בידוד ועיבוד של רשתיות שלמות לצביעת תאי גנגליון ברשתית עכבר

לאחר המתת העכבר באמצעות נקע צוואר הרחם לצורך אינקולציה ועיבוד גלגל העין, סמן את קצה הקרנית בצד הגבי של גלגל העין באמצעות סמן כחול כדי להבטיח התמצאות במהלך הדיסקציה. באמצעות מספריים, להסיר רקמות שריר שאריות המחוברות גלגל העין. לאחר מכן העבירו את גלגל העין לתוך צינור מיקרו-צנטריפוגה תחתון עגול של שני מיליליטר מלא PBS.

כעת, הכניסו את גלגל העין לצינור נוסף של שני מיליליטר המכיל 4% פרפורמלדהיד טרי לקיבוע בארבע מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. תחת מיקרוסקופ ניתוח, השתמש במלקחיים עדינים כדי לבצע חתך קטן על הקרנית. מחזירים את גלגל העין לקיבוע ודגרים בארבע מעלות צלזיוס למשך שלוש שעות כדי לשמר את המורפולוגיה של הרקמה.

כדי להסיר את הקרנית והעדשה, באמצעות מספריים כירורגיים עדינים לבצע חתך קטן של כמילימטר אחד סביב לימבוס הקרנית, הגבול בין הקרנית לבין הסקלרה. בזהירות לחתוך סביב היקף הקרנית, לכרות אותו לחלוטין כדי לחשוף את המבנים הבסיסיים. לאחר מכן, באמצעות מלקחיים עדינים, תפסו בעדינות והרימו בזהירות את העדשה מהרקמות שמסביב כדי למנוע פגיעה ברשתית.

עבור חתך סקלרלי, לחתוך חריץ מדויק לובן העין עם מספריים אופתלמיים עדינים כדי להקל על הדיסקציה הבאה. לאחר מכן, עבור היפרדות הרשתית, להחדיר מלקחיים שיניים לתוך החתך בין לובן העין לבין הרשתית. אחזו בעדינות בקצה הסקלרה, הימנעו מכוח מופרז כדי למנוע קריעת הרקמה.

הגדילו בהדרגה את החתך על ידי הזזת המלקחיים לאורך הגבול בין לובן העין לרשתית. השתמש בחלק השן של המלקחיים כדי להפריד בזהירות את לובן העין מהרשתית מבלי לפגוע בה. כעת, בעזרת מספריים חדים, מחלקים את הרשתית לארבעה דשים בערך שווים בגודלם.

פתחו בעדינות את הרשתית המנותחת בעזרת מברשת זיפים רכה והסירו בקפידה פסולת מפני השטח שלה.