Intramural NIH program supported the development of this model. Publication support was provided by Harvard Apparatus Inc. and ADInstruments Inc. The work by the authors was done as part of US government&#8211;funded research; however, the opinions expressed are not necessarily those of the National Institutes of Health.

הנהלים המפורטים להלן בוצעו כחלק מפרוטוקול שאושר על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים במרכז הקליני במכון הלאומי לבריאות. 1. הכנה לניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גז לעקר צנתרים ומכשירים. </li></ol> 2. מכינים את קטטרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף את הצנתרים עם גליצרול heparinized (250 הפרין IU / 1 מיליליטר גליצרול) כדי להבטיח patency ולמנוע דליפה. חבר קצה הצנתר עם פקק מתכת (20 ga, 15 מ&quot;מ) כדי לשמור על גליצרול heparinized. </li></ol> 3. להכין אספטי Workstation <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש באלכוהול 70% לרסס מגשי תחנת העבודה ומכשיר. השתמש וילון סטרילי כדי לכסות את מגשי ההפעלה שולחן וכלי ומכשירי מקום על המגש. </li></ol> 4. הכן חולדות לכירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברוש מקום בנפרד בתא Lucite ולחשוף להרדמה; isoflurane (3-5%) תמהילאד עם חמצן עד אבדן ההכרה. הסר עכברוש מהאולם ולגלח פרווה מהאזורים קדמי והאחוריים של הצוואר. החל משחה סיכה לעיניים. </li></ol> 5. צנתר השרשה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים חולדה הרדים (אושר על ידי קמצוץ הבוהן) על שולחן ניתוחים מחומם במצב הגחון; מקום אפה לחרטום כדי לשמור על הרדמה עם נשימה ספונטנית (isoflurane; 3.5%). לשפשף בעדינות את אזור הניתוח 3 פעמים לסירוגין שימוש בפולידין ואלכוהול 70%. לעשות חתך בעור קו האמצע של 0.5 סנטימטר בין השכמות באמצעות מספריים כירורגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקום מחדש עכברוש בעמדת הגב; בעדינות לרסן את הרגליים לכל צד של השולחן באמצעות גומיות; לשמור על הרדמה. מניחים שתי גזה סטרילי 4x4 התגלגלה מתחת לצוואר להיפראקסטנסיה מעט לחשיפה טובה יותר. הפוך תקין חתך בעור צוואר רחם 2 סנטימטר הגחון של קו האמצע של הצוואר ברמה של עצם הבריח באמצעות אזמל. </li></ol> 6. ימיןהצוואר וריד צנתור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות hemostat, בבוטות לנתח את וריד הצוואר הימני, להפריד את הרוק ורקמות הלימפה לדמיין ולבודד סעיף 5 מ&quot;מ של כלי השיט. באמצעות תפר 4-0 משי, למקם עניבה משוחררת בשני קצות הגולגולת וזנב של כלי השיט על מנת למקסם את החשיפה של כלי השיט. באמצעות מספריים כירורגיות מיקרו עושים חתך גדול מספיק כדי לעבור את הקטטר, בקו אחד עם כלי השיט בין שני חיבורי האותיות ולקשור את מייתר הגולגולת סביב הספינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את צנתר הוורידים לתוך הכלי לכיוון הלב בסיוע של הקרס לנתח מיקרו ומלקחיים ולקדם את הקטטר עד שכל מגזר PU 3F הוא בספינה. השתמש בחיבורי האותיות בקצות הגולגולת וזנב כדי לאבטח את הצנתר לכלי השיט. </li></ol> צנתור עורקי תרדמת 7. שמאל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות hemostat, בבוטות לנתח את שריר omohyoid longitudinally לחשוף את העורק הראשי עזב ואניsolate סעיף 5 מ&quot;מ של כלי השיט. ודא עצב התועה (בצבע לבן) מופרד לחלוטין מהעורק. שים לב שלא לגרוס או לשבור את העצבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות תפר 4-0 משי, למקם עניבה משוחררת בסוף הזנב של כלי השיט, לקשור את קצה הגולגולת של כלי השיט ולמקם את מהדק בולדוג caudally מעל התפר כדי לעצור את זרימת הדם בעקבות החתך. באמצעות מספריים כירורגיות מיקרו, עושה חתך, גדול מספיק כדי לעבור את הקטטר, בקו אחד עם כלי השיט בין שני חיבורי האותיות. הכנס את קטטר העורקים לכיוון הלב בסיוע של הקרס לנתח מיקרו ומלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בעל מחט חלק ללא נעילה להחזיק את החלק של הצנתר בתוך הכלי חזק לפני הסרת מהדק בולדוג. לקדם את הקטטר עם זוג המלקחיים בזמן התרופפות בעל מחט לאט עד קטע PU 2F השלם של צנתר היא בספינה. לקשור את מייתר הזנב הרופף סביב הקטטר וכלי להבטחת, אבל לא כל כך tight ככדי לחסום, קטטר. </li></ol> 8. שימוש בhemostat ישר, מנהרת Tube 5 סנטימטרים מתחת לעור מאחורי האוזן ודרך החתך בין ההשכמות. Exteriorize קטטרים דרך הצינור ולהסיר את הצינור. 