Name: eliciting and analyzing male mouse ultrasonic vocalization (usv) songs
Uploaded: 2017-05-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization USV Songs at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי הווארד יוז רפואי קרן כספים EDJ. אנו מודים לפרו. סילבי גרנון (NeuroPSI - אוניברסיטת פריז דרום XI - צרפת) עבור ההלוואות לנו את החומרה דובר. אנו מודים גם לחברי ג&#39;ארביס מעבדה על תמיכתם, דיונים, תיקונים והערות על עבודה זו, במיוחד יהושע ג &#39;ונס Macopson לעזרה עם דמויות ובדיקות. אנו מודים לד&quot;ר Gustavo Arriaga לעזרה עם תוכנת העכבר Mouse Analyzer, לשדרג את זה לנו V1.3, וכן היבטים אחרים של פרוטוקול זה. V1.0 של התוכנה פותחה על ידי הקודש גואו, ו v1.1 ו v1.3 על ידי Arriaga.

<ol>
	<li>Amato, F. R., Scalera, E., Sarli, C., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pups+call,+mothers+rush:+does+maternal+responsiveness+affect+the+amount+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+pups.">Pups call, mothers rush: does maternal responsiveness affect the amount of ultrasonic vocalizations in mouse pups.</a> Behav. Genet. 35, 103-112 (2005).</li><li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affiliative+behavior,+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice.">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PloS ONE. 2, e351 (2007).</li><li>Moles, A., Costantini, F., Garbugino, L., Zanettini, C., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+vocalizations+emitted+during+dyadic+interactions+in+female+mice:+a+possible+index+of+sociability.">Ultrasonic vocalizations emitted during dyadic interactions in female mice: a possible index of sociability.</a> Behav. Brain Res. 182, 223-230 (2007).</li><li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment.">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PloS ONE. 7, e29401 (2012).</li><li>Yang, M., Loureiro, D., Kalikhman, D., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+mice+emit+distinct+ultrasonic+vocalizations+when+the+female+leaves+the+social+interaction+arena.">Male mice emit distinct ultrasonic vocalizations when the female leaves the social interaction arena.</a> Front. Behav. Neurosci. 7, (2013).</li><li>Petric, R., Kalcounis-Rueppell, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+and+male+adult+brush+mice+(Peromyscus+boylii)+use+ultrasonic+vocalizations+in+the+wild.">Female and male adult brush mice (Peromyscus boylii) use ultrasonic vocalizations in the wild.</a> Behaviour. 150, 1747-1766 (2013).</li><li>Bishop, S. L., Lahvis, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autism+diagnosis+in+translation:+shared+affect+in+children+and+mouse+models+of+ASD.">The autism diagnosis in translation: shared affect in children and mouse models of ASD.</a> Autism Res. 4, 317-335 (2011).</li><li>Lahvis, G. P., Alleva, E., Scattoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translating+mouse+vocalizations:+prosody+and+frequency+modulation.">Translating mouse vocalizations: prosody and frequency modulation.</a> Genes Brain &amp; Behav. 10, 4-16 (2011).</li><li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T+tf/J+mouse+model+of+autism.">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PloS ONE. 3, (2008).</li><li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice,+birds,+and+men:+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds.">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li><li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+songs+of+male+mice.">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li><li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice.">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Amer. Assoc. Lab. Anim. Science: JAALAS. 46, 28-28 (2007).</li><li>Wohr, M., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affective+communication+in+rodents:+ultrasonic+vocalizations+as+a+tool+for+research+on+emotion+and+motivation.">Affective communication in rodents: ultrasonic vocalizations as a tool for research on emotion and motivation.</a> Cell Tissue Res. , 81-97 (2013).</li><li>Pasch, B., George, A. S., Campbell, P., Phelps, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen-dependent+male+vocal+performance+influences+female+preference+in+Neotropical+singing+mice.">Androgen-dependent male vocal performance influences female preference in Neotropical singing mice.</a> Animal Behav. 82, 177-183 (2011).</li><li>Asaba, A., Hattori, T., Mogi, K., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+attractiveness+of+male+chemicals+and+vocalizations+in+mice.">Sexual attractiveness of male chemicals and vocalizations in mice.</a> Front. Neurosci. 8, (2014).</li><li>Balaban, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bird+song+syntax:+learned+intraspecific+variation+is+meaningful.">Bird song syntax: learned intraspecific variation is meaningful.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85, 3657-3660 (1988).</li><li>Byers, B. E., Kroodsma, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mate+choice+and+songbird+song+repertoires.">Female mate choice and songbird song repertoires.