כדי להתחיל, הורד את תוכניות הדופק NMR לספרייה במחשב המפעיל את ספקטרומטר NMR והתאם את גרסת TopSpin. הורד את הפולסים בצורת NMR לספרייה וודא שגרסת TopSpin מתעדכנת בהתאם. לאחר קביעת הרוחב הספקטרלי וזמני הרכישה המתאימים, הקלד edc בתוכנת TopSpin לספרייה חדשה כדי להעתיק את ניסוי HSQC.
כדי לפתוח את פרמטרי רצף הדופק הקלד ased, לחץ על שלוש הנקודות ליד הפרמטר PULPROG כדי לשנות את תוכנית הדופק לניסוי חנקן-15 R1 rho. לחץ פעמיים על תוכנית הדופק, לחץ על הגדר PULPROG לערכת הנתונים ואשר עם אישור. הקלד ased כדי לפתוח את פרמטרי רצף הדופק. הזן את כל עוצמות השיפוע ואורכי השיפוע החסרים כפי שניתן ברצף הדופק.
לאחר מכן, הזן עבור מונה הלולאה L3 מחצית הערך חנקן-15 TD בחלון פרמטר הרכישה. הזן עבור מונה הלולאה L6 את מספר נקודות נתוני ההרפיה המתועדות להתאמת עקומת ההרפיה. הגדר את TanhTan_half האדיאבטי.
פולס NL כצורה של פעימת חנקן-15 SP8. לאחר מכן הגדר את TanhTan_half2nd האדיאבטי. פולס NL כצורה של פעימת חנקן-15 SP9.
ודא שאורכי הדופק ארוכים מספיק עבור אדיאבטיות עם P8 מוגדר ל -3, 000 מיקרו-שניות. לאחר מכן הגדר את עיכוב השחזור של הסריקה הבין-סריקה, D1, לשתי שניות או יותר. הגדר את סריקות הדמה ל- 64 לפחות.
כנקודת התחלה, הגדר את מספר הסריקות לארבע והשתמש בכפולות של ארבע אם יחס האות לרעש נמוך מדי. הגדר את O1 לתדר המוביל המכויל, O2P ל -176 חלקים למיליון, והעתיק את O3P מניסוי חנקן-15 HSQC פרוטון. כעת, הגדר את אורך הדופק P7 לאורך הדופק של 90 מעלות שכויל קודם לכן.
לאחר מכן העתק את רמת עוצמת הדופק של הדופק 90 מעלות ל- PLW3 ו- PLW7. לאחר מכן, הגדר את אורכי הפולס P1 ו- P19 לאורך פולס פרוטון של 90 מעלות. הגדר את מספר ההפרשים בממד העקיף, TD שווה ל- L3 בשניים ב- L6. לאחר מכן, הגדר את הפולס SP5 המעוצב לצורת I-BURP2 ואת אורך הדופק P15 ל- 2, 000 מיקרו-שניות.
לאחר מכן פתח את תצוגת כלי הצורה על-ידי לחיצה על ה- E לצד הפולס בצורת I-BURP2 בחלון הפרמטר של רצף הדופק TopSpin. כדי לדמות את הפולס המעוצב לחץ על הלחצן התחל סימולציית NMR. בדוק את אורך הדופק המעוצב ואת זווית הסיבוב בחלון הסימולציה ולחץ על הפעל NMR SIM כדי להמשיך.
בדוק את טווח העירור בסימולציה ובחר את אורך הפולס המתאים של I-BURP2 כדי לכסות את הפיזור הספקטרלי של הפרוטון תוך הימנעות מעיור המים. הגדר את P15 לאורך הפולס המעוצב מחלון הסימולציה עם פעימת I-BURP2 הטובה ביותר. כעת, הגדר SPOFFS5 לכוונן את תדר המוביל של פולס I-BURP2, תוך הסטת טווח העירור שמאלה או ימינה כדי למנוע הפרעה למגנטיזציה של מים.
לאחר מכן פתח את הכלי צורת Bruker ולחץ על התחל סימולציית NMR כדי לקבוע את רמת ההספק המתאימה של הפולס המעוצב. הגדר את אורך פולס I-BURP2 לאורך הפולס המעוצב ושים לב לאורך פולס הפרוטון המלבני הרך של 90 מעלות המוצג בחלון הסימולציה. הקלד calcpowlev כדי לחשב את הפרש רמת העוצמה בדציבלים בין פולס פרוטון קשה של 90 מעלות לבין פולס פרוטון מלבני רך של 90 מעלות.
העתק את רמת העוצמה של פולס הפרוטון הקשיח של 90 מעלות ל- SPW5 והתאם על ידי הוספת ההבדל המשונן בדציבלים. כדי לקבוע את רמת ההספק של נעילת הספין חשב את אורך הדופק המתאים של 90 מעלות חנקן-15. השתמש calcpowlev כדי לחשב את הפרש הכוח בדציבלים בין כוח נעילת הספין לבין הדופק הקשה של 90 מעלות חנקן-15.
העתק את רמת ההספק של פולס החנקן-15 הקשיח של 90 מעלות ל- PLW7 והתאם את רמת ההספק של נעילת הספין PLW8 על ידי הוספת הפרש ההספק המחושב. העתק את רמת ההספק של נעילת הספין PLW8 לרמות צריכת החשמל SPW8 ו- SPW9. כדי לקבוע את רמת העוצמה של ניתוק חנקן-15, השתמש ב- calcpowlev כדי לחשב את הפרש ההספק בין העוצמה של פולס ניתוק חנקן-15 של 90 מעלות לבין הדופק הקשה של 90 מעלות חנקן-15.
העתק את רמת ההספק של הדופק הקשיח PLW7 חנקן-15 ב-90 מעלות לרמת הספק הניתוק PLW31 והתאם על-ידי הוספת הפרש ההספק המחושב בדציבלים. עבור פיצוי טמפרטורה לכלול קו להגדיר TEMP_ בתוכנית הדופק. הגדר את P18 למשך הזמן המרבי של נעילת הספין ששימשה בניסוי חנקן-15 R1 rho.
במקרה של חנקן-15, דגימות המסומנות בפחמן-13 כוללות את הקו המוגדר LABEL_CN בתוכנית הדופק. הגדר את P4 לאורך הדופק המחושב. השתמש calcpowlev כדי לחשב את הפרש הכוח בדציבלים בין P4 לבין פולס פחמן-13 קשה.
העתק את רמת ההספק של הפולס הקשיח פחמן-13 ל- PLW4 והוסף את הפרש ההספק המחושב בדציבלים. העתק את PLW4 ל- PLW2. כדי לקבוע את עיכובי ההרפיה המתאימים לדגימה, הפעל את שמונת דעיכות האינדוקציה החופשית הראשונות, או FIDs, ועבד אותן.
בחר ערכי vplist שבהם עוצמת השיא של ניסוי ההשהיה הארוך ביותר יורדת לפחות לאחד מעל e, אך לא נמוכה מ- 25% בהשוואה לניסוי ההשהיה הקצר ביותר. הקלד rga בשורת הפקודה כדי לקבוע את רווח המקלט. התחל ריצת בדיקה של ניסוי החנקן-15 R1 rho על ידי הקלדת zg בשורת הפקודה.
בדוק שאות המים מדוכא עבור כל העיכובים. כמו כן, בדוק תוספת תשע, התוספת השנייה של ערכת זיהוי ריבועית.
