כדי להתחיל, צנטריפוגה את צינורות הדם הקרוש ב 626 ל 1, 409 G במשך 20 דקות ב שתיים עד שמונה מעלות צלזיוס. לאחר מכן לאסוף בזהירות את supernatant בצינור חדש. אחסנו את הסופרנאטנט בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס.
לאחר מכן, הגדר תקן ריק ובארות דגימה. פיפטה 50 מיקרוליטר של התקנים המדוללים לתוך צלחת ELISA. לאחר מכן להעביר 40 מיקרוליטר של דגימות מדולל לתוך בארות הדגימה.
הוסף 10 מיקרוליטר של סרום לתוך בארות הדגימה. כעת, אטמו את הצלחת בסרט איטום. מניחים את הצלחת האטומה באינקובטור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
דללו את תמיסת הכביסה המרוכזת פי 30 במים מזוקקים לקבלת תמיסת שטיפה בחוזק יחיד. לאחר מכן, להסיר את הסרט איטום מן הצלחת ולהשליך את הנוזל. עכשיו, למלא כל באר עם 200 מיקרוליטר של פתרון כביסה חמש פעמים.
לאחר השלכת הסופרנאטנט בפעם האחרונה, טפחו על הצלחת לייבוש. פיפטה 50 מיקרוליטר של מגיב האנזים לכל הבארות מלבד אלה ריק. לאחר מכן אוטמים את הצלחת עם סרט איטום לפני הצבתו באינקובטור ב 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
לאחר ששטפו את הצלחת חמש פעמים נוספות, הוסיפו 50 מיקרוליטר מכל אחד ממפתחי הצבע, A ו-B.נערו את הצלחת בעדינות כדי לערבב היטב. לאחר מכן לדגור על הצלחת ב 37 מעלות צלזיוס בתאורה חלשה במשך 10 דקות. עכשיו, פיפטה 50 מיקרוליטר של פתרון לעצור לתוך כל באר כדי לסיים את התגובה.
למדוד את הספיגה של כל באר ברצף ב 450 ננומטר. ריכוז ההומוציסטאין בפלזמה בקבוצת המתיונין היה גבוה פי שניים מאשר בקבוצת הביקורת. ריכוזי הומוציסטאין בפלזמה היו נמוכים יחסית בקבוצות הטיפול.
