כדי להתחיל, לקחת 10 מיליליטר של דגימת מים diatom בצינור צנטריפוגה. צנטריפוגה את הצינור ב 13, 400 G במשך חמש דקות. עם אקדח פיפטה, בזהירות להשליך 9.8 מיליליטר של supernatant.
לאחר מכן להעביר 200 מיקרוליטר של דגימת מים diatom מועשר לתוך צינור צנטריפוגה שני מיליליטר. לאחר מכן, לקחת 0.5 גרם של רקמת שולי הריאה מגוף אדם טובע. בעזרת מספריים, חותכים את רקמת הריאה עד שהיא הופכת בוצית.
למיצוי DNA הן מדגימות דיאטום והן מדגימות ריאה, הוסיפו תחילה חרוזי זכוכית לשתי הדגימות. לאחר ערבוב הדגימות היטב, להוסיף 40 מיקרוליטר של proteinase K לצינורות. לאחר דגירה של 15 דקות בטמפרטורת החדר, מוסיפים 200 מיקרוליטר של חיץ קשירה לשני הצינורות.
מיד לערבב את הדגימות עם מערבל מערבולת במשך ארבע דקות. לאחר מכן מניחים את הצינורות באמבט מים ב 70 מעלות צלזיוס במשך 10 דקות. עד שיתברר הפתרון.
לאחר מכן, להעביר את הפתרון ברור עם משקע flocculent. לתוך עמוד ספיחה באורך שלושה סנטימטרים עמוס במטריצת סיליקון. צנטריפוגה את העמוד ב 8, 000 G במשך 30 שניות.
לאחר מכן השליכו את נוזל הפסולת בצינור האיסוף והחזירו את העמוד לצינור האיסוף. עכשיו להוסיף 500 מיקרוליטר של מאגר הסרת מעכב לתוך העמודה צנטריפוגה ב 13, 400 G במשך 30 שניות. לאחר השלכת נוזל הפסולת, מוסיפים 700 מיקרוליטר של חיץ הכביסה לעמוד וצנטריפוגה שוב.
לאחר השלכת נוזל הפסולת, החזירו את עמוד הספיחה לצינור האיסוף הריק. צנטריפוגה את העמוד ב 14, 500 G במשך שתי דקות כדי להסיר חיץ כביסה ככל האפשר. כעת הוציאו את העמוד והניחו אותו בצינור צנטריפוגה נקי.
הוסף 100 מיקרוליטר של חיץ elution לחלק האמצעי של קרום הספיחה. צנטריפוגה את העמוד ב 13, 400 גרם למשך דקה אחת לאחר חמש דקות דגירה בטמפרטורת החדר. מעבירים את התמיסה המתקבלת בצינור האיסוף חזרה לעמודת הספיחה לפני הצנטריפוגה שוב.
אחסנו את הדנ"א הדיאטום המדולל בשתיים עד שמונה מעלות צלזיוס לשימוש עתידי. אלקטרופורזה של ג'ל אגרוז הראתה פסי DNA דיאטומיים בין 250 ל -500 BP הן בדגימות מים והן ברקמות לאחר הגברת PCR.
