This work was supported by the National Institutes of Health (HL114669). CM is a recipient of a postdoctoral research fellowship grant awarded by the Myocarditis Foundation, NJ.

מסר של אתיקה: נהלי כל החיה שנערכו בהתאם להנחיות לטיפול והשימוש בחי מעבדה ואושרו על ידי אוניברסיטת נברסקה לינקולן, לינקולן, NE. 1. אינדוקציה של ניסויי אוטואימוניות דלקת שריר לב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את פתרון פפטיד על ידי המסת Myhc-α 334-352 בפוספט שנאגרו מלוח 1x לריכוז סופי של 2 mg/1.5 מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את רעלן השעלת (PT) על ידי הוספת 1 מיליליטר של 1x PBS סטרילי לבקבוקון המכיל 50 מיקרוגרם של PT lyophilized להשיג ריכוז מניות של 50 ng / μl. קח 20 μl של המניה לתוך צינור מיליליטר סטרילי 1.5 ולהוסיף 980 μl של סטרילית 1x PBS להשיג ריכוז עבודה של ng / μl 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן adjuvant של פרוינד המלא (CFA), על ידי הוספת 40 מ&quot;ג Mycobacterium החפת H37Rv (MTB) לחלץ עד 10 מיליליטר של CFA כדי לקבל ריכוז סופי5 מ&quot;ג / מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את תחליב פפטיד-CFA. הערה: לאינדוקצית EAM, תחליב פפטיד-CFA היה מנוהלת ב150 μl מכיל של Myhc-α 334-352 לכל חיה 100 מיקרוגרם. לדוגמה, כדי לחסן את עשרה עכברים להשתמש 1.5 מיליליטר של תחליב פפטיד-CFA המכיל 1 מ&quot;ג של Myhc-α 334-352. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להכין 1.5 מיליליטר של תחליב, aliquot 750 μl של Myhc-α פתרון פפטיד 334-352 בצינור 1.5 מיליליטר אחד, וCFA השלימו עם MTB לעוד צינור 1.5 מיליליטר. באמצעות מזרק luer-Lok 3 מיליליטר, לצייר פתרון פפטיד הראשון, ואחריו את תמצית CFA / MTB. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף את המזרק לברזלי 3 כיוונים ולחבר את השקע האחר של ברזלים למ&quot;ל במזרק ריק 3. התאם את patency של ברזלים כך תערובת פפטיד-CFA זורמת ממזרק אחד למשנהו עם עמידות טובה באופן סביר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים על ידי דוחף את התוכן ממזרק אחד למשנהו שוב ושוב ל~ 1 דקות ולאחר מכן למקם את המכלול השלם על קרח ~ 3 דקות. חזור על פעולה זוהליך מינימאלי של 10x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את העקביות של התחליב על ידי הצבת טיפה זעירה בזהירות על עדיין מים בכוס זכוכית מיליליטר 100. אגל לא צפוי להתפזר במים. אם כן, ממשיך לערבב עד לקבלת המרקם הרצויה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את התוכן של תחליב מ3 מיליליטר מזרקים לתוך 1 מיליליטר המזרקים luer-Lok על ידי החלפה אחת משני המזרקים 3 מ&quot;ל מצורפים לברזלים עם מזרק 1 מ&quot;ל, ולצרף מחט 27 ½ G למזרק 1 מיליליטר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 150 μl של תחליב פפטיד-CFA בתת עורית במינון מפוצל בשני האזורים מפשעתי של נקבה שש עד שמונה שבועות בן עכברים / J (~ 75 μl כל אחד). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניהול של ההשעיה PT (100 ng) 100 μl intraperitoneally לכל חיה ביום 0 ויום 2 postimmunization. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על תהליך החיסון ביום 7 על ידי מתן 150 μl של תחליב פפטיד-CFA במינונים מפוצלים מתחת לעור לתוך שני צדי tהוא עצם החזה (~ 75 μl כל אחד). הכן תחליב זה טרי כאמור לעיל. לאחר מכן, ביום 21, להכפיף את בעלי החיים להדמית MRM, ראה שלב 3. </li></ol> 2. טיפול בבעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים כל עכבר בתא אינדוקציה הרדמה המכיל 2% תערובת isoflurane באוויר עם כרית חימום ממוקמת מתחת לשמירת חום, ולהעביר את בעלי החיים לבעל חיים שתוכנן במיוחד (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשתק את החיה במצב נוטה על בעל החיים ולכן החוטם שלה משתלב בחרטומו כדי לשמור על הרדמה (איור 1). לאבטח את הראש של העכבר עם ביס בר צמודים לשיניים הקדמיות של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדלק את תנור מכת אוויר עם הצינור לשקעה הוכנס לשעם האנכי של הסורק כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של החיה במהלך הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על הרדמה בisoflurane .5-2% בקצב זרימה של 2 מיליליטר / דקה במשך כל פגישת ההדמיה. לאשרהרדמה בשיטת קמצוץ הבוהן, אין תנועה צפויה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את חיישן פנאומטי כרית, חיישן הדופק oximetry סיבים אופטי זנב / קרסול עכבר, ובדיקת טמפרטורה רקטלית כדי לפקח על נשימה, קצב לב וטמפרטורת גוף, בהתאמה (איור 1). הערה: gating לב מתבצע באמצעות oximetry הדופק, המאפשר ניטור פולשני של רוויון חמצן בדם עורקים. החיישן הדופק oximetry צריך להיות מחובר לקרסול השמאל, וכף הרגל צריכה להיות מאובטח עם לולאת חוט והדביקה על מנת לשמור על הקרסול בחיישן. ההדמיה MRM מושגת על ידי gating הנשימה ואותות לב ללא שימוש בכל סוכנים בניגוד. </li></ol> 3. רכישת תמונה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הכנת בעלי החיים (איור 1), מקם את העכבר במרכז סורק MRM עם הלב ממוקם במרכז שדה ראייה (FOV), שבו הומוגניות של שדה המגנטי היא מרבי. הערה: רחב נשא(89 מ&quot;מ) 9.4 מגנט אנכי נשא T מצויד בשיפועים משולשים ציר 100 G / סנטימטר ו4 סנטימטר בתדר רדיו סליל הדמיה (RF) הוא לשמש כדי לקבל תמונות תלת ממדי (3D) ברזולוציה גבוהה. הערה: הקפד חומרים מתכלים שאינם מגנטיים בעת שימוש בסורק ה-MRI. