כדי להתחיל, לאשר את הרדמה של העכבר על ידי הערכת היעדר תגובה צביטת בוהן. הצמידו את העכבר לבעל החיים הפנימי כאשר ראשו וכתפיו האחוריות העליונות חשופים דרך הפתח המלבני בעוד הגפיים האחוריות התחתונות והגפיים האחוריות התחתונות נותרות מוגנות. החל סרט ניתוח על הכתפיים האחוריות העליונות כדי לאבטח את העכבר.
הכנס את מחזיק החיות הפנימי למחזיק החיצוני. לאחר פתיחת קו ההרדמה השניונית בתוך מחזיק החיה, אטמו את קצה המחזיק כדי למנוע מחומר ההרדמה לדלוף החוצה מהצינור ומהעכבר לזוז במהלך הניסוי. יישרו את הצמצם המעגלי בקוטר ארבעה מילימטרים של מחזיק החיה החיצוני ישירות מעל עינו השמאלית של העכבר.
מקם את בעל החיים על שולחן XY באמצעות ידיות הבקרה, כך שהצמצם שלו מתיישר עם קנה אקדח הפיינטבול, והמשטח החיצוני נמצא חמישה מילימטרים מקצה הקנה. לאחר הכיול, התחל את רצף האוויר בלחץ יתר כדי לספק שני התפרצויות של 15 PSI במרווח של 0.5 שניות. עבור עכבר קבוצת דמה, הרחיקו את בעל החיים מהקנה, חסמו את האוויר עם מגן קרטון וחשפו אותו לרעש האוויר בלחץ יתר.
אקסונים בריאים צפופים נצפו בקבוצת הדמה. לעומת זאת, קבוצת ITON הראתה סימנים של ניוון אקסונים, כולל אי סדירות בצורת האקסון והתמוטטות נדן המיאלין. המספר הכולל של אקסונים ירד באופן משמעותי בקבוצת ITON בהשוואה לקבוצת הדמה.
עלייה משמעותית בפרופילים ניווניים זוהתה בקבוצת ITON בהשוואה לקבוצת הדמה. התפשטות מוגברת של תאי מיקרוגליה נצפתה ברשתית של עכברי ITON, כאשר מיקרוגליה התפשטה לתוך השכבה הגרעינית החיצונית. בהשוואה לקבוצת הדמה, שבה תאי מיקרוגליה נשארו בשכבות הרשתית האופייניות להם.
קשרים סינפטיים שלמים בין תאים דו-קוטביים מוט וקולטני אור נצפו הן בעכברי ITON והן בעכברי דמה, ללא סינפטופתיה מזוהה.
