כדי להתחיל, להוסיף 500 מיקרוליטר של ג'ל תרבית חמה לבאר בצלחת 24 באר. מעבירים במהירות את החותכות השלמות המנותחות המבודדות מהעכבר לבאר. מערבלים את הצלחת מספר פעמים כדי לשטוף את החותכות.
מוסיפים 400 מיקרוליטר ג'ל תרבית חם לצלחת תרבית ומעבירים את החותכות השטופות לצלחת. לכוון את החותכת למיקום אזור הלולאה הצווארית במרכז הצלחת ולהתאים את הטיה של החותכת האפיקלית למישור ההדמיה הרצוי. לאחר שהג'ל מוגדר, בעזרת זוג מלקחיים עדינים, הסירו את הג'ל מעל האזור המעניין.
הוסיפו כ-150 מיקרוליטר של מצע תרבית חם לקצה המנה כדי לכסות את הדגימה. מניחים את תרבית הצמחים על 37 מעלות צלזיוס כדי לאפשר לרקמה לשקוע. לאחר שעה, הפעל את המיקרוסקופ ואת הלייזר של שני פוטונים.
הצמידו את צלחת התרבית למתאם הבמה והניחו את טבעת מתאם השפע מעליה. חבר את מתאם הבמה לבקר טמפרטורה כדי לשמור על התרבית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. חבר את הכניסה ואת השקע של טבעת המתאם למשאבת microprofusion.
הגדר את מהירות השפע ל -20 והתחל את השפע של המדיום על הדגימה. הניחו ACBR על גבי טבעת המתאם והגביהו את הבמה כך שהמטרה תתאים דרך ACBR ליצירת מגע עם מדיום התרבית. סובב את אורך גל הלייזר ל- 920 ננומטר כדי להמחיש GFP.
לאחר איתור הדגימה דרך עינית, דמיינו אותה באמצעות תוכנת מיקרוסקופ, ולאחר מכן הגדירו גודל צעד Z של ארבעה מיקרומטרים ומרווח זמן של חמש דקות למשך 14 שעות. התחל את ההדמיה בהילוך מהיר ושמור את הקבצים הבאים לניתוח נתונים במורד הזרם. במיקרוסקופ בהילוך מהיר של K14-Cre; R26-rtTA; הלולאה הצווארית tetO-H2B-GFP, אותות H2B-GFP נצפו בעיקר באזור הגברת הטרנס של הלולאה הצווארית, מה שמצביע על חלוקות תאים פעילות.
יתר על כן, נצפתה התעבות ויישור של כרומוזומים בצלחת המטאפאזית בתאים מיטוטיים ולאחר מכן הפרדה שלהם במהלך אנאפאזה לשני תאי בת. רוב חלוקות התאים היו ניצבות או בזווית אלכסונית ביחס לקרום המרתף עם פחות חלוקות אופקיות מקבילות לקרום המרתף. אירועי חלוקת תאים ניכרו גם ב-K14-Cre; לולאות צוואר הרחם R26-mT/mG שבהן כל קרומי תאי האפיתל סומנו בירוק.
תאים מיטוטיים זוהו על ידי עיגול התאים שלהם וציטוקינזיס לאחר מכן. ב K14-Cre; נצפו גם לולאות צוואר הרחם R26-mT/mG, חלוקות תאים אופקיות ואנכיות.
