כדי להתחיל, בצע ציטומטריית זרימה על תאי Trypanosoma brucei המבטאים פלואור. פתח פריסה חדשה וגרור ושחרר את קבצי FCS שנרכשו בחלון הפריסה. לסידור תאים חיים, בחר בפקד מסוג wild לא מוכתם כדי לפתוח חלון.
נתח את הנתונים באמצעות היסטוגרמות בערוץ YL2H או RL2H. במקרה זה, השתמש בהיסטוגרמה YL2H מכיוון שהדגימות הוכתמו ביודיד פרופידיום. לאחר מכן, הקימו שער דו-סקטוריאלי להפרדת תאים חיים ומתים, ותייגו את השער השמאלי כחי ואת השער הימני כמת.
החל והתאם שער זה בכל הדגימות. ודא שהשער משורטט כהלכה על-ידי הצגת השער בדוגמאות מרובות בערכת הנתונים. בפקד מסוג פרא לא מוכתם, לחץ פעמיים על השער החי.
קבעו את ציר X של התוויית הנקודות לאזור פיזור קדימה, ואת ציר Y לאזור פיזור צדדי. לאחר מכן השתמש בכלי שער מצולע כדי לתאר את אוכלוסיית התא ולתייג אותה כתאים. אל תכלול פסולת או תאים גוססים וצברים על ידי זהירות לגבי מיקומם האופייני בתרשים הנקודות.
החל את שער התאים מתחת לשער החי עבור כל הדגימות, וודא שהוא מכסה את אוכלוסיית התאים הסבירה עבור כל הדגימות. לחץ פעמיים על שער התאים בפקד מסוג פרא לא מוכתם כדי להציג את האירועים בתוך שער זה. להתאמת התוויית הנקודות, קבעו את ציר X לאזור הפיזור קדימה ואת ציר Y לגובה הפיזור קדימה.
זהה את ההתפלגות האלכסונית של תאים בודדים בתרשים נקודה זו, והבדיל אותם מכפילים. השתמש בכלי שער מצולע כדי להקיף את אירועי הסינגלט, ותן שם לסינגלטים של שער זה. החילו את שער הסינגלטים מתחת לשער התאים עבור כל הדגימות, וודאו שהוא אינו כולל כפילים תוך הכללת סינגלים, וכווננו את השער לפי הצורך בין דגימות שונות.
בדגימת הבקרה מסוג פרא לא מוכתמת, לחץ פעמיים על שער הסינגלט. שנה את ציר X של התוויית הנקודות ל- BL1H, ואת ציר Y ל- VL2H. בעזרת הכלי שער מצולע, צייר שער אלכסוני כדי ללכוד תאים פלואורסצנטיים מסוג פלואור-2 ב-VL2 וב-BL1.
תייגו שער זה כחיובי pHL. החל את השער החיובי pHL מתחת לשער סינגלט עבור כל הדגימות. כוונן את שער ה- pHL כך שיכסה תאים בעלי עוצמת פלואורסצנטיות גבוהה יותר מאשר התאים האוטופלואורסצנטיים בבקרה מסוג Wild.
כדי לייצא את הנתונים הסטטיסטיים, לחץ על עורך הטבלה, לאחר מכן ערוך את הסרגל ולבסוף, בחר הוסף עמודה. שלב עמודות עבור ספירה כוללת כפויה, ספירה חיובית pHL, תדירות חיה של סך הכל, תדירות חיובית pHl של אב, חציון חיובי pHL VL2H וחציון חיובי pHL BL1H. כדי להתאים את הגדרות הייצוא בעורך הטבלאות, הגדר את display לקובץ ואת text ל- CSV.
בחר/י את היעד והשם של הקובץ ולאחר מכן לחץ/י על ״צור טבלה״. החמצה הדרגתית קלה נצפתה לאורך זמן בתגובה לרעב, שהגיעה לשיא של 90 דקות. לאחר החזרת הגלוקוז כפי שמצוין על ידי הקו הירוק, ה- pH הגליקוזומלי חזר לרמות טרום הרעב תוך 30 דקות, מה שמרמז על כך שה- pH הגליקוזומלי הוא דינמי וניתן לווסת בתגובה לגלוקוז.
