כדי להתחיל, הניחו נבל פלטינה בסירת שקילה ליד פלטפורמת MEA. לאחר מכן כסו את הנבל בכשלושה מיליליטר של aCSF כדי להפחית את נטיותיו ההידרופוביות. השתמש במספריים כדי לחתוך כ -1.5 אינץ 'מהקצה הצר של פיפטת העברה.
לאחר מכן, השתמש פיפטה שונה כדי לאסוף פרוסת המוח מן החדר מחזיק פרוסה. מוציאים בעדינות את פרוסת המוח וכל תמיסה בפיפטה לתוך השבב היטב. כדי למקם את הפרוסה כראוי, השתמשו במברשת צבע רכה כדי ליצור זרם בתמיסה שדוחף את פרוסת המוח לאלקטרודות הקלטה.
בעזרת מלקחיים, הניחו בעדינות את הנבל על פרוסת המוח כשהחוטים כלפי מטה כדי ללחוץ את הפרוסה על אלקטרודות ההקלטה. כיוון הנבל כך שהצד ללא מסגרת פונה לכיוון מחט הזרימה ומסגרת הנבל לא תבוא במגע עם אף אחת מאלקטרודות ההקלטה. עכשיו לקחת פיפטה להשליך ולהסיר עודף aCSF.
לאחר מכן קחו מגבון אנטיסטטי, סובבו פינה כדי ליצור קצה, והשתמשו בו כדי לספוג את שאריות ה-aCSF סביב אלקטרודות ההקלטה מבלי לגעת באלקטרודות ההקלטה, בפרוסת המוח או בנבל. באמצעות פיפטה aCSF ייעודית, להוסיף במהירות כשני מיליליטר של aCSF carbogenated כדי לכסות את פרוסת המוח. ממלאים את הבאר בכשלושה מיליליטר aCSF קרבוגני עד שהיא מלאה בערך שלושת רבעי.
לאחר מכן השתמשו במיקרוסקופ או במצלמה כדי לצלם תמונה ברזולוציה גבוהה של פרוסת המוח על שבב MEA. הניחו את צינורות הזרימה והזרימה לתוך הכד המלא ב-aCSF. הניחו את מחט הזרימה קרוב לתחתית השבב היטב, ממש מחוץ לאלקטרודות ההקלטה.
לאחר מכן מניחים את מחט הזרימה קרוב לחלק העליון של השבב היטב, לכיוון הקצה, כך שהנוזל עולה כמעט עד שולי השבב היטב, כארבעה מיליליטר. כעת הגדר את זרימת הזלוף לחמישה מיליליטר לדקה ואת זרימת הזלוף לשבעה מיליליטר לדקה. הפעל את הזרימה והיציאה.
הסר את מחט הזרימה מבאר השבב עד שהיא מתחילה להפיק תמיסה במקום אוויר. לאחר מכן, מניחים את המחט בחזרה בתוך השבב היטב. לאחר מכן השתמש במחמם תמיסה כדי לשמור על התמיסה בטמפרטורה פיזיולוגית או קרוב אליה, סביב 34 עד 37 מעלות צלזיוס.
תן aCSF לחורר על פרוסת המוח במשך 10 דקות. לאחר שחלפו 10 דקות, העבר את צינור הזרימה אל כד ההשלכה. לאחר מכן העבירו את צינור הזרימה לכד המכיל את התמיסה הפרו-פרכוסית.
יש לשטוף את ה-aCSF הלא פרכוסי ממערכת הזילוח לתוך ההשלכה למשך 10 דקות. לבסוף, העבירו את צינור הזרימה לתוך הכד המכיל את התמיסה הפרו-פרכוסית ואפשרו לו להסתובב עד לסיום הניסוי. פעילות אלקטרוגרפית חזקה דמוית התקף נצפתה לעתים קרובות באזורים הניאוקורטיקליים תחת פרדיגמות אפס מגנזיום ו-4-אמינופירידין.
אזורי ההיפוקמפוס הראו שונות רבה יותר בין פרוסות המוח, כאשר חלקם הדגימו פעילות דמוית התקף ואחרים הראו הפרשות חולפות. פעילות נאוקורטיקלית תחת פרדיגמת אפס מגנזיום הראתה עוצמה גבוהה יותר בפסי תדרים מרובים בהשוואה לפרדיגמת 4-aminopyridine. פעילות ההיפוקמפוס בפרדיגמת אפס מגנזיום הדגימה עוצמה גבוהה יותר בפסי תדרי גמא גבוהים בהשוואה לניאוקורטקס ולשני אזורי המוח בפרדיגמת 4-אמינופירידין.