9. לסגור את חתך הגחון עם קליפים פצע שלוש נירוסטה, והחתך הגבי עם 4-0 תפרי משי להבטחת קטטרים exteriorized במקום. צג וטיפוח 10. לאחר ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות צנתור, לסיים את ההרדמה ולשחזר את העכברוש בעמדת פַּחֶסֶת לרוחב בכלוב עם מצעים תאית. שימו לב לחולדות ב 2 מרווחי שעות לפחות 4 שעות או עד שלא מראה סימנים של כאב ולאחר מכן פעם ביום. תן Ketoprofen [5 מ&quot;ג / קילוגרם, הזרקה תת עורית (SQ)] לפרסם באופן מיידי ובכל הליך 12 שעות אם החולדה מראה סימנים של כאב או מצוקה. מניסיוננו, לא חולדות נדרשות שיכוך כאבים נוספים לכאב הבא initiaהזרקת l. מאפיינים ציינו כי יגררו תמורה למינונים נוספים של שיכוך כאבים כוללים אך לא מוגבלים ל; יציבה לא נורמלית; גידול / קיטון בקצב נשימה, unthrifty, זיהום / דלקת / ungroomed של אתר החתך, שחרור עין, piloerection (&quot;פרווה ממוסמר&quot;), ירידה בפעילות בתגובה לגירויים קוליים או מישוש. הערה: חולדות התאוששו במשך 72 שעות שתרווחנה&gt; 10 גרם ממשקל שלפני צנתור יהיה נרשמו למחקר. </li></ol> 11. חיבור למערכת המודינמית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות התאוששות, להירשם חולדות בריאות (רווח&gt; 10g משקל) במחקר. מניחים חולדות בחדר Lucite ולהרדים כפי שתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח וילון סטרילי על שולחן ניתוחים עם hemostat סטרילי, מלקחיים מיקרו, 1 מזרקים מיליליטר עם מחט בוטה מצורפים. הערה: הטיפים של hemostat צריכים להיות מכוסים בגומי, כדי למנוע נזק לקטטר. מניחים חולדה הרדים על כירורגיתשולחן באף העמדה ומקום הגחון לחרטום כדי לשמור על הרדמה (3-5%) עם נשימה ספונטנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורקי קלאמפ וצנתרי ורידים בעזרת זוג hemostats הגומי הכתיר ממש מתחת לסיכות תקע מתכת. השתמש זוג מלקחיים כדי להסיר את סיכת המתכת בסוף קטטר ולצרף מזרק 1 מיליליטר מלא מלוח הפרין עם מחט בוטה המצורפת. בתורו, להסיר את hemostats ולסגת 0.1 מיליליטר, כדי להבטיח את הצנתרים הם פטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Re-מהדק את הצנתרים, להוציא את המחט ולצרף שם כך לקטטר ארוך יותר (pre-סמוק עם מי מלח הפרין) שמחובר לסיבוב והקשור בחלקו העליון של כלוב קופסת הנעליים. חבר צנתרים אלו למתמרים לרכישת נתונים והקלטה, דגימה, או עירוי. הערה: כל הצנתרים מוגנים עם תעלות האביב מפותלות ארוכות מספיק כדי לאפשר מגוון הרחב של בעלי חיים של תנועה בכלוב שלהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות חיבור קטטר, לסיים הרדמה ולשחזר את בעלי החיים בעמדת sternal בכלוב עם מצעים תאית. כדי לשמור patency קטטר עורקים, לשטוף באופן ידני את הקווים עם 0.05 מיליליטר מלוח הפרין (50 IU / ml) בכל שעה 1 למשך 24 שעות שתעלינה בקנה אחד עם ההערכות הרגילות של בעלי החיים. </li></ol> 12. דגימת דם, ניטור לחץ ומנהל תרופות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מזרק ריק לברזלים מחוברים לקטטר עורק ולסגת 0.6 מיליליטר סומק מוטבע. צרף מזרק מדגם, לקחת מדגם, ולהחזיר את הסומק מוטבע 0.6 מ&quot;ל ואחריו 0.7 מיליליטר סומק heparinized מלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתוני שימוש בחומרה ותוכנת רכישה למדוד וMAP השיא וקצב לב ברציפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את המערכת האוטומטית משלוח סמים (מוסיף) לצנתר הוורידים. הערה: מוסיף מתאים את קצב עירוי vasopressor (מינון גבוה, נמוך, או 0) מבוסס על המפה זוהתה ללחצים נשמרו בטווח הפיזיולוגי הנורמלי. </li></ol>

