הכנה וניתוח של דגימות כרומטוגרפיה בשכבה דקה של Rhodiola crenulata ותרכובות ייחוס

כדי להתחיל, לשקול שלושה גרם של אבקת Rhodiola crenulata ולהעביר אותו לתוך בקבוק חרוטי 100 מיליליטר. בעזרת פיפטה בקערה גדולה, מוסיפים 25 מיליליטר מתנול לבקבוק. הניחו את הבקבוק במכשיר האולטרסוני.

הגדר את הכוח ל 250 וואט, תדר ל 40 קילוהרץ, זמן ל 30 דקות, ולהתחיל את ultrasonication. לאחר מכן, שטפו את החלק החיצוני של הבקבוק תחת מים זורמים עד שהוא מגיע לטמפרטורת החדר. סנן את התמיסה דרך קרום microporus 0.22 מיקרון.

באמצעות מזרק של מיליליטר אחד, שואפים 800 מיקרוליטר של נוזל מהבקבוק ואוספים 400 מיקרוליטר של תמיסה באמצע הזרם לתוך בקבוק דגימה כרומטוגרפית. למדוד ולהוסיף מיליגרם אחד של salidroside, 0.5 מיליגרם של tyrosol, ו 0.5 מיליגרם של חומצה גאלית לתוך שלוש צלוחיות נפח נפרדות של מיליליטר אחד. לאחר מכן, ממלאים כל בקבוק לסולם המסומן במתנול.

סוניק את הדגימות במכשיר העל-קולי באמצעות התנאים שתוארו קודם לכן. לאחר ultrasonication, לשאוף 800 מיקרוליטר של נוזל מן הצלוחית. מסננים את התמיסה דרך קרום מיקרונקבובי של 0.22 מיקרומטר ואוספים 400 מיקרוליטר של תסנין לתוך הבקבוק.

הוסף טריכלורומתאן, אתיל אצטט, מתנול וחומצה פורמית בצד אחד של גליל הכרומטוגרפיה של המיכל הכפול. נערו את הגליל כדי לערבב את התוכן באופן שווה ולכסות את ראש הגליל העליון. סדרו את התמיסות הסטנדרטיות של חומצה גאלית, סלידרוסיד, טירוסול ותמיסת הקרנולטה שלנו על מדף הדגימות במיקומים A1 עד A4. הניחו יריעת סיליקון בגודל 5x10 ס"מ על שולחן הדגימה.

הפעל את מכונת הדגימה האוטומטית ופתח את שסתום בקרת האוויר. לחץ על לחצן המשך לדגימה אוטומטית. לאחר הדגימה, כבו את המכונה ואת שסתום האוויר.

הסר את יריעת הסיליקון מהמכונה. שים את יריעת הסיליקון בצד השני של גליל הכרומטוגרפיה של המיכל הכפול. מכסים את ראש הצילינדר העליון ורווים מראש למשך 20 דקות.

לאחר מכן, השתמש בפינצטה כדי להחזיק את הקצה העליון של צלחת השכבה הדקה והכנס במהירות את יריעת הסיליקון לסוכן הפיתוח. ברגע שהממס האורגני מתאדה, רססו את יריעת הסיליקון בתמיסה כרומוגנית. הניתוח הכרומטוגרפי של השכבה הדקה הראה כי דגימת R.crenulata הופיעה בכתמים באותו צבע, המתאימים לסטנדרטים של חומצה גאלית, סלידרוסיד וטירוסול.