</a> Animal Behav. 77, 13-22 (2009).</li><li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations.">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li><li>Pomerantz, S. M., Nunez, A. A., Bean, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+behavior+is+affected+by+male+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice.">Female behavior is affected by male ultrasonic vocalizations in house mice.</a> Physiol. &amp; Behav. 31, 91-96 (1983).</li><li>White, N. R., Prasad, M., Barfield, R. J., Nyby, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=40-+and+70-kHz+Vocalizations+of+Mice+(Mus+musculus)+during+Copulation.">40- and 70-kHz Vocalizations of Mice (Mus musculus) during Copulation.</a> Physiol. &amp; Behav. 63, 467-473 (1998).</li><li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+'songs'+with+approach+behaviour.">Female mice respond to male ultrasonic 'songs' with approach behaviour.</a> Biology Letters. 5, 589-592 (2009).</li><li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Autism+ProSAP1/Shank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations.">The Autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li><li>Chabout, J., Sarkar, A., Dunson, D. B., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male+mice+song+syntax+depends+on+social+contexts+and+influences+female+preferences.">Male mice song syntax depends on social contexts and influences female preferences.</a> Front. Behav. Neurosci. 9. 76, (2015).</li><li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice.">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. &amp; Behav. 96, 602-605 (2009).</li><li>Roullet, F. I., Wohr, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+urine-induced+male+mice+ultrasonic+vocalizations,+but+not+scent-marking,+is+modulated+by+social+experience.">Female urine-induced male mice ultrasonic vocalizations, but not scent-marking, is modulated by social experience.</a> Behav. Brain Res. 216, 19-28 (2011).</li><li>Barthelemy, M., Gourbal, B. E., Gabrion, C., Petit, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+the+female+sexual+cycle+on+BALB/c+mouse+calling+behaviour+during+mating.">Influence of the female sexual cycle on BALB/c mouse calling behaviour during mating.</a> Die Naturwissenschaften. 91, 135-138 (2004).</li><li>Byers, S. L., Wiles, M. V., Dunn, S. L., Taft, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+estrous+cycle+identification+tool+and+images.">Mouse estrous cycle identification tool and images.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li><li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male.">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li><li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ULTRASONIC+EMISSIONS:+DO+THEY+FACILITATE+COURTSHIP+OF+MICE.">ULTRASONIC EMISSIONS: DO THEY FACILITATE COURTSHIP OF MICE.</a> J. Comp. Physiolog. Psych. 84, 445-452 (1973).</li><li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+mice.">Developmental social environment imprints female preference for male song in mice.</a> PloS ONE. 9, 87186 (2014).</li><li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays.">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li><li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Penagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VoICE:+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models.">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Scientific Reports. 5, 10237 (2015).</li><li>Grimsley, J. M., Gadziola, M. A., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+classification+of+mouse+pup+isolation+syllables:+from+cluster+analysis+to+an+Excel-based+"mouse+pup+syllable+classification+calculator".">Automated classification of mouse pup isolation syllables: from cluster analysis to an Excel-based "mouse pup syllable classification calculator".</a> Front. Behav. Neurosci. 6, (2012).</li><li>Grimsley, J. M. S., Monaghan, J. J. M., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+social+vocalizations+in+mice.">Development of social vocalizations in mice.</a> PloS ONE. 6, (2011).</li><li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication.">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li><li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+(Mus+musculus+domesticus).">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PloS ONE. 9, 97244 (2014).</li><li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA/CaJ+mice+(Mus+musculus)+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations.">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PloS ONE. 9, 85405 (2014).</li><li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go/no-go+task+in+mice.">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136, 3401 (2014).</li><li>Asaba, A., Kato, M., Koshida, N., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Ultrasonic+Vocalization+Preferences+in+Mice+using+a+Two-choice+Playback.">Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback.</a> J Vis Exp. , (2015).</li></ol>