<ol>
	<li>Buckingham, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indwelling+catheters+for+direct+recording+of+arterial+blood+pressure+and+intravenous+injection+of+drugs+in+the+conscious+rat.">Indwelling catheters for direct recording of arterial blood pressure and intravenous injection of drugs in the conscious rat.</a> J Pharm. Pharmacol. 28 (5), 459-461 (1976).</li><li>Buckle, J. W., Nathaniels, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proceedings:+A+dual+catheter+system+for+the+simultaneous+infusion+and+sampling+of+the+vascular+system+of+the+unrestrained+rat.">Proceedings: A dual catheter system for the simultaneous infusion and sampling of the vascular system of the unrestrained rat.</a> J. Physiol. 242 (2), 55P-56P (1974).</li><li>Solomon, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+dosing+of+lipid+A+analogue+E5564+in+rats+depends+on+the+timing+of+treatment+and+the+route+of+Escherichia+coli+infection.">Effective dosing of lipid A analogue E5564 in rats depends on the timing of treatment and the route of Escherichia coli infection.</a> J. Infect. Dis. 193 (5), 634-644 (2006).</li><li>Cui, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacillus+anthracis+cell+wall+produces+injurious+inflammation+but+paradoxically+decreases+the+lethality+of+anthrax+lethal+toxin+in+a+rat+model.">Bacillus anthracis cell wall produces injurious inflammation but paradoxically decreases the lethality of anthrax lethal toxin in a rat model.</a> Intensive Care Med. 36 (1), 148-156 (2010).</li><li>Quezado, Z. M., Natanson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+hemodynamic+abnormalities+and+vasopressor+therapy+in+sepsis+and+septic+shock.">Systemic hemodynamic abnormalities and vasopressor therapy in sepsis and septic shock.</a> Am. J. Kidney Dis. 20 (3), 214-222 (1992).</li><li>Perdue, P. W., Kazarian, K. K., Nevola, J., Law, W. R., Williams, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+local+and+systemic+antibiotics+in+rat+fecal+peritonitis.">The use of local and systemic antibiotics in rat fecal peritonitis.</a> J. Surg. Res. 57 (3), 360-365 (1994).</li><li>Qiu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+individual+survival+benefits+of+tumor+necrosis+factor+soluble+receptor+and+fluid+administration+are+not+additive+in+a+rat+sepsis+model.">The individual survival benefits of tumor necrosis factor soluble receptor and fluid administration are not additive in a rat sepsis model.</a> Intensive Care Med. 37 (10), 1688-1695 (2011).</li><li>Cui, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+of+sepsis+alters+the+effects+of+superoxide+anion+inhibition+in+a+rat+sepsis+model.">Severity of sepsis alters the effects of superoxide anion inhibition in a rat sepsis model.</a> J. Appl. Physiol. 97 (4), 1349-1357 (2004).</li><li>Karzai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+with+antibody+to+tumor+necrosis+factor+differs+with+similarly+lethal+Escherichia+coli+versus+Staphylococcus+aureus+pneumonia+in+rats.">Protection with antibody to tumor necrosis factor differs with similarly lethal Escherichia coli versus Staphylococcus aureus pneumonia in rats.</a> Anesthesiology. 99 (1), 81-89 (2003).</li><li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femoral+Arterial+and+Venous+Catheterization+for+Blood+Sampling,+Drug+Administration+and+Conscious+Blood+Pressure+and+Heart+Rate+Measurements.">Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements.</a> J. Vis. Exp. (59), e3496 (2012).</li></ol>

The authors have no potential conflicts of interest.

