כדי להתחיל, להסיר את בקבוקוני משי FN מהמקפיא מינוס 80 מעלות צלזיוס, ומניחים אותם בקרח יבש להובלה. הביאו את הבקבוקונים לארון בטיחות ביולוגי, והניחו אותם במדף צינורות מיקרו-צנטריפוגה. עם ההפשרה, פיפטה 550 מיקרוליטר של תמיסת משי לתוך כל באר שנייה של צלחת 48 בארות.
מניחים את המכסה על הצלחת, ומניחים אותו בתוך קופסה סטרילית. העבירו בזהירות את הקופסה מארון הבטיחות הביולוגי, והשאירו אותה בתנאי סביבה למשך הלילה. למחרת, הביאו את הקופסה המכילה את הצלחת עם קרומי משי FN ותוספות סטריליות לארון הבטיחות הביולוגי.
הרימו בזהירות את הצלחת מהקופסה, פתחו את מכסה הצלחת ובדקו ויזואלית את היווצרות הממברנה על ידי התבוננות בעננות בבארות. בעזרת פינצטה סטרילית, הרימו אינסרט אחד והנחו אותו מטה אל הממברנה עד שהידיות נוגעות בחלק העליון של הבאר. לאחר הורדת כל התוספות, הניחו את המכסה על הצלחת והחזירו את הצלחת לקופסה הסטרילית.
הניחו לקרומים להיצמד לתוספות במשך שעתיים. לאחר מכן, הסר את הצלחת מהקופסה ופתח את המכסה. בעזרת פינצטה סטרילית, מוציאים את האינסרט מהבאר.
מלאו את העלון ב-100 מיקרוליטר DMEM/F12 לזריעה בזאלית, או 200 מיקרוליטר לזריעה אפית. מעבירים את האינסרט לבאר ריקה של צלחת בת 24 בארות, וממלאים את הבאר במיליליטר אחד של DMEM/F12. לאחר קצירת המספר הרצוי של קרטינוציטים אנושיים, באמצעות פיפטה P200, שואפים 20 עד 50 מיקרוליטר של השעיית תאים.
כוונו את קצה הפיפטה לכיוון מרכז הממברנה ולחצו באיטיות על בוכנה הפיפטה, תוך מגע עם הטיפה עם מדיום התרבית שבתוך האינספק. לאחר שכל הממברנות מועברות, הזיזו את הצלחת בתבנית מספר שמונה כדי לפזר את התאים באופן שווה על פני הממברנות. לדגור על התרבית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני.
בעזרת פינצטה, מרימים את התוספות מתוך צלחת 24 הקידוחים, ומשאירים את מדיום התרבית בבארות. לאחר מכן הפוך את העלון כך שהצד הבסיסי פונה כלפי מעלה. מניחים את האינסרט ההפוך בצלחת הפטרי.
שאפו 20 מיקרוליטר של תרחיף תאי קרטינוציטים אנושי מרחף עם פיפטה P200. כוונו את קצה הפיפטה לכיוון מרכז הממברנה, ולחצו באיטיות על בוכנה פיפטה כדי ליצור טיפה שנופלת על הממברנה. מניחים את המכסה על צלחת הפטרי.
מעבירים את צלחת הפטרי ואת צלחת 24 בארות המכילה בינונית לאינקובטור למשך 30 דקות. לאחר הדגירה, הביאו את צלחת 24 הבארות ואת צלחת הפטרי לארון הבטיחות הביולוגי. בעזרת פינצטה, בחרו אינסרט אחד והפכו אותו כך שהצד האפי של הממברנה פונה כלפי מעלה והצד הבסיסי כלפי מטה.
בעזרת פיפטה P200, מוסיפים 200 מיקרוליטר של מדיום תרבית בתוך העלון. מחזירים את האינסרט לבאר ממולאת מראש של צלחת 24 הקידוחים. תרכבו את התוספות ב-37 מעלות צלזיוס וב-5% פחמן דו חמצני.
קרטינוציטים שגודלו בתרבית על קרום משי FN כיסו באופן שווה את פני השטח והראו מורפולוגיה מרוצפת ביום הראשון. קרטינוציטים יצרו שכבה קונפלואנטית ביום השלישי, מה שמצביע על תפקוד אפיתל, ויצרו רשת של צמתים הדוקים המעידים על כך שהם מניחים פונקציות אפיתל פיזיולוגיות. כדאיות גבוהה של תאים נצפתה על פני קרומי משי FN לאחר שלושה ימים, ללא הבדל משמעותי בכדאיות בין המרכז לפריפריה.
מערכת קרום משי FN תמכה בכדאיות קרטינוציטים דומה או טובה יותר ממערכות קרום PET מסחריות.