למחברים אין מה לחשוף.

פרוטוקול זה מספק גישות לאסוף, לכמת, ולחקור הזכרים חיזור wocalizations במעבדה על פני מגוון רחב של גירויים הקשורים בעיקר נקבה. כפי שהוצג בעבר Chabout, et al. 23 ובתוצאות המייצגות, השימוש בשיטה זו איפשר לנו לגלות קוליות ותלות תלויי הקשר, שחשובים לגבי הנקבות המקבלות. התקינה של גירויים אלה תספק אוסף של מספר אמין של USVs ולאפשר ניתוח מפורט של שירי החיזור של הגבר רפרטואר. כאשר נקבה חיה נמצאת עם הזכר, הפרוטוקול אינו מאפשר לנו לזהות בבירור את הפולט של הקול. עם זאת, מחקרים קודמים הראו כי רוב הקולות הנפלט בהקשר זה היו על ידי זכר 26 , 29 . רוב המחקרים באמצעות קונספסיפיק (זכר או נקבה)כגירוי לגברים מאמינים שכמות הקולות של נשים בהקשרים אלה היא זניחה 4 , 5 , 22 , 30 . עם זאת, לאחרונה נייר המשמש triangulation כדי למקם את הקול של הפולט בתנאים קבוצה מגורים 31 , והראה כי בתוך dyad, הנקבה תורמת ~ 10% של USVs. בפרוטוקול הנוכחי, השימוש בנשים הרדמה מאפשר למשתמש ללמוד את הזמרות הגבריות בנוכחות נקבה ללא הקול שלה. בניגוד לציפיות ממחקר זה 31 , לא מצאנו הבדל במספר ההברות הנפלטות בין ה - FE ל - AF 23 . זה אפשרי כי נשים לחיות לא תרמו באופן משמעותי להקלטות או כי הזכרים השמיעו פחות בנוכחות של נקבות חיות לעומת femed anaesthetizedאלס. עם זאת, אנו מאמינים כי ניסויים עתידיים צריכים לשקול את השימוש בשיטת טריאנגולציה זו כדי להעריך את ההשפעה הפוטנציאלית של התרומה הנשית. ישנן תוכנות אחרות הזמינות שיכולים לעשות כמה הצעדים שציינו, אם כי אנחנו לא מאמינים בצורה מספקת לשאלות שאלנו באמצעות שילוב של שלוש תוכניות: תוכנה, A השיר שיר Analyzer סקריפט תוכנה C באמצעות תוכנה B, תוכנת ניתוח תחביר באמצעות תוכנת גיליון אלקטרוני מותאם אישית D + E חישובים, ואת תחביר תחביר באמצעות R. לדוגמה, נייר שהוצע לאחרונה תוכנה בשם VoICE המאפשר למשתמש לחלץ משתנים אקוסטיים באופן אוטומטי מן sonograms או ישירות על יחידות שהיו ידנית שנבחר על ידי המשתמש 32 . אבל, אוטומטיות או חצי אוטומטיות ניתוח רצף אינם מפורטים כמו הגישה שלנו. תוכנות מסחריות מסוימות יכולות לנתח באופן אוטומטי את התכונות האקוסטיות, אך אינן מספקות אוטומציההסיווג האטי של ההברות; המשתמש צריך למיין את ההברות השונות לאחר מכן. Grimsley, Gadziola, et al. 33 פיתחה תוכנית וירטואלית המבוססת על טבלה של עכבר וירטואלי המבוססת על תכונות אקוסטיות משותפות, אך אינה מספקת זיהוי אוטומטי של ההברות. התוכנית שלהם 34 היא ייחודית בכך שהיא יוצרת רצפים חדשים מתוך שירים מוקלטים באמצעות מודלים מרקוב, ולכן יש תכונות מתקדמות יותר מאשר עריכה פשוטה. רוב מחקרים קודמים על תקשורת התמקדו בצד של emitter 35 , 36 . מחקרים מעטים בחנו את הצד של המקלט 30 , 37 , 38 . פרוטוקולי השמעה ואפליה מספקים בדיקה פשוטה כדי לחקור את הצד של המקלט, כמו זה המתואר גם לאחרונה על ידי Asaba, Kato, etאל. 39 . במחקר זה, המחברים השתמשו בתיבת בדיקה דו-ברירה שהופרדה עם קצף אקוסטי במקום בתיבה מבוך Y המתוארת כאן. שני setups הבחירה יש יתרונות וחסרונות. ראשית, ה- Y- מבוך לא מבודד את הצליל מזרוע אחת לאחרת, אבל תיבת הבחירה שתי עושה. עם זאת, באמצעות עיצוב Y- מבוך, החיה יכולה להעריך במהירות את שני השירים המופעלים בו זמנית, ולעבור לכיוון המועדף. עם זאת, ניסויים השמעה באופן כללי לעזור הניסויים לקבוע את המשמעות ואת הפונקציות ובכך של הזויות שנוצרו עבור בעלי חיים קונספסיפיק. לסיכום, לאחר מאסטרינג את הטכניקות של פרוטוקול זה וניתוחים, הקוראים צריכים להיות מסוגלים לענות על שאלות רבות המשפיעות על הקשר, גנטיקה, נוירוביולוגיה של USVs העכבר. באמצעות B6D2F1 / J עכברים, גירויים הקשורים נקבה כמעט תמיד להפעיל USVs מן הזכרים בדקנו במעבדה שלנו. זה קריטי כדי קולג &#39;Ct מספיק הברות (&gt; 100 ב 5 דקות) כדי להיות מסוגל לקבל ניתוח סטטיסטי חזק. לפתרון בעיות, אם לא נרשמו USVs (או לא מספיק), בדוק את התצורה כדי לוודא שהקלטות מוקלטות. לעשות בדיקה חיה של מה שקורה בכלוב במהלך ההקלטה על ידי מבט על sonogram בזמן אמת על מסך המחשב לאחר כניסתה של הגירוי. אחרת נסה לחשוף מחדש את הזכר לנקבה מינית / קולטנית מינית בן לילה ולאחר מכן הבית אותם לבד במשך כמה ימים או עד שבוע לפני ההקלטה שוב. בהתבסס על תצפיות אנקדוטיות, אנו מוצאים כי כמה זכרים לשיר הרבה ביום אחד (כמעט 5 דקות מלא), ולא הרבה למחרת, ואז שוב עוד יום. איננו יודעים מדוע הסיבה לכך מתרחשת בשונות משתנה, אך אנו מניחים שהיא כנראה מוטיבציה או עונתית עבור הזכרים, ומצב השתן עבור שתן נשית. אם לא USVs נרשמות, לנסות להקליט את החיה על מספר ימים כדי להרים את השפעות אלה משתנה. UnlIke בציפורי שיר, אנחנו לא ציינו הבדלים גלויים כמות השירה על פי השעה ביום. אנו מוצאים כי הזכרים אינם שרים הרבה (&lt;100 הברות ב 5 דקות) לפני שהם 7 שבועות. שיטות האיתור המוצגות כאן יכולות לחלץ אלפי הברות וכל הפרמטרים האקוסטיים תוך מספר דקות. אבל כמו כל שיטת זיהוי אוטומטי, הוא רגיש מאוד רעש רקע. באמצעות עכבר השיר Analyzer זיהוי תוכנה עם הקלטות רועש (למשל מבעלי חיים שנרשמו עם תשתית) עשויים לדרוש התאמת סף &quot;זיהוי&quot; כדי לאפשר גמישות רבה יותר. עם זאת, זה יגדיל גם את מספר ההברות חיוביות שווא ואת זיהוי אוטומטי עלול להיכשל. בנסיבות כאלה, ניתן להשתמש בקידוד ידני. כאמור, מספר, repertories, חביון של vocalizations משתנים באופן נרחב בהתאם לזן, ולכן ייתכן שיהיה צורך לשנות את הפרמטרים (אורך ההקלטה,גירוי, זיהוי הברה אוטומטית, וכו &#39; ) עבור כמה זנים כדי להבטיח הקלטות אופטימלי עבור ניתוחים סטטיסטיים.