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את ממשק ההדמיה ובחר &quot;מחקר חדש&quot; מהתפריט &quot;אפשרויות הלימוד&quot;. הקלד &quot;mtune&quot; בשורת הפקודה ולהפעיל אותו כדי למשוך את &quot;Tune GUI&quot;. לאחר מכן בחר &quot;התחל בדיקה Tune&quot; ולחץ על כפתור &quot;Autoscale&quot;. הניגון GUI ישתנה כדי להראות RFsignal. השתמש בכפתורי מנגינה / ההתאמה המרוחקים בקצה של הסליל לכוון את סליל RF לתדר התהודה של פרוטון (400 MHz). בכרטיסייה &quot;התחל&quot; לעבור לדף &quot;Prescan&quot; כדי להפעיל את כיול התדר ועוצמה על ידי לחיצה על הכפתורים בנושא. לחץ על הכפתור XYZ (מהיר) על &quot;הכרטיסייה של&quot; שים לימוד &#39;כרטיסייה למשוך את דף shimming.עבור לדף הפחית, בחר את כל החזרות, ולחץ על כפתור הפחית לבצע shimming האוטומטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר רצף הסקאוט מהכרטיסייה &quot;המחקר&quot; של ממשק ההדמיה כדי למקם את לב העכבר. בכרטיסייה &quot;לרכוש&quot; לשנות את שדה הראייה ל35 מ&quot;מ 2 ולשמור את הגדרות ברירת המחדל של המכשיר. לחץ על התחל כדי להפעיל את הרצף; להתאים את המיקום של בעל החיים אם הלב הוא לא במרכז שדה הראייה, retune סליל RF ולהשיג את תמונות הסקאוט שוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על &quot;אבני חן&quot; כפתור הרצף בכרטיסייה &quot;העיון&quot; ולאחר מכן להזין את הפרמטרים הרכישה בכרטיסייה &quot;לרכוש&quot; המתאימה לקבלת שני מטוסים מאונך לאורך הציר הקצר וציר של הלב 20,21 ארוך. הערה: פרמטרים רכישה אופייניים לסריקת שיפוע הד הם: עובי פרוס, 1 מ&quot;מ; זמן החזרה (TR), 200 אלפיות שניים; זמן הד (TE), 2.67 אלפיות שני (מינימום); זווית שנייה, 25 °; גודל inplane מטריקס, 128 x 128; FOV, מ&quot;מ 222; מספר הרכישות, 4; וזמן רכישה משוער של 1 דקות ו30 שניות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בכרטיסייה &quot;עו&quot;ד&quot; לבחור את הרצף &quot;CINE&quot; כדי לאסוף את תמונות הדופק מגודרת oximetry קצר ציר קולנוע MR על מנת למדוד פרמטרים אנטומיים ותפקודיים LV. להתאים את המיקום וזווית של פרוסות הדמיה המבוססת על תצוגת ציר זמן של הלב על ידי ריחוף עכבר וגרירה. הזן את הפרמטרים ההדמיה הבאים בכרטיסייה &quot;לרכוש&quot; כדי להשיג את רצף שיפוע הד קולנוע: TR, 500 אלפיות שניים; TE, 5 אלפיות שניים; FOV, 22 2 מ&quot;מ; מטריקס רכישה, 256 x 256; עובי פרוס, 1 מ&quot;מ; מספר הרכישות, 8; מספר המסגרות, 6; וזמן רכישת ~ 17V דקות. לחץ על התחל כדי להתחיל את הרכישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להמיר את התמונות שנרכשו בפורמט DICOM באמצעות הכרטיסייה &quot;I / O&quot; של תוכנת ההדמיה ולהעביר את הקבצים המתאימים למרכז נתונים לעיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסופו של הליך הדמיה, כלow העכברים להתאושש מהרדמה בתוך כלובי מסנן העליון. אל תשאירו את העכברים ללא השגחה עד שהם יחזרו להכרה מספיק כדי לשמור על עינת חזה ולשמור אותם למחקרים נוספים במידת צורך. </li></ol> 4. ניתוח נתונים של הדמיה תהודה מגנטית מיקרוסקופית לב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בתוכנת מגזר לנתח את הפרמטרים אנטומיים ותפקודיים של LV 19. על ידי טעינת תמונות Cine פורמט DICOM לתוך התוכנה באמצעות &quot;פתח קובץ התמונה (ים)&quot; תפריט המשנה של התפריט &quot;קובץ&quot;. על GUI בחר &#39;MRGE&#39; כטכניקת הדמיה, &#39;Cine&#39; כסוג התמונה ו&#39;קצר ציר אמצע חדרית-&#39;כמטוס תצוגת תמונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ציין טווחי הזמן כדי לשמש לקצה ירוויח וקצה התכווצות דרך &quot;קבע זמן נוכחי לסיום תרוויח&quot; ו&quot; קבע זמן נוכחי לסיום התכווצות &quot;תפריטי משנה של התפריט&quot; ערוך &quot;, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">תחילה לחץ על לחצן הפקודה &quot;LV&quot; ולאחר מכן &quot;אנדו&quot; וחצני פקודה &quot;EPI&quot; בלוח ימני התחתון לצייר באופן ידני endocardium החדר השמאלי וepicardium בהתאמה. הסר את שרירי papillary על ידי להכות על כפתור הפקודה המתאים כדי להגביר את הדיוק של החישובים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קראו את הפרמטרים LV לכימות, כגון נפח הדיאסטולי, הסיסטולי נפח, נפח פעימה, ומקטע פליטה בלוח ימני העליון. לחץ על לחצן הפקודה &quot;שונה&quot; ולאחר מכן על לחצן הפקודה &quot;מדידת Caliper&quot; כדי למדוד את הפרמטרים LV כגון עובי דופן, וקוטר חדרית 22. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על תפריט המשנה &quot;שמור שניהם תמונה סטאקס ופילוח&quot; של התפריט &quot;קובץ&quot; כדי לשמור את התמונות, כולל הפילוחים, בפורמט &quot;. מחצלת &#39;לעבד מחדש את התמונות לפי צורך. </li></ol>

