טיהור תאים חד-גרעיניים היקפיים בדם (PBMCs) באמצעות שיטה אוטומטית מבוססת חרוזים בתפוקה גבוהה

כדי להתחיל, תייגו שני צינורות של 14 מיליליטר כ-A ו-B, צינור צנטריפוגה אחד של 15 מיליליטר כ-C וצינור צנטריפוגה אחד של 15 מיליליטר כפסולת. לאחר צנטריפוגה של כל הדם, לאסוף ולהוסיף מיליליטר אחד של מעיל באפי מוכן לצינור A.להוסיף 60 מיקרוליטר של 0.1 EDTA טוחנת לצינור A.ואז מערבלים את צינור החרוז המגנטי במשך 30 שניות. כדי להפעיל את מכשיר ה-PBMC האוטומטי, הפעל את המכשיר בקדמת המכשיר.

במסך הבית של המכשיר, בחר פרופיל ובחר את הפרוטוקול הרצוי. לאחר מכן הזן את עוצמת הקול ההתחלתית וחזור על הפעולה עבור כל דגימה. בחר את כל הרבעים שישתמשו באותה ערכת מגיבים.

לאחר מכן, טען חומרים מתכלים, עצות סינון ומיכל חיץ המסומנים בתווית לכל רביע של קרוסלת המכשיר לפי ההוראות במסך לוח המחוונים האוטומטי של PBMC. לאחר השלמת הטעינה, הסר מכסים מחומרים מתכלים וריאגנטים ובחר הפעל במסך המכשיר. בסיום הריצה, בחר בטל פריקה והסר דגימות מהקרוסלה של המכשיר.

העבירו 500 מיקרוליטר מהתאים לכוס דגימה לספירת תאים ללא דילול. בהשוואה בין השיטה האוטומטית מבוססת החרוזים לשיטה הידנית, לא זוהו הבדלים משמעותיים בכדאיות התא או בספירה הכוללת של התאים. השיטה הידנית עיבדה שמונה דגימות ב-43 דקות ואילו השיטה האוטומטית ארכה 57 דקות, כולל 35 דקות של עיבוד ידני.

הכדאיות הממוצעת של התאים הייתה גדולה מ-90% עבור PBMCs שעובדו תוך חמישה ימים ויותר מ-75% עבור אלה שעובדו תוך 10 ימים. התשואות הממוצעות של PBMC ירדו ב-50% לאחר חמישה ימים בהשוואה לדגימות שעובדו תוך 24 שעות.