אנקפסולציה של תאים וננו-חלקיקים לטיפות לצורך הדמיה פלואורסצנטית

כדי להתחיל, למלא מזרק מיליליטר עם 500 מיקרוליטר של שלב רציף. חבר את המיקרו-צינור PTFE למחט בגודל 27 אינץ' בגודל 0.75 אינץ'. הרכיבו את המכלול על המזרק ולאחר מכן על משאבת המזרק.

לאחר מכן ניקבו חור באמצעות ניקוב ביופסיה של 0.75 מילימטר באמצע מגרעת PDMS. משכו כשלושה סנטימטרים של צינורות PTFE דרך החור במגרעת, ודחפו את המכלול לחלק העליון של קצה פיפטה של 200 מיקרוליטר. אטם את המחבר עם דבק UV לריפוי על גבי פיפטה, וחבר את הצד השני של הצינור למחט 23 מד 1.25 אינץ '.

לאחר מכן, למלא שני מזרקים מיליליטר אחד עם 500 מיקרוליטר של שמן מינרלי קל. חברו שתי מחטי מד 23 עם האביזרים בהתאמה אישית והרכיבו אותן על משאבת המזרק. באמצעות תוכנת הבקרה של משאבת המזרק, שאפו ננו-חלקיקים מתפקדים ותמיסת תאים לתוך קצה הפיפטה של הפאזות המימיות.

לאחר ניקוי תא התצפית המוכן, הדקו את התא למחזיק התא המודפס המצויד בשני מגנטים ניאודימיום ב -30 מעלות. כעת, פתחו את שתי היציאות וחברו מגבת נייר ליציאה העליונה כדי לספוג את השלב החיצוני העודף במהלך המילוי. חבר את הפאזה הרציפה לכניסה העליונה של השבב המיקרופלואידי.

לאחר מכן, לשטוף את השבב עם השלב הרציף במשך כ 30 שניות בקצב זרימה של 1800 מיקרוליטר לשעה. חבר את קצות פיפטה של תמיסות מימיות לשני הפתחים האמצעיים של השבב. התחל את זרימת התמיסה המימית ב 200 מיקרוליטר לשעה עבור כל תמיסה.

ברגע שהנוזל מופיע בשקע, התחל את זרימת שלב השמן המופלר ב 800 מיקרוליטר לשעה. המתן עד ייצור טיפות יציב הוקמה, מסומן על ידי פתרון הומוגני אפור, מבריק בשקע. לאחר מכן חבר את המיקרו-צינורות PTFE ליציאת היציאה כדי לאסוף את הטיפות.

באמצעות מודול ferrule של מקשה אחת הדוקה אצבע, לכוון אותם לתוך תא תצפית. לאחר מילוי התא, עצור את הזרימה וסגור את היציאות באמצעות תקעי יציאות באמצעות לחץ חזק באצבע. לאחר ייצור טיפתי, שטפו את השבב בשמן מופלר, ואחריו חנקן, כדי לפוצץ את כל הנוזלים שנותרו.

הרכיבו את מחזיק התא על המיקרוסקופ עם שלב בפורמט צלחת באר. לאחר מכן, באמצעות המטרה 10x, העבר את המיקרוסקופ לערוץ שדה בהיר. התמקדו בטיפות המשותקות בשדה הבהיר, ועברו למרכז החדר.

לאחר מכן, הפעל את מערכת המיקוד האוטומטית. התאימו את מישור המדידה בערוץ השדה הבהיר כך שקצות הטיפה ייראו כעיגולים שחורים חדים שניתן להבחין ביניהם בקלות מפאזת השמן ומהרקע. עברו על כל אחת מתעלות הפלואורסצנטיות, וקבעו את מישור המדידה האופטימלי עבורן.

למדידות רילוקיישן, התמקדו בצבר הננו-חלקיקים בתעלות FITC, TRITC וציאנין5.