<ol>
	<li>Heidenreich, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forecasting+the+future+of+cardiovascular+disease+in+the+United+States:+a+policy+statement+from+the+American+Heart+Association.">Forecasting the future of cardiovascular disease in the United States: a policy statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 123 (8), 933-944 (2011).</li><li>Fujinami, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mimicry,+bystander+activation,+or+viral+persistence:+infections+and+autoimmune+disease.">Molecular mimicry, bystander activation, or viral persistence: infections and autoimmune disease.</a> Clin Microbiol Rev. 19 (1), 80-94 (2006).</li><li>Cihakova, D., Rose, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+myocarditis+and+dilated+cardiomyopathy.">Pathogenesis of myocarditis and dilated cardiomyopathy.</a> Adv Immunol. 99, 95-114 (2008).</li><li>Donermeyer, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocarditis-inducing+epitope+of+myosin+binds+constitutively+and+stably+to+I-Ak+on+antigen-presenting+cells+in+the+heart.">Myocarditis-inducing epitope of myosin binds constitutively and stably to I-Ak on antigen-presenting cells in the heart.</a> J Exp Med. 182 (5), 1291-1300 (1995).</li><li>Gangaplara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coxsackievirus+B3+infection+leads+to+the+generation+of+cardiac+myosin+heavy+chain-alpha-reactive+CD4+T+cells+in+A/J+mice.">Coxsackievirus B3 infection leads to the generation of cardiac myosin heavy chain-alpha-reactive CD4 T cells in A/J mice.</a> Clin Immunol. 144 (3), 237-249 (2012).</li><li>Huber, S. A., Lodge, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coxsackievirus+B-3+myocarditis+in+Balb/c+mice.+Evidence+for+autoimmunity+to+myocyte+antigens.">Coxsackievirus B-3 myocarditis in Balb/c mice. Evidence for autoimmunity to myocyte antigens.</a> Am J Pathol. 116 (1), 21-29 (1984).</li><li>Massilamany, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+novel+mimicry+epitopes+for+cardiac+myosin+heavy+chain-alpha+that+induce+autoimmune+myocarditis+in+A/J+mice.">Identification of novel mimicry epitopes for cardiac myosin heavy chain-alpha that induce autoimmune myocarditis in A/J mice.</a> Cell Immunol. 271, 438-449 (2011).</li><li>Pummerer, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+cardiac+myosin+peptides+capable+of+inducing+autoimmune+myocarditis+in+BALB/c+mice.">Identification of cardiac myosin peptides capable of inducing autoimmune myocarditis in BALB/c mice.</a> J Clin Invest. 97 (9), 2057-2062 (1996).</li><li>Rose, N. R., Hill, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathogenesis+of+postinfectious+myocarditis.">The pathogenesis of postinfectious myocarditis.</a> Clin Immunol Immunopathol. 80, (1996).</li><li>Saraste, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+flow+reserve+and+heart+failure+in+experimental+coxsackievirus+myocarditis.+A+transthoracic+Doppler+echocardiography+study.">Coronary flow reserve and heart failure in experimental coxsackievirus myocarditis. A transthoracic Doppler echocardiography study.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, (2006).</li><li>Altes, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperpolarized+3He+MR+lung+ventilation+imaging+in+asthmatics:+preliminary+findings.">Hyperpolarized 3He MR lung ventilation imaging in asthmatics: preliminary findings.</a> J Magn Reson Imaging. 13 (3), 378-384 (2001).</li><li>Driehuys, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+imaging+with+magnetic+resonance+microscopy.">Small animal imaging with magnetic resonance microscopy.</a> ILAR J. 49 (1), 35-53 (2008).</li><li>Smith, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+microscopy+with+cardiovascular+applications.">Magnetic resonance microscopy with cardiovascular applications.</a> Trends Cardiovasc Med. 6 (8), 247-254 (1996).</li><li>Potter, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+microscopy+approaches+to+molecular+imaging:+sensitivity+vs+specificity.">Magnetic resonance microscopy approaches to molecular imaging: sensitivity vs specificity.</a> J Cell Biochem Suppl. 39, 147-153 (2002).</li><li>Benveniste, H., Blackband, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MR+microscopy+and+high+resolution+small+animal+MRI:+applications+in+neuroscience+research.">MR microscopy and high resolution small animal MRI: applications in neuroscience research.</a> Prog Neurobiol. 67, 393-420 (2002).</li><li>Epstein, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MR+tagging+early+after+myocardial+infarction+in+mice+demonstrates+contractile+dysfunction+in+adjacent+and+remote+regions.">MR tagging early after myocardial infarction in mice demonstrates contractile dysfunction in adjacent and remote regions.</a> Magn Reson Med. 48 (2), 399-403 (2002).</li><li>Gewalt, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MR+microscopy+of+the+rat+lung+using+projection+reconstruction.">MR microscopy of the rat lung using projection reconstruction.</a> Magn Reson Med. 29 (1), 99-106 (1993).</li><li>Kern, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The cardiac catheterization handbook., Edn 5th. , (2011).</li><li>Heiberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+validation+of+Segment--freely+available+software+for+cardiovascular+image+analysis.">Design and validation of Segment--freely available software for cardiovascular image analysis.</a> BMC Med Imaging. 10, (2010).</li><li>Cranney, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+volume+measurement+using+cardiac+axis+nuclear+magnetic+resonance+imaging.+Validation+by+calibrated+ventricular+angiography.">Left ventricular volume measurement using cardiac axis nuclear magnetic resonance imaging. Validation by calibrated ventricular angiography.</a> Circulation. 82 (1), 154-163 (1990).</li><li>Hiba, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+and+respiratory+double+self-gated+cine+MRI+in+the+mouse+at+7+T.">Cardiac and respiratory double self-gated cine MRI in the mouse at 7 T.</a> Magn Reson Med. 55 (3), 506-513 (2006).</li><li>Bryant, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+failure+in+transgenic+mice+with+myocardial+expression+of+tumor+necrosis+factor-alpha.">Cardiac failure in transgenic mice with myocardial expression of tumor necrosis factor-alpha.</a> Circulation. 97 (14), 1375-1381 (1998).</li><li>Neu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+myosin-induced+myocarditis+as+a+model+of+postinfectious+autoimmunity.">Cardiac myosin-induced myocarditis as a model of postinfectious autoimmunity.</a> Eur Heart J. 12 Suppl D, 117-120 (1991).</li><li>Neumann, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+multiple+heart+autoantibodies+in+mice+with+coxsackievirus+B3-+and+cardiac+myosin-induced+autoimmune+myocarditis.">Induction of multiple heart autoantibodies in mice with coxsackievirus B3- and cardiac myosin-induced autoimmune myocarditis.</a> J Immunol. 152 (1), 343-350 (1994).</li><li>Rose, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postinfectious+autoimmunity:+two+distinct+phases+of+coxsackievirus+B3-induced+myocarditis.">Postinfectious autoimmunity: two distinct phases of coxsackievirus B3-induced myocarditis.</a> Ann N Y Acad Sci. 475, 146-156 (1986).</li><li>Farmer, J. B., Levy, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+recording+the+electrocardiogram+and+heart+rate+from+conscious+animals.">A simple method for recording the electrocardiogram and heart rate from conscious animals.</a> Br J Pharmacol Chemother. 32 (1), 193-200 (1968).</li></ol>