<html> חוקרת גישות טיפוליות למודל קליני של מחלה מחייבת את היכולת לבצע באופן מדויק ניטור המודינמי, וכן הוא מחייב גישה של כלי דם. במודל של אלח דם שלנו, צנתור עורקים מספק ניטור לחץ מערכתי וצנתור ורידים מאפשר ליישום של טיפול קליני סטנדרטי. טיפול סטנדרטי עבור אלח דם כולל העירוי של אנטיביוטיקה לטיפול בזיהום בקטריאלי ועירוי נוזלים וvasopressors כדי לשמור על לחץ דם בטווח הרצוי. שני הצנתרים משמשים לדגימת דם. בעיצוב זה, היישום של עירוי לתכנות משאבות עם מפעילה אוטומטית של קצב עירוי vasopressor מבוסס על זמן אמת מתכוונים לחצים עורקים הוא מראש על ההגדרה הקלינית שדורשת טיטרציה ידנית על ידי צוות הרפואי ובהגדרה פרה-הקלינית גורמת שימוש בשיטת טיפול זו ניתן ללימוד מספרים גדולים של בעלי חיים. . E_content &quot;&gt; סיבוכים חלקם חוו בשלב המוקדם של פיתוח המודל אלה כללו חסימה חלקית של שני עורקים וורידי צנתרים מרחבי הידוק, קשרים על רכיבי PU2 וPU3, (1-2%); מיקום שגוי של צנתר ורידי הצוואר ל סניף קטן, (&lt;1%); מוות פתאומי בלתי מוסבר לאחר התאוששות (לא פקיק ריאתי או נזק לאיברים אחרים ניכר), (1-2%) נפתר על ידי שמירה על ריכוז isoflurane 2-3.5% עם 2 קצב זרימת O של 2 L / min . סיבוכים ניתוחיים נפוצים אחרים של דימום, זיהום מקומי וניזק עצמי לא נצפו. ברגע שמיומנות כירורגית מושגת, כל הליך אמורה להיות מסוגל להשלים בשום דקות יותר מ 15. שיעור הצלחה של נמדד כהתאוששות בריאה ו צנתרים פטנט, ניתן לצפות ליעלו על 90% פעם אחת מאומן היטב. בעלי חיים נוספים כלולים בכל מחקר על מנת למזער את אובדן נתונים, ומספר הכולל של בעלי החיים הדרושים וחשבון לקטטר כושל שיכול להיות &quot;בהיתוך רק &quot;או תמותה עקב סיבוכים. השלב הקריטי ביותר בהליך זה הוא העיצוב ומיקום של הצנתרים. החומרים צריכים להיות רך בקצה כדי שלא לנקב את קיר הכלי ללא crimping בקלות רבה מדי. הגוף של הצנתר צריך להיות (מהקצה) נוקשה כדי להיות מסוגל להתקדם לכלי מספיק ולהיות מאובטח במקום. איור 1 מציג את 3 קטרים ​​של צינורות המחוברים לקטטר העורקים וצינורות בקוטר 2 שונים מחובר לצנתרים ורידיים. רכיבים אלה החליקו בתוך אחד את השני כדי להפחית קוטר קטטר בקצה ודבוקים יחד עם עוגנים הוסיפו כדי להבטיח מיקום של הצנתר בכלי השיט או לב נשמר. ברגע שהתאושש ומחוברים לסיבוב ולקשור, גל MAP וCVP אמור להופיע דומה לנתונים מיוצגים באיור 2. כדי לשמור על patenc צנתר עורקיםy במהלך ניטור, סומק לשעה מלוח הפרין (0.05 מיליליטר) יש לבצע. עירוי מתמשך שומר patency צנתר הוורידים. במהלך חיבור קו וסומק, קרוב יש לשים לב כדי להבטיח שאין בועות אוויר בקו. בועת אוויר של ≥0.1ml יכולה לגרום לתסחיף הריאה, המוח או לאיברים אחרים. גל המודינמית נרשם ונותח במהלך המחקר. בעת דחיסת זמן בציר x, איור 3 מציג את השינויים במפה וCVP במהלך שעה 1, כמו גם שינויים בשער והשפעת עירוי vasopressor. יש הנוהל מספר מגבלות פוטנציאליות. במחקרים שלנו, הצנתרים להישאר פטנט לתקופה של עד 11 ימים. לא ידוע כמה זמן הצנתרים יישארו פטנט מעבר לתקופה זו. כדי להתאים את הצנתרים כפי שתואר, יש גודל כלי דם מינימאלי, אשר בערך בקורלציה עם משקל מכרסמים, דורשים בעלי חיים נרשמו במחקר זה להיות גדול יותר מ200 גרם. השימוש בקוטר קטן יותר קטטר יביא הגדלת התנגדויות לזרום הפחתת patency. השגת אמצעי לחץ ורידים מרכזיים דורשת מיקום מדויק קטטר באטריום המספיק לחשבון לגודל וצמיחה במהלך תקופת המחקר ויכול להיות אתגר. ברגע שמשתלטים עליו, עורקים וכלי דם צנתור יכולים לספק את הבסיס למגוון רחב של מודלים של מכרסמים הדורשים ניטור המודינמי, דגימת דם, ועירוי של נוזלים או טיפולים תוך מזעור כאב ומצוקה במהלך מכשור או טיפול התאושש פעם. למעשה, בשיתוף עם צנתור קודם פרסום יופיטר 10 המתאר את וריד הירך, יש לנו לבצע בהצלחה את המודל הזה עם 3 צנתרים מושתלים.

