24 שעות לאחר הננו-חלקיק המגנטי, הזרקת אנטי-מיקרו-רנ"א 10b, לשקול את העכבר ולחשב את נפח d-luciferin לתת עבור מינון של 150 מיליגרם לקילוגרם. הכינו מזרק 28 מד עם נפח המגן על התמיסה מפני אור ישיר. לאחר הרדמה, בעדינות לקרצף את העכבר כדי למנוע פגיעה נוספת באתר הניתוח, ולהזריק את המינון של d-luciferin intraperitoneally.
אפשר לעכבר להתאושש והמתן 10 דקות לפני ההדמיה. לאחר הכנת מערכת הדמיה in vivo, או סורק IVIS, הניחו את המזרן השחור בעל הפלואורסצנטיות הנמוכה על במת ההדמיה והגדירו את מערך חרוטי האף להדמיה. בתוכנה, לחץ על אשף ההדמיה.
לאחר מכן, בחר הדמיה bioluminescence, ולאחר מכן מסנן פתוח. במסך הבא, בחר נושא הדמיה ושדה ראייה. הניחו את העכבר המורדם במצב נוטה על סורק IVIS.
לחץ על רצף רכישה, ובאמצעות הגדרות חשיפה אוטומטית עם סף אות מינימלי של 3000 ספירות, צלם תמונה ללוקליזציה של תאי גליובלסטומה U-251 המסומנים בלוציפראז. לאחר מכן, באשף ההדמיה, בחר פלואורסצנטיות, ואחריה זוג מסונן עם תאורת epi. במסך הבא, בחר את הבדיקה, Cy5.5.
בחר את נושא ההדמיה ואת שדה הראייה. באמצעות הגדרות חשיפה אוטומטית עם סף אות מינימלי של 6, 000 ספירות, ללכוד תמונה עבור לוקליזציה של חלקיקים מגנטיים, אנטי microRNA 10b. הניחו את העכבר המורדם על מיטת MRI.
יש לשתק ולמקם את הראש לסריקה באמצעות מוט נשיכה ומוטות אוזניים. התקן את בדיקת הטמפרטורה הרקטלית המשומנת וודא שניטור הנשימה והטמפרטורה מתפקדים. מקם את סליל המוח של העכבר מעל הראש על ידי התאמת היתדות על מיטת העכבר לתוך החורים על הסליל, והדביק את הסליל למקומו כדי להפחית את התנועה במהלך הסריקה.
הניחו משטח קטן למחזור מים חמים מעל חלקו העליון של העכבר כדי לשמור על טמפרטורת הגוף. הזז את העכבר ואת מיטת ההדמיה למקומם לסריקה. בתוכנת הרכישה, התחל את שלב הגדרת הנדנדה כדי לכוונן ולהתאים את סלילי ה- MRI.
ודא שהעקבות ממורכזות ועמוקות ככל האפשר. לרכוש סריקה לוקלייזר שלושה מישורים של המוח. באמצעות הפרמטרים הבאים, לרכוש סריקות משוקללות T2 דו מימדי כדי לזהות את הגידול.
רכוש מפת b0 של המוח כולו כדי לחשב shim מקומי באמצעות כלי השירות map shim. השתמש בתמונות תלת-ממדיות משוקללות כוכבים T2 כדי להמחיש את הננו-חלקיקים. בעזרת הפרמטרים הבאים, רכשו מפת כוכבים T2 להדמיית ננו-חלקיקים נוספת באמצעות התמונה המשוקללת הדו-ממדית T2 כהפניה למיקום הסריקה מעל הגידול.
קבל 10 תמונות הד חיובי עם מרווח של חמש אלפיות שנייה בין זמן הד. בנקודת הסיום הניסיונית, לשקול את העכבר, ולחשב את נפח d-luciferin לנהל עבור מינון של 150 מיליגרם לקילוגרם. בצע הדמיה חיה של ביולומינסנציה 10 דקות לאחר ההזרקה, כפי שתואר קודם לכן.
הניחו את צלחת הפטרי עם המוח שהוצא מהעכבר שעבר המתת חסד בסורק IVIS. דמיינו את המוח עם שיטות ביולומינסנציה ופלואורסנציה באמצעות אותן הגדרות רכישה כמו דימות in vivo. אותות הפלואורסצנטיות והביולומינסנציה Cy5.5 בננו-חלקיקים מגנטיים בעכברים שהוזרקו נגד מיקרו-רנ"א 10b הראו קולוקליזציה ברורה, המעידה על העברת הננו-חלקיקים לגידול, בעוד שעכברי ביקורת לא הראו אות פלואורסצנטי.
הדמיית פלואורסצנטיות Ex vivo הראתה לוקליזציה של ננו-חלקיקים באיברי פינוי עיקריים, כגון הכבד והכליות. ירידה אופיינית באות MRI משוקלל T2 מדגימה את הפוטנציאל של ננו-חלקיקים מגנטיים, אנטי-מיקרו-רנ"א 10b כחומר ניגוד MRI לחצות את מחסום הדם-מוח ואת הצטברותו באזור הגידול.