יחסית לבני אדם, עכברים מייצרים הן קוליות בתדר נמוך והן בתדר גבוה, הנקראות מאוחר יותר בשם &quot;קולי קולי&quot; (USVs) מעל טווח השמיעה שלנו. USVs מיוצרים במגוון של הקשרים, כולל מ אחזור הגור אמא, אינטראקציות לנוער, על יחסי מין או יחסי מין למבוגרים אותו 4 , 12 . אלה USVs מורכבים רפרטואר multisyllabic מגוונים אשר ניתן לסווג ידנית 9 או באופן אוטומטי 10 , 11 . תפקידם של USVs אלה בתקשורת נמצא תחת חקירה גוברת בשנים האחרונות. אלה כוללים שימוש USVs כמו readouts של מודלים העכבר של הפרעות נוירופסיכיאטריות, התפתחותיות או התנהגותיות 7 , 8 , ומצבים מוטיבציוניים / רגשיים פנימיים 13 . USVs נחשבים להעביר מידע אמין על המצב של מיטר כי הוא שימושי עבור מקלט 14 , 15 . בשנת 2005, הקדוש ו Guo 11 , את הרעיון כי עכברים זכרים בוגרים USVs היו מאורגנים כמו רצף של אלמנטים להתקשר multisyllabic או הברות הדומות ציפורי שיר. במינים רבים, רפרטואר multisyllabic מאפשר emitter לשלב ולהזמין הברות בדרכים שונות כדי להגדיל את המידע הפוטנציאלי נשאו על ידי השיר. שינוי בתחביר זה הוא האמין כי יש רלוונטיות אתית עבור התנהגות מינית והזדווגות העדפות 16 , 17 . מחקרים שנערכו לאחר מכן הראו כי עכברים זכרים הצליחו לשנות את ההרכב היחסי של סוגי הברה שהם מייצרים לפני, במהלך ולאחר נוכחות של נקבה 5 , 18 . כלומר, עכברים זכרים בוגרים להשתמש USVs שלהם עבור התנהגות החיזור, או כדי למשוךאו לשמור על קשר קרוב עם נקבה, או כדי להקל על ההזדווגות 19 , 20 , 21 . הם גם נפלטים באינטראקציות בין גברים לגברים, כנראה כדי להעביר מידע חברתי במהלך אינטראקציות 4 . כדי ללכוד שינויים אלה רפרטואר, מדענים בדרך כלל למדוד את תכונות ספקטרלי (פרמטרים אקוסטיים, כגון משרעת, תדרים, וכו &#39; ), מספר USVs הברות או שיחות, ואת חביון הראשון USV. עם זאת, מעטים באמת להסתכל על רצף הדינמיקה של USVs אלה בפירוט 22 . לאחרונה הקבוצה שלנו פיתחה שיטה חדשנית למדידת שינויים דינמיים ברצף ההברה של USV 23 . הראינו כי הסדר הברה בתוך שיר (כלומר תחביר) אינו אקראי, כי הוא משתנה בהתאם להקשר החברתי, וכי בעלי החיים מקשיב לזהות שינויים אלה כמו רלוונטיים מבחינה אתית. אנו מציינים thבחוקרים רבים החוקרים תקשורת בבעלי חיים אינם מצרפים למונח &#39;תחביר&#39; בדיוק אותה משמעות כמו תחביר המשמש בדיבור האנושי. עבור לימודי התקשורת בבעלי חיים, אנו פשוט מתכוון רצף הורה, לא אקראי, של צלילים עם כמה כללים. עבור בני אדם, בנוסף, רצפים ספציפיים ידועים משמעויות ספציפיות. אנחנו לא יודעים אם זה המקרה של עכברים. במאמר זה ואת הווידאו הקשורים, אנו שואפים לספק פרוטוקולים אמינים כדי להקליט החיזור של עכברים USVs החיזור על פני הקשרים שונים, ולבצע פלייבקים. השימוש של שלושה תוכנות ברצף בשימוש עבור: 1) הקלטות אוטומטיות; 2) זיהוי הברה קידוד; ו 3) ניתוח מעמיק של תכונות ההברה תחביר הוא הפגינו ( איור 1 ). זה מאפשר לנו ללמוד יותר על עכברים זכר מבנה USV ופונקציה. אנו מאמינים כי שיטות אלה להקל על ניתוחים לנתונים יכול לפתוח אופקים חדשים באפיון תקשורת קול רגיל נורמלי ב mouמודלים של תקשורת והפרעות נוירופסיכיאטריות, בהתאמה.