No conflicts of interests were declared.

מחקר זה מתאר את הליך MRM והשירות שלה ככלי לא פולשנית כדי לברר מומים לב בעכברים נגועים בדלקת שריר הלב אוטואימוניות. מאז התכונות היסטולוגית של EAM להידמות דלקת שריר הלב postinfectious של בני אדם, מודלים עכבר הם בדרך כלל מועסקים על מנת להתוות את מנגנוני החיסון של פציעות שריר הלב <su...

אי ספיקת לב הוא הגורם המוביל למוות, ודלקת שריר הלב היא סיבה העיקרית אחת של אי ספיקת לב בקרב מתבגרים צעירים 1. רוב החולים שנפגעו בשריר לב יישארו ללא תסמינים והמחלה באופן ספונטני נפתרה 2. עם זאת, 10-20% מאלה שנפגעו יכולים לפתח מחלה כרונית, מה שמוביל לcardiomyopathy מורחב (DCM) 3. מודלים של בעלי חיים שונים פותחו כדי לחקור את היווצרות המחלה החיסונית של שריר הלב. המחלה יכולה להיגרם בדלקת שריר הלב, רגישה / J ועכברי BALB / ג על ידי חיסון החיות עם שרשרת שרירן כבדה לב (Myhc)-α או שברי פפטיד immunodominant או על ידי הדבקה עם פתוגנים כמו B3 coxsackievirus 4-9. מחקר זה כרוך Myhc-α דלקת שריר הלב הנגרם 334-352 בעכברים / י. למרות מראה חדירות שריר הלב, החיות מושפעות דלקת שריר הלב מופיעות קליני רגילות; אבחנה מתבססת על הערכה היסטולוגית של לב ל7 דלקתnd אקו 10. מיקרוסקופיה תהודה מגנטית (MRM) היא שיטה נפוץ לקבלת הדמיה לב וכלי דם עם מטוסים תלת ממדים ברזולוציה גבוהה, המאפשרת הערכה של פרטים פונקציונליים לרמה של כלי דם דק (עד 10 מיקרומטר קוטר), אבל זה ברמה של פתרון הכוח היא לא בר השגה עם ההדמיה השגרתית תהודה מגנטית הליך (MRI) סריקה, שבו, ההחלטה מתקבלת בדרך כלל עד 1 מ&quot;מ 11-14. MRM מציע יתרון כפי שהוא מאפשר רכישה של תמונות ברזולוציה גבוהה וגם לגזור פרמטרים ביצועים בנקודות הזמן המוקדמות של תהליך המחלה 14. מבחינה קלינית, ההדמיה MRM כבר מיושמת באופן נרחב כדי ללמוד את הפרמטרים תפקודיים של לב חולה, ריאות או המוח 15-17. במחקר זה, השימוש בטכניקת MRM ככלי לא פולשנית כדי לברר מומים לב בעכברים / J מושפעים עם דלקת שריר הלב אוטואימוניות מוצגת. באופן ספציפי, לאהוא ההדמיה MRM מאפשרת כימות של פרמטרים תפקודיים כגון חדר השמאלי (LV) קצה דיאסטולי מקטע פליטה של נפח ו( EF) עם דיוק סביר 18. ההגדרות של פרמטרים המתאימים הן: נפח סוף דיאסטולי LV, נפח דם בחדר השמאלי בסוף מחזור דיאסטולי, ומקטע פליטה, נפח פעימה / סוף דיאסטולי נפח. ניתוח הנתונים מתבצע באמצעות תוכנת המגזר זמינה באופן חופשי שפותחה עבור עיבוד תמונות DICOM תואם לב וכלי דם שנרכשו על ידי סורקי תהודה מגנטיים 19. נתוני המחקר מראה עלייה בעובי קיר LV בבעלי החיים myocarditic, המקביל לירידה בLV סוף דיאסטולי נפח, נפח פעימה ומקטע פליטה, בהשוואה לפרמטרים תפקודיים אלה בעכברים בריאים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1185">
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:509px;">Myhc-a 334-352 (DSAFDVLSFTAEEKAGVYK)</td>
			<td style="width:364px;">Neopeptide, Cambridge, MA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td style="width:167px;">Store at 4&#959;C</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">CFA</td>
			<td style="width:364px;">Sigma Aldrich, St Louis, MO</td>
			<td style="width:145px;">5881</td>
			<td>Store at 4&#959;C</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">MTB&#160; H37Rv extract&#160;</td>
			<td>Difco Laboratories, Detroit, MI</td>
			<td>231141</td>
			<td>Store at 4&#959;C</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">PT</td>
			<td>List Biologicals Laboratories, Campbell, CA</td>
			<td>181</td>
			<td>Store at 4&#959;C</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">1x PBS&#160;</td>
			<td>Corning, Manassas, VA</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td>Store at 4&#959;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane&#160;</td>
			<td>Piramal Healthcare, Mumbai, India</td>
			<td>NDC66794-013-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Female A/J mice&#160;</td>
			<td>Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME</td>
			<td>646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Leur-lok sterile 1 ml syrringe</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Leur-lok sterile 3 ml syrringe</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile needle, 18 G</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305195</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile needle, 27 1/2 G</td>