צנתור עורקי ורידים של חולדות משמש כבר זמן רב במחקר במעבדה. 1, 2 צנתור יכול לשמש לניטור של פרמטרים המודינמית כוללים סיסטולי, דיאסטולי ואומר לחץ דם (MAP), קצב לב (HR) ולחץ ורידים מרכזי (CVP) . 3,4 בנוסף, צנתרים אלו מאפשרים לעירוי של טיפולים סטנדרטיים או טיפולים פוטנציאליים, כמו גם דגימת דם כדי לנתח את המנגנון הבסיסי של מחלה או לטיפול נוסף. לכן, יש גישה של כלי דם במודל חיה קטן הוא קריטי ללימוד מדדי ביצוע קליניים ושפעות טיפול. כדי לחקור את הגורמים הבסיסיים של מחלה קריטית, חשוב ראשון לפתח מודל לדמות המצב האנושי. חיסון תוך-קנה הנשימה של כמות ידועה של חיידקים שמש בהצלחה לשחזר את פתוגנזה של דלקת ריאות, דלקת ריאות חמורה אשר לאחר מכן מתפתחת לאלח דם.3, 5 ניטור המודינמי אמצעים ומתן טיפול קליני סטנדרטי הוא קריטיים כדי לדמות טיפול תומך שבשגרה. טיפול קליני סטנדרטי כולל עירוי של אנטיביוטיקה אשר מסייעת בניקוי הזיהום הבסיסי והממשל של נוזלים וvasopressors, שני טיפולים מועסקים בחולים ספיגה כדי לשמור על לחץ דם. 5-7 גישת כלי דם, במיוחד השתלה של צנתרים פטנט חשובה במיוחד כאשר אנו לומדים טיפולים ניסיוניים לאלח דם. במשך שנים רבות, את היכולת לנהל את הטיפול קליני סטנדרטי למכרסמים הייתה מוגבלת על ידי הזמינות של החומרים עם התכונות הנדרשות לבניית צנתרים מושתלים והיכולת של טכנולוגית העירוי כדי לספק כמויות קטנות באופן מדויק לאורך זמן. בנוסף, היכולת לעורר עירוי בתגובה לניטור הרציף של מידת hemodynamic ספציפית מאפשרת לעמדה עקבית ודירותמודל ארד טיפול בעת השימוש במדגם גדול יותר בגדלים אופייניים למחקרים במכרסמים. 8, 9 מגבלות טכנולוגיות אלה בחומרים ובחומרת דיוק היה להתגבר, אבל כדי לספק טיפולים שיגרתי בו-זמנית תוך ניטור פרמטרים המודינמית, שני עורקים וכלי דם ורידי גישה חייבים להיות זמינים. הווידאו מפרט את הטכניקה הניתוחית להשתלת עורק התרדמה וצנתרי וריד הצוואר נפוצים בעכברים מורדמים. בעקבות תקופת החלמה 72 שעות, בעלי החיים יהיו מחדש מורדמים ומחוברים להתקנה לקשור ומסתובבים צמודות לדיור המכרסם המשמש לחיבור הצנתרים המושתלים למערכת הניטור המודינמי. במהלך המחקר, המערכת מאפשרת לעירוי נוזלים המבוסס על שני מספקים נפח נתון בקצב עירוי מסוים או מערכת אוטומטית המספקת קצב עירוי בהתאם ללחץ הדם הממוצע זוהה לשמור על טווח לחץ נתון. מערכת עירוי הנוזליםמשתמש מזרק לתכנות משאבות ממשק שעם יציאות הדיגיטליות של נתוני מערכת הרכישה ונשלטים על ידי תוכנת ניטור MAP. ההתקנה לקשור ומסתובבים מאפשרת תנועה חופשית של העכברוש במהלך המחקר תוך ניטור לחצים, יציקת נוזלים וvasopressors, וביצוע דגימת דם ללא צורך לתפעל את בעלי החיים. ניטור סימולטני של עד 12 בעלי חיים instrumented עם 2 צנתרים כל אחת (בהגדרה שלנו) עם החומרה להרחבה עד 24 ניטור בעלי החיים instrumented מאפשר גמישות רבה ללימוד קבוצות מרובדת מרובות בכל ניסוי. בצנתור זה יכול להיות מועיל למתקני מחקר המשתמשים במודלים של מכרסמים דומים הדורשים גישה של כלי דם לניטור, דיגום וטיפול לתקופה של עד 11 ימים. אם מתקן המחקר שוקל הליך זה יש לו ניסיון עם מכרסמים ומבנה תמיכה נאות לשמירה על בעלי חיים אלה אז developing מיומנויות אלה יכולים לספק חיסכון משמעותי בעלויות, להפחית את העלות הכוללת לכל חולדה צינתור מיותר מ -180 דולרים לפחות מ -50 דולרים (כוללים עכברוש נאיבי, רכיבי קטטר ועלויות טכניות) והגדלת גמישות תזמון (חולדות נאיביות הם מוכנה לעומת לוח זמנים משלוח חברה של מושתל חולדות). ההצלחה של הליך זה תלויה בכישוריו של פרט ביצוע הצנתורים. בעלי החיים ההכשרה הנדרשים כדי להיות מיומן בהליך זה נע 20-40 חולדות עם שיעור patency קטטר וכתוצאה מכך של&gt; 90%.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="715">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:299px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:131px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">straight micro dissecting forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-8102</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">delicate straight hemostatic forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-7114</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">delicate curved hemostatic forceps</td>
			<td>Miltex</td>
			<td style="width:119px;">&#160;7-4</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">serrefine curved, very delicate micro clamp</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-5471</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">micro dissecting hook</td>
			<td>Miltex</td>
			<td style="width:119px;">19-220</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">angled on edge micro dissecting spring scissor</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-5618</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">light operating scissor</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-6750</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">scalpel handle and blade (#10)</td>
			<td>Cincinnati Surgical</td>
			<td style="width:119px;">RS-9843</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">pack of 4-0 silk suture with curved needle</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">FS-2</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">straight micro suturing needle holder</td>
			<td>Roboz</td>
			<td style="width:119px;">RS-6410</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">wound clip</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:119px;">59027</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">sterile gauze 2&#34;x2&#34;&#160;</td>
			<td>Dynarex</td>
			<td style="width:119px;">3362</td>
			<td>consumable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">gauze 4&#34;x4&#34;&#160;</td>
			<td>Covidien</td>
			<td style="width:119px;">2556</td>
			<td>consumable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anesthesia vaporizer</td>
			<td>Surgivet</td>
			<td style="width:119px;">V703001</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">lucite box</td>
			<td>Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">downdraft Table</td>
			<td>Airscience</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">table top surgical platform</td>
			<td>Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">arterial Catheter</td>
			<td>Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>consumable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">venous Catheter</td>
			<td>Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>consumable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Data Acquisition System</td>
			<td style="width:131px;">ADInstruments</td>
			<td style="width:119px;">Powerlab 16/30</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Data Analysis software</td>
			<td style="width:131px;">ADInstruments</td>
			<td style="width:119px;">LabChart v7.3</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Programmable infusion pumps</td>
			<td style="width:131px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">PHD Ultra</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model