<table><tbody><tr><td>Sound proof beach cooler</td><td>See Gus paper has more info on specific kind</td><td></td><td>Inside dimensions (L 27 x W 23 x H 47 cm):</td></tr><tr><td>Condenser ultrasound microphone CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#40011</td><td>Includes extension cable&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate 1216H sound card</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#34175</td><td>12 channel sound card</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate Player 216H</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#70117</td><td>2 channels playback player</td></tr><tr><td>Ultrasonic Electrostatic Speaker ESS polaroid</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#60103</td><td>2 playback speakers</td></tr><tr><td>Test cage&amp;nbsp;</td><td>Ace</td><td>#PC75J</td><td>30 x 8 x 13 cm height; plexiglas</td></tr><tr><td>plexiglas separation</td><td>home made</td><td>-</td><td>4 x 13 cm plexiglas with 1 cm holes</td></tr><tr><td>Video camera</td><td>Logitech</td><td>C920</td><td>logitech HD Pro webcam C920</td></tr><tr><td>Heat pad&amp;nbsp;</td><td>Sunbeam</td><td>722-810-000</td><td></td></tr><tr><td>Y-maze&amp;nbsp;</td><td>Home made</td><td>-</td><td>Inside dimensions (L 30 x W 11 x H 29 cm):</td></tr><tr><td>Tweezers</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;&lt;u&gt;Software&lt;/u&gt;&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avisoft Recorder (Software A)</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td>http://www.avisoft.com</td></tr><tr><td>MATLAB R2013a (Software B)</td><td>MathWorks</td><td>-</td><td>MATLAB R2013a (8.1.0.604)</td></tr><tr><td>Mouse Song Analyzer v1.3 (Software C)</td><td>Custom designed by Holy, Guo, Arriaga, &amp;amp; Jarvis; Runs with software B</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Mouse_Song_Analyzer_&lt;br /&gt;v1.3-2015-03-23.zip</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel 2013 (Software D)</td><td>Microsoft</td><td>-</td><td>Microsoft Office Excel</td></tr><tr><td>Song Analysis Guide v1.1 (Software E)</td><td>Custom designed by Chabout &amp;amp; Jarvis. Excel calculator sheets, runs with software D</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Song-analysis_Guided.xlsx</td></tr><tr><td>Syntax decorder v1.1 (Software F)</td><td>Custom designed by Sakar, Chabout, Dunson, Jarvis - in R studio</td><td></td><td>https://www.rstudio.com/products/rstudio/download/</td></tr><tr><td>Graphiz (Software G)</td><td>AT&amp;amp;T Research and others&amp;nbsp;</td><td></td><td>http://www.graphviz.org</td></tr><tr><td>Avisoft SASLab (Software H)</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Germany</td><td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td>http://www.avisoft.com</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;&lt;u&gt;Reagents&lt;/u&gt;&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine (20 mg/mL)</td><td>Anased</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine HCl (100 mg/mL)</td><td>Henry Schein</td><td>#045822</td><td></td></tr><tr><td>distilled water</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye ointment&amp;nbsp;</td><td>Puralube Vet Ointment&amp;nbsp;</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Cotton tips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petri dish</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

eliciting and analyzing male mouse ultrasonic vocalization (usv) songs

עכברים לייצר vocalizations קולי (USVs) במגוון של הקשרים חברתיים לאורך התפתחות ובגרות. אלה USVs משמשים אחזור אם אמא 1 , אינטראקציות לנוער 2 , מול אינטראקציות מין אותו 3 , 4 , 5 , אינטראקציות טריטוריאלית 6 . במשך עשרות שנים, USVs היו בשימוש על ידי חוקרים כמו proxies ללמוד נוירופסיכיאטרית והתפתחותית או הפרעות התנהגותיות 7 , 8 , 9 , ולאחרונה להבין מנגנונים ואבולוציה של תקשורת קולית בקרב חוליות 10 . בתוך אינטראקציות מיניות, עכברים זכרים בוגרים לייצר שירים USV, אשר יש כמה תכונות דומות שירי חיזור של ציפורי שיר 11 . שימוש כזה reper multisyllabicToires יכול להגדיל את הגמישות הפוטנציאלית ואת המידע שהם נושאים, כפי שהם יכולים להיות מגוונים כיצד אלמנטים מאורגנים recombined, כלומר תחביר. בפרוטוקול זה שיטה אמינה כדי לעורר שירים USV מעכברים זכרים בהקשרים חברתיים שונים, כגון חשיפה שתן נקבה טרי, בעלי חיים הרדים, ונקבות הנבלות הוא תיאר. זה כולל תנאים כדי לגרום כמות גדולה של הברות מן העכברים. אנו מפחיתים את ההקלטה של ​​רעשי הסביבה עם תאי קול זולים, ומציגים שיטת כימות כדי לזהות, לסווג ולנתח באופן אוטומטי את USVs. האחרונה כוללת הערכה של שיעור שיחה, רפרטואר קולי, פרמטרים אקוסטיים ותחביר. גישות שונות תובנה על שימוש השמעה ללמוד העדפה של בעלי חיים עבור סוגי שירים ספציפיים מתוארים. שיטות אלה שימשו לתיאור שינויים אקוסטיים ותחביר בין הקשרים שונים בעכברים זכריים, והעדפות שירים בעכברים הנשיים.