			<td>BD, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3-way stopcock&#160;</td>
			<td>Smiths Medical ASD, Inc. Dublin, OH</td>
			<td>MX5311L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kerlix gauze bandage rolls&#160;</td>
			<td>Covidien, Mansfield, MA</td>
			<td>6720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kimwipes</td>
			<td>Kimberly-Clark Professional, Roswell, GA</td>
			<td>34155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Protouch Stockinette&#160;</td>
			<td>Medline Industries, Mundelein, IL</td>
			<td>30-1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile surgical scissors and forceps</td>
			<td style="width:364px;">INOX tool Corporation</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro oven</td>
			<td style="width:364px;">GE Healthcare,&#160;</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ThermiPAQ hot and cold therapy system&#160;</td>
			<td>Theramics Corporation, Springfield, IL</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Reptile heating lamp&#160;</td>
			<td>Energy Savers Unlimited, Inc. Carson, CA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3M Transpore tapes&#160;</td>
			<td>Target Corporation, MN</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Up and Up Polymyxin B sulfate/Bacitracin/Neomycin sulfate antibiotic ointment</td>
			<td>Target Corporation, MN</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">North Safety DeciDamp-2PVC foam ear plugs</td>
			<td style="width:364px;">North Safety Products, Smithfield, RI</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton tipped applicator, 6&#8217;&#8217; wooden stem&#160;</td>
			<td>Jorgensen Laboratories, Inc. Loveland, CO</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anesthesia induction chamber&#160;</td>
			<td>Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Summit Anesthesia Support system for regulating flow of anesthesia&#160;</td>
			<td>Summit Anesthesia Solutions, Ann Harbor, MI</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Specially designed animal holder</td>
			<td>Agilent Technologies, Santa Clara, CA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bickford&#160;Omnicon F/Air&#160;anesthesia gas filter unit&#160;</td>
			<td>A.M. Bickford, Inc. Wales Center, NY</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pulse-oximeter module, MR compatible small animal monitoring and gating system&#160;</td>
			<td>Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen cylinder&#160;</td>
			<td>Matheson-Tri Gas, North-Central Zone, Lincoln, NE</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gas regulator&#160;</td>
			<td>Western Medica, West Lake, OH</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Signal breaking module, MR compatible small animal monitoring and gating system</td>
			<td>Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">9.4 T (400 MHZ) 89 mm vertical core bore MR scanner&#160;</td>
			<td>Agilent Technologies, Santa Clara, CA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-cm millipede micro-imaging RF coil&#160;</td>
			<td>Agilent Technologies, Santa Clara, CA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SAM PC monitor&#160;</td>
			<td>Small Animal Instruments, Inc. Stony Brook, NY</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quantitative Medical Image analysis software&#160;</td>
			<td colspan="3">http://segment.heiberg.se;&#160; Segment v1.8 R1430,&#160; Medviso, Oresunds region, Sweden</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matlab software&#160;</td>
			<td>The Mathworks, Inc.&#160; Natick, MA</td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Computer-Unix operating system</td>
			<td style="width:364px;"></td>
			<td style="width:145px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

noninvasive assessment of cardiac abnormalities in experimental autoimmune myocarditis by magnetic resonance microscopy imaging in the mouse