ההצלחה של מודל חיה קטן ללמוד מחלה קריטית היא, בחלקו, תלויה ביכולתו של המודל כדי לדמות את מצבו של האדם. חיסון תוך-קנה הנשימה של כמות ידועה של חיידקים שמש בהצלחה לשחזר את פתוגנזה של דלקת ריאות אשר לאחר מכן מתפתחת לאלח דם. ניטור המודינמי פרמטרים ומתן טיפול קליני סטנדרטי כוללים עירוי של אנטיביוטיקה, נוזלים ותרופות לשמירה על לחץ דם היא קריטי כדי לדמות טיפול תומך שבשגרה במודל הזה, אבל לשם כך נדרש שני עורקים וכלי דם ורידי גישה. הווידאו מפרט את הטכניקה הניתוחית להשתלת עורק התרדמה וצנתרי וריד הצוואר נפוצים בעכברים מורדמים. בעקבות תקופת החלמה 72 שעות, בעלי החיים יהיו מחדש מורדמים ומחוברים להתקנה לקשור ומסתובבים צמודות לדיור המכרסמים המחבר את הצנתרים המושתלים למערכת הניטור המודינמי. התקנה זו מאפשרת תנועה חופשית שללהלשין במהלך המחקר תוך מעקב רציף לחצים, יציקת נוזלים ותרופות (אנטיביוטיקה, vasopressors) וביצוע דגימת דם.

שינויים בלחץ בכלי דם מועברים דרך הצנתרים נוזל מלא (איור 1) והמירו לאותות חשמליים המיוצגת על ידי הגל המודינמית (איורים 2, 3). ללא גישה של כלי דם, אמצעים אלה לא יכלו להתבצע. הזרמה של צורות הגל בזמן אמת מאפשרת זיהוי וניתוח של שינויים בקצב להכות בסיס (איור 2). דחיסת הסולם של צורות הגל הזמן מאפשרת לכימות שינויים המתרחשים על פני יותר זמן (דקות ליום) (איור 3, 4 צורות גל עליון) שיכול להיות מתואם עם שינויים בשערי עירוי vasopressor (איור 3, 4 צורות גל נמוכים יותר). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/51881/51881fig1.jpg" /> איור 1. צנתר עיצוב: פרטים של הרכיבים של הצנתרים עורקים וורידי PU, פוליאוריטן;. PE, פוליאתילן (אורך קטע) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig1highres.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/51881/51881fig2.jpg" /> איור 2. גל MAP בזמן אמת של 4 מכרסמים אופייניים 7 ימים לאחר צנתור-מעל 7 שניות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig2highres.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/51881/51881fig3.jpg" /> איור 3. גל-דחוס זמן MAP של 4 מכרסמים טיפוסיים (עליון 4 צורות גל) 7 ימים לאחר צנתור מעל 1 שעה. כאשר המפה היא בממוצע (4 צורות גל נמוכים יותר), ערך המשמש להדק מוסיף גבוה (&lt;90 מ&quot;מ כספית) , נמוך (&lt;100 מ&quot;מ כספית) או להפסיק (&gt; 11זרימת תגובה ממשאבת העירוי 0). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51881/51881fig3highres.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model at JoVE.com