בפרוטוקול הנוכחי, שינויים התנהגות קולי ו תחביר של גברים B6D2F1 / J עכברים אופיינו. באופן כללי, באמצעות פרוטוקול זה הצלחנו להקליט, בממוצע לכל זכר לכל 5 דקות הפעלה, 675 ± 98.5 הברות מסווגות בתגובה אור נקבה, 615.6 ± 72 ב FE, 450 ± 134 ב AF, 75.6 ± 38.9 AM ו 0.2 ± 0.1 ב UR זכר (n = 12 גברים). השיעורים היו ~ 130 הברות / דקות עבור UR, ~ 120 הברות / דקות עבור FE, או ~ 100 הברות / דקות עבור הקשרים AF ( איור 5 א ). גברים מייצרים כמות הרבה יותר גדולה של הברות בתגובה לשתן שנאסף טרי יחסית לשתן שנאסף בן לילה 10 , 23 . גברים גם לשיר הרבה פחות נוכחות של גבר הרדים או שתן זכר טריים איור 5 א ). הזכרים גם משנים את הרפרטואר שלהם בהקשר 23 . לדוגמה, B6D2F1 / J גברים להגדיל באופן משמעותי<html> הייצור של מספר רב של קפיצה המגרש &quot;מ&quot; קטגוריה הברות במצב השתן הנשי ( איור 5 ב ). הם גם משנים תכונות אקוסטיות של הברות בודדות על פני ההקשר. לדוגמה, הזכרים B6D2F1 / J מזמרים הברות במשרעת וברוחב פס גבוה יותר בהקשר של השתן הנשי, וטוהר ספקטרלי גבוה יותר בהקשר הנשי העולה בהשוואה לאחרים ( איור 6 ). פרוטוקול זה מספק גם אמצעי למדידת תכונות דינמיות של רצף ולכן שינויים תחביר. שימוש בשיטה מותאמת מ- Ey, et al. 22 , אנו משתמשים ISI כדי להגדיר את הפערים בין רצפים ( איור 7 א ) 23 , ולאחר מכן להשתמש פערים להבחין ולנתח תבניות זמניות של רצפים ההברה. הראינו אורך אורכים ארוכים יותר מיוצרים בהקשר נשית ער ( איור 7 ב ).23 טכניקה זו מאפשרת לנו לחשב את היחס בין רצפים מורכבים (המורכבים על - ידי לפחות 2 מופעים של סוג ה ה &quot;מ&quot;) לעומת רצפים פשוטים (המורכבים מסוג אחד או ללא &quot;m&quot;, ולכן בעיקר על ידי &quot; ), מצאנו כי אצל B6D2F1 / J, הקשר בין השתן הנשי הפעיל יחס גבוה יותר בהשוואה לאחרים ( איור 7 ג ) 23 , דבר המצביע על כך שהפיקו הברות מורכבות יותר במצב השתן הנשי, אך גם כי הברות אלו מופצות על רצפים יותר. כמו כן, אנו מסוגלים לחשב את ההסתברות למעבר מותנה מסוג הברה אחת לאחרת (24 סוגי מעבר כולל המעברים מ - אל &quot;השתיקה&quot;). מצאנו כי בהקשרים שונים, הבחירה של סוגי העכברים בסוגי מעבר של הברות התחלתיות שונות, וכי יש יותר div תחבירErsity במצב השתן הנשי ( איור 8 ) 23 . התצפיות הללו תואמות את הדיווחים הקודמים שמראים שהגברים יכולים לשנות את התכונות האקוסטיות או את הרפרטואר של ההרכב שלהם בתגובה לגירויים ולחוויות שונים 4 , 5 , 24 . לבסוף, פרוטוקול זה מספק הדרכה כדי לבדוק את ההעדפות הנשיות עם פלייבקים. מצאנו כי בנות B6D2F1 / J מעדיפות שירים מורכבים יותר (המכילים 2 או יותר &quot;הברות&quot;) ביחס לשירים פשוטים 23 . רוב הנשים בחרו להישאר לעתים קרובות יותר בצד של מבוך Y ששיחק את השירים המורכבים ( איור 4 ב ). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig1.jpg" /> איור 1: תרשים זרימה של SofTware השתמש וניתוח. כל תוכנית וקוד קשור מקבלים שם מכתב שיסייע להסביר את זהותם ואת השימוש שלהם בטקסט הראשי. ב () הם תוכניות ספציפיות אנו משתמשים בפרוטוקול שלנו. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig2.jpg" /> איור 2: הגדר להקלטת שירי עכבר זכר. (A) תמונה של תיבת הקלטת הנחתה קול ולהגדיר להקלטות קול USV. (ב) דוגמה sonogram של הקלטה שנעשו עם תוכנה A ( טבלה 1 ), כולל תכונות ספקטרליות מפורט מחושב על ידי &quot;עכבר Song Analyzer v1.3&quot;: משך, בין ההברה מרווח (ISI), תדר שיא דקות (PF דקות) שיא מקסימלי שיא (Pf מקסימום), תדר שיא להתחיל (התחלה PF), תדר שיא<html> (סוף Pf), ואת רוחב הפס. (ג) סונוגרמות של שירה זכר נוספת אל נקבה חיה, בתוך תיבת הנחתה קול ומחוץ לקופסה על ספסל המעבדה באותו חדר. התצפיות האנקדוטיות שלנו מציינות שההקלטות בתיבה של אותה חיה מראות נפח גדול יותר (עוצמה חזקה יותר) ופחות הרמוניות, אך אין עדות להדים בתיבה ללא קצף קול. