העשרת דגימת הריאה לתאי T באמצעות העשרת חרוזים מגנטית

כדי להתחיל, להוסיף 50 מיקרוליטר של מיקרו-כדוריות CD90.2 נגד עכבר לתאי הריאה המבודדים. לאחר ערבוב התערובת, לדגור אותה במשך 10 דקות בארבע מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הניחו עמודת הפרדת תאים פאראמגנטית על מגנט הפרדת תאים בעל מיקום אחד או ארבעה.

מקם צינור חרוטי פתוח של 15 מיליליטר מתחת לכל עמוד כדי ללכוד את הזרימה דרכו. הקדים את העמוד בשלושה מיליליטר של חיץ מיון קר, המאפשר לעמוד להתנקז באמצעות כוח הכבידה לתוך הצינור החרוטי שמתחת. לאחר שהתאים דגרו עם המיקרו-כדוריות במשך 10 דקות, הוסיפו חיץ מיון קר לנפח של מיליליטר אחד והעבירו את התערובת דרך מסננת תאים של 100 מיקרומטר המונחת על גבי העמודה.

אספו את זרימת העמוד לתוך צינור חרוטי טרי של 15 מיליליטר הממוקם מתחת לעמודה. לאחר שתרחיף התא התנקז לחלוטין דרך העמודה, הוסף שלושה מיליליטר נוספים של חיץ מיון קר לצינור המקורי והחל אותו על העמוד דרך הרשת לפני הסרת המסננת. כאשר הדגימה התנקזה לחלוטין לתוך העמוד ולא יוצאת זרימה נוספת, הסר את העמוד מהמגנט והנח אותו על גבי צינור חרוטי טרי של 15 מיליליטר.

הוסף חמישה מיליליטר של מאגר מיון קר לעמודה. כדי לנטרל את התאים הקשורים, דחפו את בוכנה העמוד מטה בתנועה רציפה אחת, ואילצו את המאגר לצאת מהתחתית לתוך צינור חדש. צנטריפוגה את הדגימות המדוללות ב 400 x גרם במשך חמש דקות בארבע מעלות צלזיוס.

בזהירות לשאוף את supernatant, משאיר כ 100 מיקרוליטר של supernatant ואת גלולת התא. בממוצע, תהליך ההעשרה משחזר יותר מ 99% מכל תאי T חיוביים CD90.2 מן הריאות עם יותר מ 90% טוהר.