דלקת שריר הלב היא דלקת של שריר הלב, אבל רק ~ 10% מביטויים אלו שנפגעו מופע קליניים של המחלה. כדי לחקור את האירועים חיסוניים של פציעות בשריר הלב, מודלים עכבר שונים של שריר הלב היו בשימוש נרחב. מחקר זה כלל דלקת שריר הלב אוטואימוניות ניסיונית (EAM) מושרה עם שרשרת שרירן כבדה לב (Myhc)-α 334-352 בעכברים / י; בעלי החיים המושפעים לפתח דלקת שריר הלב לימפוציטית אך ללא סימנים קליניים ברורים. במודל זה, השירות של מיקרוסקופיה בתהודה מגנטית (MRM) כשיטה לא פולשנית כדי לקבוע את השינויים מבניים ותפקודיים של הלב בבעלי חיים שחוסנו עם Myhc-α 334-352 מוצג. EAM ועכברים בריאים שצלמו באמצעות 9.4 T (400 MHz) 89 מ&quot;מ סורק נשא ליבה אנכית מצוידים בבדיקה מרבה רגליים 4 סנטימטר בתדר רדיו הדמיה ו100 / שיפועים משולשים סנטימטר G ציר. תמונות לב נרכשו מבעלי החיים הרדים באמצעות רצף דופק קולנוע המבוסס על שיפוע הד, והאנימהls היה במעקב על ידי נשימה והדופק oximetry. הניתוח חשף עלייה בעובי הקיר של החדר בעכברי EAM, עם ירידה מקבילה בקוטר הפנימי של חדרי לב, בהשוואה לעכברים בריאים. הנתונים מראים כי שינויים מורפולוגיים ופונקציונליים בלבם הדלקתי יכולים להיות הלא פולשני במעקב על ידי MRM בבעלי חיים. לסיכום, MRM מציע את יתרון של הערכת ההתקדמות ונסיגה של פציעות בשריר הלב במחלות הנגרמות על ידי חומרים מזהמים, כמו גם תגובה לטיפולים.

בדו&quot;ח זה, השירות של טכניקת MRM כשיטה לא פולשנית כדי לקבוע את השינויים המבניים ותפקודיים בלבם של בעלי החיים מושפעים עם EAM מוצג. דלקת שריר הלב היה מושרה בעכברים / י על ידי חיסון החיות עם 334-352 Myhc-α ב -7 CFA, ובעלי החיים היו נתונים לניסויי MRM ביום 21 לאחר חיסון. ההדמיה MRM בו?...

Watch this Scientific Journal Video about Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse at JoVE.com

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

This study demonstrates the successful establishment of magnetic resonance microscopy imaging as a non-invasive tool to assess the cardiac abnormalities in mice affected with autoimmune myocarditis. The data indicate that the technique can be used to monitor the disease-progression in live animals.

הערכה לא פולשנית של לב חריגות בניסויית אוטואימוניות דלקת שריר לב על ידי תהודה מגנטית מיקרוסקופית הדמיה בעכבר

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

noninvasive-assessment-cardiac-abnormalities-experimental-autoimmune

Research

JoVE Journal

Medicine

9.8K Views.  University of Nebraska-Lincoln. This study demonstrates the successful establishment of magnetic resonance microscopy imaging as a non-invasive tool to assess the cardiac abnormalities in mice affected with autoimmune myocarditis. The data indicate that the technique can be used to monitor the disease-progression in live animals.

Video: Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF. Current technologies for CMR are time consuming and difficult to implement in clinical practice. Feature tracking is a technology that can lead to more automization and robustness of quantitative analysis of medical images with less time consumption than comparable methods.
Methods: An automatic or manual input in a single phase serves as an initialization from which the system starts to track the displacement of individual patterns representing anatomical structures over time. The specialty of this method is that the images do not need to be manipulated in any way beforehand like e.g. tagging of CMR images.
Results: The method is very well suited for tracking muscular tissue and with this allowing quantitative elaboration of myocardium and also blood flow.
Conclusions: This new method offers a robust and time saving procedure to quantify myocardial tissue and blood with displacement, velocity and deformation parameters on regular sequences of CMR imaging. It therefore can be implemented in clinical practice.

An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF.

תהודה מגנטית נגזר מסננים הערכה שריר הלב באמצעות מעקב אחר תכונות

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell proliferation in the bone marrow cavity as well as for interaction of tumor and bone cells resulting in local bone destruction. Our aim was to develop a model of experimental bone metastasis that allows in vivo assessment of angiogenesis in skeletal lesions using non-invasive imaging techniques.
For this purpose, we injected 105 MDA-MB-231 human breast cancer cells into the superficial epigastric artery, which precludes the growth of metastases in body areas other than the respective hind leg1. Following 25-30 days after tumor cell inoculation, site-specific bone metastases develop, restricted to the distal femur, proximal tibia and proximal fibula1. Morphological and functional aspects of angiogenesis can be investigated longitudinally in bone metastases using magnetic resonance imaging (MRI), volumetric computed tomography (VCT) and ultrasound (US).
MRI displays morphologic information on the soft tissue part of bone metastases that is initially confined to the bone marrow cavity and subsequently exceeds cortical bone while progressing. Using dynamic contrast-enhanced MRI (DCE-MRI) functional data including regional blood volume, perfusion and vessel permeability can be obtained and quantified2-4. Bone destruction is captured in high resolution using morphological VCT imaging. Complementary to MRI findings, osteolytic lesions can be located adjacent to sites of intramedullary tumor growth. After contrast agent application, VCT angiography reveals the macrovessel architecture in bone metastases in high resolution, and DCE-VCT enables insight in the microcirculation of these lesions5,6. US is applicable to assess morphological and functional features from skeletal lesions due to local osteolysis of cortical bone. Using B-mode and Doppler techniques, structure and perfusion of the soft tissue metastases can be evaluated, respectively. DCE-US allows for real-time imaging of vascularization in bone metastases after injection of microbubbles7.
In conclusion, in a model of site-specific breast cancer bone metastases multi-modal imaging techniques including MRI, VCT and US offer complementary information on morphology and functional parameters of angiogenesis in these skeletal lesions.

