כדי להתחיל, להשיג נוסחה מוכנה מראש קבוע פרפין רקמת סרטן ריאות דגימה שקופית. לדגור אותו ב 65 מעלות צלזיוס במשך חמש דקות. בצע התייבשות על ידי טבילת השקופית בקסילן, ואחריה תמיסות אתנול של ריכוזים יורדים.
לאחר מכן טבלו את המגלשות במים מעוקרים שלוש פעמים למשך דקה כל אחת. לשליפת אנטיגן, הניחו את השקופית בתיבת צביעה ותיקון. מלא אותו עם immunohistochemical אנטיגן תיקון חיץ פתרון עבודה של pH שש או תשע.
מכסים את הקופסה במכסה, ומחממים אותה במיקרוגל במשך שמונה דקות בעוצמה של 100%. לאחר מכן מצננים את המגלשה לטמפרטורת החדר. מכסים את הרקמה בתמיסת חסימה, ולאחר מכן דוגרים בתא לח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות.
לאחר הסרת תמיסת החסימה, כסו את השקופית בתמיסת העבודה העיקרית של הנוגדנים, והניחו אותה בתא לח. לאחר מכן לדגור על חדר זה במשך שעה אחת ב 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, שטפו את המגלשה עם פתרון עבודה של מאגר כביסה למשך שתי דקות.
מוסיפים חזרת פולימרית פרוקסידאז ישירות למגלשה, ודגרו עליה במשך 15 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר שטיפת המגלשה, יש להוסיף תמיסת עבודה פלואורופורית ישירות על המגלשה, ולדגור עליה במשך 10 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר שטיפת המגלשה, יש לתת טיפול במיקרוגל כפי שהודגם קודם לכן.
כאשר המגלשה מקוררת לטמפרטורת החדר, שטפו אותה שלוש פעמים במים מזוקקים כפול למשך דקה כל אחת. לאחר מכן, טבלו את השקופית בתמיסת העבודה של חיץ השטיפה למשך שתי דקות, ובצעו דגירה של נוגדנים, חזרת פרוקסידאז ותוספת פלואורופור כפי שהודגם בהמשך. עבור צביעה גרעינית של תאים, כסו את המגלשה בתמיסת עבודה DAPI ודגרו עליה בתא לח למשך חמש דקות בטמפרטורת החדר.
לאחר מכן שטפו את המגלשות במים מזוקקים פעמיים שלוש פעמים, דקה כל אחת. הסר טיפות מים מהמגלשה. הוסף 10 עד 20 מיקרוליטר של מרווה אנטי פלואורסצנטית לשקופית, ואטם אותה עם זכוכית כיסוי מיקרוסקופ.
