בידוד וקנולציה של כלי לימפה מזנטריים למדידת ציטוזולית, סידן חופשי וקוטר כלי הדם בהתכווצות כלי הלימפה

כדי להתחיל, לקחת חוט תפר משי קלוע ולהפריד אותו חוט נימה אחד. השתמש בשני מלקחיים Dumont 5 עם קצוות קהים מיקרו ומלקחיים כדי ליצור לולאה כפולה סביב קצה המלקחיים האחרים. בעזרת המלקחיים הלולאים, תפסו את הקצה הרופף של התפר ומשכו אותו בזהירות דרך שתי הלולאות.

השתמשו במספריים קפיציות של Vannas כדי לחתוך תפרים עודפים משני הצדדים. לאחר עריפת ראשה של החולדה שעברה המתת חסד, בצעו חתך ארוך לאורך קו האמצע של דופן הבטן. ואז החוצה את mesentery.

חותכים את החיבור ממש מתחת לסוגר הפילורי, כשניים עד שלושה סנטימטרים מעל הצקום וכן את החיבור לפי הטבעת. לאחר מכן, שטפו את המזנטריות השלמות המנותחות ב -200 מיליליטר של תמיסת מלח פיזיולוגית קרה כקרח. לאחר מכן, העבירו ואבטחו אותם בצלחת פטרי מרופדת סיליקון המכילה תמיסת מלח פיזיולוגית קרה כקרח.

באמצעות מיקרוסקופ סטריאופוני, מלקחיים עדינים של Dumont 5 inox, ומספריים קפיציים של Vannas, מנתחים כלי לימפה מזנטריים מסדר שני מהשומן שמסביב ומרקמות החיבור. כעת, העבירו את כלי הלימפה המנותח לתא השפע של כלי הדם לקנולציה על צינוריות זכוכית. החליקו קשר יפה אחד על כל צינורית זכוכית כהכנה לאבטחת הכלי על הצינוריות מאוחר יותר.

בעזרת חתיכת שומן קטנה, מכוונים את כיוון כלי הלימפה ומחברים את הקצה הדיסטלי ל-P1. החלק את הקשר במורד הצינורית והדק אותו כדי לאבטח את כלי הלימפה. לאחר מכן, לחץ על כלי הלימפה כדי לחזק מילימטרים של כספית בתא זילוח. הניחו אבן מבעבעת עם 7% פחמן דו חמצני ו -93% חמצן בתא האמבטיה כדי לשמור על pH פיזיולוגי.

חבר את התא לווסת הטמפרטורה והגדר אותו על 37 מעלות צלזיוס.