In the pathogenesis of bone metastasis, angiogenesis is a crucial process and therefore represents a target for imaging and therapy. Here, we present a rat model of site-specific breast cancer bone metastasis and describe strategies to non-invasively image angiogenesis in vivo using magnetic resonance imaging, volumetric computed tomography and ultrasound.

רב מודלי הדמיה של אנגיוגנזה מודל עכברים עירום של גרורות סרטן השד עצם באמצעות דימות תהודה מגנטית, טומוגרפיה ממוחשבת נפחית ו אולטראסאונד

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Diffusion Tensor Magnetic Resonance Imaging in the Analysis of Neurodegenerative Diseases

Diffusion tensor imaging (DTI) techniques provide information on the microstructural processes of the cerebral white matter (WM) in vivo. The present applications are designed to investigate differences of WM involvement patterns in different brain diseases, especially neurodegenerative disorders, by use of different DTI analyses in comparison with matched controls. 	
DTI data analysis is performed in a variate fashion, i.e. voxelwise comparison of regional diffusion direction-based metrics such as fractional anisotropy (FA), together with fiber tracking (FT) accompanied by tractwise fractional anisotropy statistics (TFAS) at the group level in order to identify differences in FA along WM structures, aiming at the definition of regional patterns of WM alterations at the group level. Transformation into a stereotaxic standard space is a prerequisite for group studies and requires thorough data processing to preserve directional inter-dependencies. The present applications show optimized technical approaches for this preservation of quantitative and directional information during spatial normalization in data analyses at the group level. On this basis, FT techniques can be applied to group averaged data in order to quantify metrics information as defined by FT. Additionally, application of DTI methods, i.e. differences in FA-maps after stereotaxic alignment, in a longitudinal analysis at an individual subject basis reveal information about the progression of neurological disorders. Further quality improvement of DTI based results can be obtained during preprocessing by application of a controlled elimination of gradient directions with high noise levels.	
In summary, DTI is used to define a distinct WM pathoanatomy of different brain diseases by the combination of whole brain-based and tract-based DTI analysis.

Diffusion tensor imaging (DTI) basically serves as an MRI-based tool to identify in vivo the microstructure of the brain and pathological processes due to neurological disorders within the cerebral white matter. DTI-based analyses allow for application to brain diseases both at the group level and in single subject data.

הדמיית תהודה מגנטית מותחת דיפוזי בניתוח של מחלות ניווניות

Diffusion tensor imaging (DTI) techniques provide information on the microstructural processes of the cerebral white matter (WM) in vivo. The present ...

Implanting Glass Spinal Cord Windows in Adult Mice with Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in adult rodents is the standard experimental model for studying autonomic demyelinating diseases such as multiple sclerosis. Here we present a low-cost and reproducible glass window implantation protocol that is suitable for intravital microscopy and studying the dynamics of spinal cord cytoarchitecture with subcellular resolution in live adult mice with EAE. Briefly, we surgically expose the vertebrae T12-L2 and construct a chamber around the exposed vertebrae using a combination of cyanoacrylate and dental cement. A laminectomy is performed from T13 to L1, and a thin layer of transparent silicone elastomer is applied to the dorsal surface of the exposed spinal cord. A modified glass cover slip is implanted over the exposed spinal cord taking care that the glass does not directly contact the spinal cord. To reduce the infiltration of inflammatory cells between the window and spinal cord, anti-inflammatory treatment is administered every 2 days (as recommended by ethics committee) for the first 10 days after implantation. EAE is induced only 2-3 weeks after the cessation of anti-inflammatory treatment.
Using this approach we successfully induced EAE in 87% of animals with implanted windows and, using Thy1-CFP-23 mice (blue axons in dorsal spinal cord), quantified axonal loss throughout EAE progression. Taken together, this protocol may be useful for studying the recruitment of various cell populations as well as their interaction dynamics, with subcellular resolution and for extended periods of time. This intravital imaging modality represents a valuable tool for developing therapeutic strategies to treat autoimmune demyelinating diseases such as EAE.

We describe a method for implanting and maintaining glass windows over the exposed spinal cords of adult mice for studying experimental autoimmune encephalomyelitis. These windows provide chronic optical access to the spinal cord for monitoring cell dynamics at the subcellular level in live animals using two-photon microscopy.

השתלת זכוכית חוט השדרה של Windows בעכברים בוגרים עם ניסיון אוטואימוניות Encephalomyelitis

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in adult rodents is the standard experimental model for studying autonomic demyelinating diseases such as ...

Simultaneous PET/MRI Imaging During Mouse Cerebral Hypoxia-ischemia

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics disturbance in affected cells. Diffusion weighted magnetic resonance imaging (MRI) identifies regions that are damaged, potentially irreversibly, by hypoxia-ischemia. Alterations in glucose utilization in the affected tissue may be detectable by positron emission tomography (PET) imaging of 2-deoxy-2-(18F)fluoro-&#7429;-glucose ([18F]FDG) uptake. Due to the rapid and variable nature of injury in this animal model, acquisition of both modes of data must be performed simultaneously in order to meaningfully correlate PET and MRI data. In addition, inter-animal variability in the hypoxic-ischemic injury due to vascular differences limits the ability to analyze multi-modal data and observe changes to a group-wise approach if data is not acquired simultaneously in individual subjects. The method presented here allows one to acquire both diffusion-weighted MRI and [18F]FDG uptake data in the same animal before, during, and after the hypoxic challenge in order to interrogate immediate physiological changes.