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

צנתור של עורק התרדמה וצוואר הווריד לבצע צעדים המודינמית, חליטות ודגימת דם במודל עכברוש מודע

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

catheterization-carotid-artery-jugular-vein-to-perform-hemodynamic

Research

JoVE Journal

Medicine

71.1K Views.  National Institutes of Health. Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

Video: Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically implanted catheters permit a researcher to effectively and humanely administer substances, perform repeated blood sampling and assists in conscious direct measurements of blood pressure and heart rate. Once the catheter is implanted long-term sampling is possible. Patency and catheter life depends on multiple factors including the lock solution used, flushing regimen and catheter material. This video will demonstrate the methodology of femoral artery and venous catheterization of the rat. In addition the video will demonstrate the use of the femoral venous and arterial catheters for blood sampling, drug administration and use of the arterial catheter in taking measurements of blood pressure and heart rate in a conscious freely-moving rat. A tether and harness attached to a swivel system will allow the animal to be housed and have samples taken by the researcher with minimal disruption to the animal. To maintain patency of the catheter, careful daily maintenance of the catheter is required using lock solution (100 U/ml heparinized saline), machine-ground blunt tip syringe needles and the use of syringe filters to minimize potential contamination. With careful aseptic surgical techniques, proper catheter materials and careful catheter maintenance techniques, it is possible to sustain patent catheters and healthy animals for long periods of time (several weeks).

Chronic catheterization of blood vessels in the rat is often required for administration of substances, obtain blood sample over a period of time or for direct conscious blood pressure measurements. Femoral arterial catheterization of the rat and corresponding measurements of blood pressure in the conscious animal will be demonstrated.

צנתור עורקי ורידי הירך עבור דגימה דם, והתרופות ולחץ דם מודעת דרג מדידות הלב

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in peripheral arterial bypass surgery as well as in arteriovenous fistulas.1-5 The experimental procedure of vein graft interposition in the common carotid artery by using the cuff-technique has been applied in several research projects to examine the aetiology of neointimal hyperplasia and therapeutic options to address it. 6-8 The cuff prevents vessel anastomotic remodeling and induces turbulence within the graft and thereby the development of neointimal hyperplasia.
Using the superior caval vein graft is an established small-animal model for venous arterialization experiment.9-11 This current protocol refers to an established jugular vein graft interposition technique first described by Zou et al., 9 as well as others.12-14 Nevertheless, these cited small animal protocols are complicated.
To simplify the procedure and to minimize the number of experimental animals needed, a detailed operation protocol by video training is presented. This video should help the novice surgeon to learn both the cuff-technique and the vein graft interposition. Hereby, the right external jugular vein was grafted in cuff-technique in the common carotid artery of 21 female Sprague Dawley rats categorized in three equal groups that were sacrificed on day 21, 42 and 84, respectively. Notably, no donor animals were needed, because auto-transplantations were performed. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice. In addition, the graft patency rate was 60 % for the first 10 operated animals and 82 % for the remaining 11 animals. The blood flow at the time of sacrifice was 8&plusmn;3 ml/min. In conclusion, this surgical protocol considerably simplifies, optimizes and standardizes this complicated procedure. It gives novice surgeons easy, step-by-step instruction, explaining possible pitfalls, thereby helping them to gain expertise fast and avoid useless sacrifice of experimental animals.

Neointimal hyperplasia is the primary cause of stenosis in arterialized veins. We propose a new protocol whereby the right external jugular vein is grafted using the cuff technique in the common carotid artery of Sprague Dawley rats. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice.

אימון טכניקה מתוחכמת מייקרו: התערבותם של שתלי וריד צוואר חיצוניים בעורק התרדמה המשותף בחולדות

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

דגם Murine של השתלת תומכן בעורק הראשי לחקר restenosis

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model creating an artificial fistula between the common carotid artery (CCA) and the external jugular vein (EJV) has been widely described and proved technically feasible. This construct provokes a consistent cerebral venous hypertension (CVH), and therefore has helped studying the contribution of venous hypertension to formation, clinical symptoms, and prognosis of brain AVMs and dural AVFs. Equivalent mice models have been only scarcely described and have shown trouble with stenosis of the fistula. An established murine model would allow the study of not only pathophysiology but also potential genetic therapies for these cerebrovascular diseases.
We present a model of arteriovenous fistula that produces a durable intracranial venous hypertension in the mouse. Microsurgical anastomosis of the murine CCA and EJV can be difficult due to diminutive anatomy and frequently result in a non-patent fistula. In this step-by-step protocol we address all the important challenges encountered during this procedure. Avoiding excessive retraction of the vein during the exposure, using 11-0 sutures instead of 10-0, and making a carefully planned end-to-side anastomosis are some of the critical steps. Although this method requires advanced microsurgical skills and a longer learning curve that the equivalent in the rat, it can be consistently developed.
This novel model has been designed to integrate transgenic mouse techniques with a previously well-established experimental system that has proved useful to study brain AVMs and dural AVFs. By opening the possibility of using transgenic mice, a broader spectrum of valid models can be achieved and genetic treatments can also be tested. The experimental construct could also be further adapted to the study of other cerebrovascular diseases related with venous hypertension such as migraine, transient global amnesia, transient monocular blindness, etc.

