל על ידי EV, וחמם מראש את המכשיר ל -37 מעלות צלזיוס.

התקינו את הבדיקה החד פעמית ואת הבדיקה. לאחר מכן התחל את הליך בקרת האיכות של המכונה. לאחר הפעלת בקרת האיכות, הזן מידע לדוגמה במערכת.

לאחר מכן הוסיפו 200 מיקרוליטר של פלזמה עשירה ברכב חשמלי לכוס הבדיקה, ואחריה 20 מילימולר, 170 מיקרוליטר סידן כלורי. לחץ על לחצן התחל, סגור את הכיסוי ואפשר לגשושית לזהות את השינוי בהתנגדות הדגימה. דגימות ה-EV הבלתי מוסמכות מציגות צביר מובחן עם גודל חלקיקים מעט גדול יותר ליד השער של ניגודיות EV.In, דגימות מוסמכות עשירות ב-EV הראו את רוב האותות בתוך שער הרכב החשמלי כקבוצה אחת.

עלייה בריכוז הרכב החשמלי קיצרה את זמן הקרישה המופעל על ידי EV, בעוד שירידה בריכוז EV האריכה את זמן הקרישה המופעל על ידי EV. דגימות פלזמה עשירות ב-EV מחולים עם רעלת הריון, שברים בירך וסרטן ריאות היו בעלות זמן קרישה קצר משמעותית של EV בהשוואה למתנדבים בריאים.