מיקרוסקופ תוך-ויטלי דו-פוטוני במודל עכבר של גליובלסטומה

התחל בהזרקת תאי גליומה C6 לאזורי המוח השטחיים של עכברים כדי ליצור מודל עכברי של גליובלסטומה. לאחר מכן קבע מוט ראש בחלון הגולגולת ואפשר לעכברים להתאושש. לאחר מכן, הזריקו ננו-חלקיקים פלואורסצנטיים לווריד בעכבר כדי לבצע שני דימות פוטונים במוח.

הפעל מיד את הלייזר Ti:sapphire ואת מתג המערכת הראשי. לאחר מכן הפעל את תוכנת תצוגת הערבה. כעת יש לשתק את העכבר מתחת לשני מיקרוסקופ פוטונים על במה מותאמת אישית.

הניחו את בעל החיים במצב נוטה על כרית מחוממת ואבטחו אותו באמצעות הסרט מבלי לכווץ את בית החזה. הוסיפו טיפת מים לחלון הגולגולת וכווננו את המיקוד. כדי לנטר את קצב הלב ואת חמצון הדם של החיה, מקם את החיישן על הכף האחורית.

כוונן את מיקום הראש. באמצעות מסנן RFP, אתר את שדה ההדמיה הרצוי. לאחר קביעת כיוון הדגימה והשדה לצפייה, העבר את המיקרוסקופ ממצב שדה רחב למצב מיקרוסקופ סריקת אור.

ודא שהלייזר Ti:sapphire נעול במצב של 920 ננומטר ופתח את כל התריסים. כוונן את מתחי ה-PMT ל-500 עד 600 וולט. לחץ על תמונה חיה בתוכנה כדי להתחיל בהדמיה.

לאחר השגת תמונה ברורה, השתמש בתוכנה ובשלב הממונע כדי להגדיר את החלק העליון והתחתון של ערימת תמונות בתוכנה. לאט לאט להגדיל pockels או רווח PMT כדי לפצות על החושך בעומקים הולכים וגדלים. הגדר נתיב שמירה והתחל את סידרת Z.

לאחר השלמת הערימה, השתמש בהפעלה כדי לבדוק את איכות הערימה. לאחר סיום ההדמיה, העבירו את בעל החיים לכלוב התאוששות. צא מתצוגת ערבה, ודא שכל הנתונים נשמרים ומועברים, ולאחר מכן כבה את המחשב ואת כל החומרה.

מספר מוגבל של חלקיקים עברו אקסטרווסציה ונראים בקרבת תאי הגידול 10 דקות לאחר מתן ננו-חלקיקים. עם זאת, 24 שעות לאחר מתן ננו-חלקיקים, שפע של חלקיקים נראה בגליובלסטומה, מה שמרמז על אקסטרווסציה.