We describe a method for creating a reliable model of cerebral venous hypertension in the adult mouse. This model has been widely described and tested in the rat. This new counterpart in the mice opens the possibility of using genetic modified animals and thereby broadens the applications of the model.

למבוגרים עכבר ורידי יתר לחץ דם דגם: עורק תרדמה משותף לחיצוני הצוואר וריד השקה.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and cellular mechanisms involved in vascular smooth muscle dedifferentiation, neointima formation and vascular remodeling. Male Sprague-Dawley rats are the most frequently employed animals for this model. Female rats are not preferred as female hormones are protective against vascular diseases and thus introduce a variation into this procedure. The left carotid is typically injured with the right carotid serving as a negative control. Left carotid injury is caused by the inflated balloon that denudes the endothelium and distends the vessel wall. Following injury, potential therapeutic strategies such as the use of pharmacological compounds and either gene or shRNA transfer can be evaluated. Typically for gene or shRNA transfer, the injured section of the vessel lumen is locally transduced for 30 min with viral particles encoding either a protein or shRNA for delivery and expression in the injured vessel wall. Neointimal thickening representing proliferative vascular smooth muscle cells usually peaks at 2 weeks after injury. Vessels are mostly harvested at this time point for cellular and molecular analysis of cell signaling pathways as well as gene and protein expression. Vessels can also be harvested at earlier time points to determine the onset of expression and/or activation of a specific protein or pathway, depending on the experimental aims intended. Vessels can be characterized and evaluated using histological staining, immunohistochemistry, protein/mRNA assays, and activity assays. The intact right carotid artery from the same animal is an ideal internal control. Injury-induced changes in molecular and cellular parameters can be evaluated by comparing the injured artery to the internal right control artery. Likewise, therapeutic modalities can be evaluated by comparing the injured and treated artery to the control injured only artery.

This protocol uses a balloon catheter to cause an intraluminal injury on the rat carotid artery and henceforth elicit neointimal hyperplasia. This is a well-established model for studying the mechanisms of vascular remodeling in response to injury. It is also widely used to determine the validity of potential therapeutic approaches.

כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

שלב ניגודיות תהודה מגנטית בעורק החולדה נפוצים

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, which could potentially affect results. The jugular vein cannulation (JVC) in rats is a widely used model for repeated blood collection but requires adequate training of surgery skills and animal care. This article details the microsurgical procedures for establishing and maintaining a permanent JVC rat model with specific focus on the placement and sealing of the jugular cannula. The importance of monitoring physiological (e.g., body weight, food, and water intake) and hematological parameters, was highlighted with results presented for 6 days post-surgery during the rat&#39;s recovery. The drug-plasma concentration-time profile of orally administered natural phenol ellagic acid was determined in the JVC rat model.

Detailed microsurgical techniques are demonstrated to establish a longer-term jugular vein cannulation rat model for sequential blood collection in the same animal. Physiological and hematological parameters have been monitored during the rat's recovery phase. This model has been applied to study pharmacokinetics of orally administered polyphenol without inducing animal stress.

מיומנויות מיקרוכירורגיות של הקמת קנדול וריד הצוואר קבוע בחולדות עבור דגימת דם סדרתית של תרופה מנוהלת דרך הפה

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to detect drug exposure. The rat blood sampling method determines the quality of the plasma and further affects the precision of the test results. The subclavian vein blood collection method described in this protocol collects blood samples repeatedly in the conscious state of animals to meet the needs of PK and TK tests. The skills of restraint handling and appropriate procedure of needle incision ensure the success rate of blood collection. It is easy to operate while ensuring the quality of plasma and at the same time catering to animal welfare. However, this method requires skilled operation, and an improper one may cause animal weakness, pain, lameness, and even mortality. The current method has been used in the testing facility for a 4-week oral toxicity study in Sprague Dawley (SD) rats with TK. The maximum amount of blood collected within 24 h did not exceed 20% of the animal's total blood. The animals' body weight was more than 200 g for males and females. The data showed that the animals' bodyweight increased steadily every week, and the clinical observation was normal after repetitive sample collection.

The present protocol describes a simple and efficient method for collecting blood from the subclavian vein in rats. It enables rapid, timely, and easily identifiable sampling without anesthesia and obtains high-quality blood through repetitive sample collection.

דגימת דם חוזרת מהווריד הסובקלבי של חולדה מודעת

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...