פרוטוקול חיסון ישיר (DIP) לזיהוי חיידקים באמצעות מערכת אוטומטית לזיהוי מיקרוביאלי ובדיקת רגישות מיקרוביאלית (aMIAST)

כדי להתחיל, ספוג את המחיצה של בקבוק תרבית דם אוטומטי, שיש אורגניזמים גראם-שליליים מונומורפיים עם 70% אלכוהול איזופרופיל בתוך ארון בטיחות ביולוגית Class 2A. ציירו חמישה מיליליטר של תערובת מרק דם לתוך מזרק סטרילי מצויד מחט 21 מד. לאחר מכן, לחטא את מחיצת הגומי של צינור מפריד גומי.

מעבירים את תערובת מרק הדם לתוך הצינור. צנטריפוגה את הדגימה ב 160 G במשך 10 דקות. כעת, הוציאו בזהירות את הסופרנאטנט לתוך ארון בטיחות ביולוגית.

מעבירים את הסופרנאטנט לבקבוקון חדש לאיסוף דם רגיל. מניחים את הבקבוקון הסגור בצנטריפוגה ב 2000 גרם למשך 10 דקות. עכשיו, שאפו את הסופרנאטנט עם פיפטה סטרילית.

לאחר מכן מוציאים שלושה מיליליטר של מי מלח סטריליים לתוך צינור aMIAST עם בקבוק מתקן. באמצעות לולאת חיסון סטרילית, בחר את גלולת החיידק מתחתית הבקבוקון וחסן אותה לתוך צינור aMIAST. השתמש במי מלח סטריליים ובמד צפיפות כדי להתאים את עכירות המתלה בין 0.47 ל -0.63.

לאחר מכן מניחים חיבור נימי של כרטיס זיהוי aMIAST גרם שלילי בצינור הראשון. מקם את הקלפים שנבחרו כראוי על קלטת. כעת, טען את הקלטת למיקומה בתא המילוי כאשר הברקוד לדוגמה פונה פנימה.

סגור את הדלת ולחץ על מילוי במסך ממשק המשתמש. עם השלמת מחזור המילוי, נורית החיווי הכחולה במערכת תהבהב. כעת, העבירו את הקלטת מתא המילוי לתא הטעינה.

הסר את פסולת הקלטת עם השלמת הטעינה. תרבית משנה את התרחיף שנותר בצינורות על אגר CLED כדי לבדוק את טוהר המבודדים. התוצאות של שבעה בקבוקי תרבית דם חיוביים, שזוהו באמצעות פרוטוקול החיסון הישיר, היו צורמות עד לרמת המין.

מתוך 105 תשלילי גרם הניתנים לדיווח RAST שזוהו על ידי פרוטוקול האינוקולום הסטנדרטי, 98 זוהו נכון על ידי פרוטוקול האינוקולום הישיר. מבין 99 בקבוקי גרם שליליים שאינם ניתנים לדיווח של RAST, זוהה גרם שלילי שניתן לדווח עליו בארבעה בקבוקי תרבית דם חיוביים.