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig3.jpg" /> איור 3: מסך של &quot;שיר העכבר Analyzer v1.3&quot; whis_gui חלון מציג את האפשרויות השונות הזמינות עבור ניתוח. הפרמטרים המוצגים הם אלה המשמשים כדי להקליט USVs זכר בנתונים ונתונים לנתח הציג (למעט משך הערה דקות היה 3 אלפיות השנייה).<html> &quot;לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.&quot; Target = &quot;_ blank&quot; לחץ כאן כדי לראות גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig4.jpg" /> איור 4: אפשרויות נקבות בין השמעת שירים מורכבים ופשוטים. (א) תמונה של המנגנון Y- מבוך המשמש מדידות מימד. (ב) הזמן המושקע על ידי הנקבות בכל זרוע, משחק או מתוך מורכבות (שתן נשית נקבה) או פשוט יותר (ערער נקבה הנפתחת) השיר מאותו זכר. הנתונים מוצגים עבור n = 10 B6D2F1J נקבה עכברים כמו ממוצע ± SE, עם ערכים בודדים מוצגים גם; 9 מתוך 10 הנקבות הראו העדפה לשיר ההברה / רצף המורכב יותר. * P &lt;0.05 זיווג סטודנט מבחן. איור שונה מ Chabout, et al. 23 ברשות.<html> ריק &quot;&gt; אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig5.jpg" /> איור 5: מספר ההברות הנפלטות ורפרטואר מעבר לתנאים . (א) שיעור הייצור ההברה של זכרים בהקשרים שונים. (ב) יצירות רפרטואר של זכרים כאשר בנוכחות של שתן נקבה (UR), נקבה הרדים (AF), נשים ערות (FE), והקשר הרדים (AM) הרדים. הנתונים מוצגים כ ממוצע ± SEM. * P &lt;0.03; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 עבור מבחן פוסט-הוק סטודנט לאחר פוסט-הוק לאחר תיקון בנג&#39;מיני והוכברג (n = 12 גברים). איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <html> יחד .within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig6.jpg" /> איור 6: דוגמאות לתכונות ספקטרליות בהקשר שונה. (A) משרעת. * P &lt;0.025 עבור מבחן פוסט-הוק סטודנט משויך לאחר תיקון. (ב) טווח תדרים או רוחב פס. *: P &lt;0.041; **: p &lt;0.005; ***: &lt;0.0001 לאחר תיקון. (ג) טוהר ספקטרלי של ההברות. * P: &lt;0.025; **: p &lt;0.005; ***: &lt;0.0001 לאחר תיקון. קיצורים: שתן נקבה (UR), נקבה מורדמת (AF), נקבה ער (FE), ו הרדים זכר (AM). דמויות משופר מחברות, ואח &#39;. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <html> 37fig7.jpg &quot;/&gt; איור 7: מדידות רצף. (א) שימוש של ה- ISI להפריד את רצף. ISI קצר (SI) ו ISI בינוני (MI) משמשים להפריד הברות בתוך רצף, ו- ISI ארוך מעל 250 ms (LI) להפריד שני רצפים. (ב) אורך הרצפים, הנמדדים כמספר ההברות לפי רצף, המיוצר על ידי זכרים בהקשרים שונים. *: P &lt;0.025; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 לאחר תיקון. (ג) יחס של שירים מורכבים על שירים פשוטים המיוצרים על ידי זכרים בהקשרים שונים. * P &lt;0.041; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 לאחר תיקון. הנתונים מוצגים כ ממוצע ± SEM (n = 12 גברים). איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> Ogether.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig8.jpg" /> איור 8: הברה תחביר דיאגרמות של רצפים על בסיס הסתברות מותנה עבור כל ההקשרים. עובי החץ הוא פרופורציונלי להתרחשות ההסתברות המותנית של סוג המעבר בכל הקשר בממוצע מ- n = 12 זכרים: P (התרחשות של מעבר בהתחשב בהברה ההתחלתית). לשם הבהירות, מעברים נדירים מתחת להסתברות של 0.05 אינם מוצגים. איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization USV Songs at JoVE.com

