עיבוד רקמת שומן חום Supraclavicular עבור צביעת Hematoxylin ו Eosin

1 התחל על ידי הנחת2 בקבוקון זכוכית scintillation המכיל 3 scBAT של העכבר ב PBS על שולחן העבודה. 4 החלף את PBS עם 10 מיליליטר קר, 5 4% paraformaldehyde. 6 מניחים את הבקבוקון על נוטטור, 7 מתנדנד בארבע מעלות צלזיוס לילה 8 כדי לתקן את scBAT.

9 למחרת, החלף את תמיסת הפרפורמלדהיד 10 בתמיסת 10 עד 15 מיליליטר PBS. 11 מניחים את הבקבוקון על נוטטור 12 ורוקדים במשך 30 דקות בטמפרטורת החדר. 13 החליפו את PBS במי מלח 0.85% 14 והמשיכו להתנדנד במשך 30 דקות נוספות.

15 לאחר מכן להחליף את מלוחים עם 10 מיליליטר 16 של 70% אתנול, 0.85% תמיסת מלח. 17 אחסנו את הבקבוקון במקרר של ארבע מעלות למשך הלילה 18 או עד שהוא מוכן להטמעת פרפין. 19 למחרת, הסר את תערובת המלח אתנול 70% 20 מהבקבוקון והוסף 10 עד 15 מיליליטר 21 מתוך 95% אלכוהול מיובש.

22 רוק את הבקבוקון על אגוז בטמפרטורת החדר 23 למשך שעה. 24 לאחר השטיפה השנייה, מוסיפים 10 עד 15 מיליליטר 25 של 100% אלכוהול מייבש 26 וממשיכים לנדנד על אגוז במשך שעה. 27 כדי לנקות scBAT להטמעה, מוסיפים 10 מיליליטר של טולואן 28 לבקבוקון וממשיכים להתנדנד על נוטטור 29 עד ש-scBAT שקוף.

30 לאחר מכן הטמיעו את ה-scBAT בשעוות פרפין. 31 חתכו את ה-scBAT עם מיקרוטום 32 והמשיכו לצביעת המטוקסילין ואאוזין. 33 צביעת המטוקסילין ואוזין אישרה 34 כי scBAT כולל מבני רקמה אופייניים 35 של רקמת שומן חומה, 36 כולל מספר רב של אדיפוציטים מולטילוקולריים קטנים 37 הן בעכברים לאחר הלידה והן בעכברים בוגרים.