The method presented here uses simultaneous positron emission tomography and magnetic resonance imaging. In the cerebral hypoxia-ischemia model, dynamic changes in diffusion and glucose metabolism occur during and after injury. The evolving and irreproducible damage in this model necessitates simultaneous acquisition if meaningful multi-modal imaging data are to be acquired.

ההדמיה PET / MRI בו זמנית בעכבר מוחין היפוקסיה-איסכמיה

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics ...

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

שינויים הערכה לב מורפולוגי תפקודי עכבר דגם של מועקה הרוחבית אב עורקים על ידי הדמית אקו

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Quantitative Visualization of Leukocyte Infiltrate in a Murine Model of Fulminant Myocarditis by Light Sheet Microscopy

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently labelled structures in large biological specimens, and is down to cellular resolution. Meanwhile, the constant refinement of underlying protocols and the enhanced availability of specialized commercial systems enable us to investigate the microstructure of whole mouse organs and even allow for the characterization of cellular behavior in various live-cell imaging approaches. Here, we describe a protocol for the spatial whole-mount visualization and quantification of the CD45+ leukocyte population in inflamed mouse hearts. The method employs a transgenic mouse strain (CD11c.DTR)that has recently been shown to serve as a robust, inducible model for the study of the development of fulminant fatal myocarditis, characterized by lethal cardiac arrhythmias. This protocol includes myocarditis induction, intravital antibody-mediated cell staining, organ preparation, and LSFM with subsequent computer-assisted image post-processing. Although presented as a highly-adapted method for our particular scientific question, the protocol represents the blueprint of an easily adjustable system that can also target completely different fluorescent structures in other organs and even in other species.

Here, we describe a light-sheet microscopy approach to visualize the cardiac CD45+ leukocyte infiltrate in a murine model of aseptic fulminant myocarditis, which is induced by the intratracheal diphtheria toxin treatment of CD11c.DTR mice.

ויזואליזציה כמותית של ליקוציטים לחדור במודל Murine של שריר הלב הדוקרני על ידי מיקרוסקופית גיליון אור

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently ...

Cardiac Magnetic Resonance Imaging at 7 Tesla

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher magnetic field strengths and potentially provides improved signal contrast and spatial resolution. While promising results have been achieved, ultra-high field CMR is challenging due to energy deposition constraints and physical phenomena such as transmission field non-uniformities and magnetic field inhomogeneities. In addition, the magneto-hydrodynamic effect renders the synchronization of the data acquisition with the cardiac motion difficult. The challenges are currently addressed by explorations into novel magnetic resonance technology. If all impediments can be overcome, ultra-high field CMR may generate new opportunities for functional CMR, myocardial tissue characterization, microstructure imaging or metabolic imaging. Recognizing this potential, we show that multi-channel radio frequency (RF) coil technology tailored for CMR at 7 Tesla together with higher order B0 shimming and a backup signal for cardiac triggering facilitates high fidelity functional CMR. With the proposed setup, cardiac chamber quantification can be accomplished in examination times similar to those achieved at lower field strengths. To share this experience and to support the dissemination of this expertise, this work describes our setup and protocol tailored for functional CMR at 7 Tesla.

The sensitivity gain inherent to ultrahigh field magnetic resonance holds promise for high spatial resolution imaging of the heart. Here, we describe a protocol customized for functional cardiovascular magnetic resonance (CMR) at 7 Tesla using an advanced multi-channel radio-frequency coil, magnetic field shimming and a triggering concept.

דימות תהודה מגנטית לב בטסלה 7

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

שלב ניגודיות תהודה מגנטית בעורק החולדה נפוצים

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Quantification of Levator Ani Hiatus Enlargement by Magnetic Resonance Imaging in Males and Females with Pelvic Organ Prolapse

Here we present a protocol to examine the levator ani hiatus in males and females with pelvic organ prolapse, during the Valsalva maneuver and while evacuating acoustic gel, using a horizontally oriented 1.5 T magnetic resonance (MR) scanner. On midsagittal images, the vertical distance of pelvic organs is measured in millimeters relative to the hymen plane (female) and to the lower border of the symphysis pubis (male), preceded by - (above) or + ( below) signs. On axial images, the levator ani area is calculated in square centimeters with a free-hand tracing method from three key images, passing through the midsymphysis (level I), tangential to the lower border of the symphysis (level II), and at the maximal anterior rectal wall bulging (level III). Areas at rest and strained are compared to find evidence of a percentage of increase. The purpose is to provide objective evidence of the maximal extent of pelvic organs descent and hiatus enlargement without the interference of foreign objects or the examiner&#39;s proximity, so as to overcome the limitations of pelvic examination and transperineal sonography (i.e., subjectivity and sex-related limitations [female only]).

Here we present a protocol to standardize the measurement of the levator ani hiatus size&#160;by magnetic resonance imaging. The purpose is to extract biomechanical inferences from image analysis by comparing resting and straining values in patients of both sexes with pelvic prolapse, using consistent anatomical bony landmarks.

כימות של מרים Ani היאטוס הגדלה על ידי תהודה מגנטית של זכרים ונקבות עם צניחת אברי האגן

Here we present a protocol to examine the levator ani hiatus in males and females with pelvic organ prolapse, during the Valsalva maneuver and while ...