hSATMVEC-Adipocyte Co-culturing לחקר שיחות צולבות תאיות בחולים שעברו השתלת CIED

כדי להתחיל, הפשיר את המעבר, אחד אנושי לבן תת עורי preadipocytes, ולהוסיף את התאים לתוך בקבוק T75 המכיל 12 עד 15 מיליליטר של preadipocyte חם צמיחה media-2. לאחר שהתאים מגיעים למפגש של 90%, שטפו אותם עם PBS ודגרו עליהם עם מיליליטר אחד של תמיסת 0.25% טריפסין-EDTA למשך שתי דקות. באמצעות מיקרוסקופ אור, לאשר את ניתוק התא ולהוסיף 23 מיליליטר של preadipocyte גדילה media-2 לתאים.

יש לפזר מיליליטר אחד של תרחיף תאים לכל באר של צלחת נלווית בת 24 בארות ולגורר על הצלחת כדי להגיע למפגש תאים. לאחר מכן להחליף את התקשורת עם מיליליטר אחד של מדיום התמיינות preadipocyte לדגור ב 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני במשך 10 ימים. ביום השישי של ההתמיינות, זרעו חמש פעמים 10 בחזקתם של ארבעה MVECs SAT אנושיים ב-500 מיקרוליטר של מצע גידול MVEC שלם על גבי תוסף טרנסוול.

מניחים את האינסרט בבאר המכילה 500 מיקרוליטר של מצע גידול MVEC שלם ודגרים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני. ביום ה-10, כאשר האדיפוציטים מובחנים לחלוטין, הסר מחצית מהמדיה מכל באר והעבר את תוספות הטרנסוול המכילות MVEV SAT מפגש לכל באר. לדגור על הצלחת במשך 24 שעות כדי לקבל תרבות משותפת.

ככל שהפרדיפוציטים הלבנים התת עוריים האנושיים הופכים מובחנים יותר, ניתן להבחין בהתפתחות של vacuoles שומנים.