כתישה והומוגניזציה של דגימות רקמת שומן בין-שרירית אנושית קפואה לבידוד גרעינים

כדי להתחיל, מלא את המיכל עם מרגמות מקום חנקן נוזלי, מזיק מיקרו סקופים, מרית, זכוכית downs, נירוסטה, ו downer אוטומטי על פלטפורמת העבודה. מצננים מראש את הכוס בכוס מלאה בקרח. מלאו את שתי המרגמות המכילות את המזיק והמרית בחנקן נוזלי כדי לקרר את המכשירים.

בינתיים, הוסיפו מיליליטר אחד של חיץ הומוגניזציה למורדות הזכוכית. ממלאים את שתי המרגמות בחנקן נוזלי ויוצקים את 50 המיליגרם של דגימת רקמת השומן הבין-שרירית האנושית לאחת המרגמות. עבור כתישת, לחץ בעדינות את pestle על חתיכת הרקמה כדי לשבור אותו לחתיכות קטנות.

ברגע שהרקמה נכתשת, ועדיין נשאר רבע עד חצי טיט של חנקן נוזלי. הטה את חומר המליטה האוסף רקמה כתושה בשפת הטיט. ברגע שהחנקן הנוזלי מתאדה, גרפו את הרקמה המרוסקת לתוך מורדות הזכוכית המכילים חוצץ הומוגניזציה.

על הדאונר האוטומטי. הזיזו את הזכוכית כלפי מטה מעלה ומטה את משטח הנירוסטה במשך 10 פעימות בכיוון קדימה, ולאחר מכן 10 פעימות בכיוון ההפוך. ברגע שהתמיסה עכורה ונטולה משברי רקמה נראים לעין, העבירו אותה לצינור קשירה נמוך של 1.7 מיליליטר על קרח.

שוטפים את המורדות עם 400 מיקרוליטר של חיץ הומוגניזציה ומעבירים אותו לצינור קישור נמוך.