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization USV Songs

עכברים לייצר רפרטואר multisyllabic מורכבים של vocalizations קולי (USVs). אלה USVs נמצאים בשימוש נרחב כמו readouts עבור הפרעות נוירופסיכיאטריות. פרוטוקול זה מתאר כמה מהנוהלים שלמדנו ופיתחנו כדי לעקב באופן עקבי, לאסוף ולנתח את התכונות האקוסטיות והתחביר של שירי העכבר.

Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים

Mice produce ultrasonic vocalizations (USVs) in a variety of social contexts throughout development and adulthood. These USVs are used for mother-pup ...

eliciting-and-analyzing-male-mouse-ultrasonic-vocalization-usv-songs

Research

JoVE Journal

Behavior

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

15.7K Views.  Duke University.  עכברים לייצר רפרטואר multisyllabic מורכבים של vocalizations קולי (USVs). אלה USVs נמצאים בשימוש נרחב כמו readouts עבור הפרעות נוירופסיכיאטריות. פרוטוקול זה מתאר כמה מהנוהלים שלמדנו ופיתחנו כדי לעקב באופן עקבי, לאסוף ולנתח את התכונות האקוסטיות והתחביר של שירי ה...

Video: Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization USV Songs

Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software

Locomotor activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice and other rodents. Improvements in video tracking software (VTS) have allowed it to be coupled to LMA testing, dramatically improving specificity and sensitivity when compared to the line crossings method with manual scoring. In addition, VTS enables high-throughput experimentation. While similar to automated video tracking used for the open field test (OFT), LMA testing is unique in that it allows mice to remain in their home cage and does not utilize the anxiogenic stimulus of bright lighting during the active phase of the light-dark cycle. Traditionally, LMA has been used for short periods of time (mins), while longer movement studies (hrs-days) have often used implanted transmitters and biotelemetry. With the option of real-time tracking, long-, like short-term LMA testing, can now be conducted using videography. Long-term LMA testing requires a specialized, but easily constructed, cage so that food and water (which is usually positioned on the cage top) does not obstruct videography. Importantly, videography and VTS allows for the quantification of parameters, such as path of mouse movement, that are difficult or unfeasible to measure with line crossing and/or biotelemetry. In sum, LMA testing coupled to VTS affords a more complete description of mouse movement and the ability to examine locomotion over an extended period of time.

Locomotor activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice. Coupling of video tracking software (VTS) and LMA allows for the improvement of specificity and sensitivity, especially when compared with the manual, line crossing method of LMA analysis. Additionally VTS allows long-term tracking of mouse LMA.

לטווח ארוך והקצרה של תנועה פעילות עכבר נותחה על ידי תוכנה למעקב וידאו

Locomotor  activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice  and other rodents. Improvements in video tracking software ...

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association between environmental cues and aversive experiences. In this test, mice are placed into a conditioning chamber and are given parings of a conditioned stimulus (an auditory cue) and an aversive unconditioned stimulus (an electric footshock). After a delay time, the mice are exposed to the same conditioning chamber and a differently shaped chamber with presentation of the auditory cue. Freezing behavior during the test is measured as an index of fear memory. To analyze the behavior automatically, we have developed a video analyzing system using the ImageFZ application software program, which is available as a free download at http://www.mouse-phenotype.org/. Here, to show the details of our protocol, we demonstrate our procedure for the contextual and cued fear conditioning test in C57BL/6J mice using the ImageFZ system. In addition, we validated our protocol and the video analyzing system performance by comparing freezing time measured by the ImageFZ system or a photobeam-based computer measurement system with that scored by a human observer. As shown in our representative results, the data obtained by ImageFZ were similar to those analyzed by a human observer, indicating that the behavioral analysis using the ImageFZ system is highly reliable. The present movie article provides detailed information regarding the test procedures and will promote understanding of the experimental situation.

This article presents a protocol for a contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system to assess fear learning and memory in mice.

אוויר מבחן הקשר ורמז פחד באמצעות מערכת ניתוח וידאו בעכברים

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Irrelevant Stimuli and Action Control: Analyzing the Influence of Ignored Stimuli via the Distractor-Response Binding Paradigm

Selection tasks in which simple stimuli (e.g. letters) are presented and a target stimulus has to be selected against one or more distractor stimuli are frequently used in the research on human action control. One important question in these settings is how distractor stimuli, competing with the target stimulus for a response, influence actions. The distractor-response binding paradigm can be used to investigate this influence. It is particular useful to separately analyze response retrieval and distractor inhibition effects. Computer-based experiments are used to collect the data (reaction times and error rates). In a number of sequentially presented pairs of stimulus arrays (prime-probe design), participants respond to targets while ignoring distractor stimuli. Importantly, the factors response relation in the arrays of each pair (repetition vs. change) and distractor relation (repetition vs. change) are varied orthogonally. The repetition of the same distractor then has a different effect depending on response relation (repetition vs. change) between arrays. This result pattern can be explained by response retrieval due to distractor repetition. In addition, distractor inhibition effects are indicated by a general advantage due to distractor repetition. The described paradigm has proven useful to determine relevant parameters for response retrieval effects on human action.

The distractor-response binding paradigm is described. It can be used to shed light on the influence irrelevant stimuli, competing with targets for a response, can have on human action. Both response retrieval effects and distractor inhibition effects can be analyzed within the paradigm.

גירויים לא רלוונטיים ופעולת בקרה: ניתוח ההשפעה של גירויים שהתעלמו מן באמצעות המסיח-תגובת איגוד פרדיגמה

Selection tasks in which simple stimuli (e.g. letters) are presented and a target stimulus has to be selected against one or more distractor stimuli are ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

מבחן מוריס מים מבוך: אופטימיזציה לזני עכבר ובדיקת איכות סביבה

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, sex, condition, and genetic background of the emitting animal. Although many studies have characterized these differences, whether receiver mice can discriminate among objectively different USVs and show preferences for particular sound traits remains to be elucidated. To determine whether mice can discriminate between different characteristics of USVs, a playback experiment was developed recently, in which preference responses of mice to two different USVs could be evaluated in the form of a place preference.
First, USVs from mice were recorded. Then, the recorded USVs were edited, trimmed accordingly, and exported as stereophonic sound files. Next, the USV amplitudes generated by the two ultrasound emitters used in the experiment were adjusted to the same sound pressure level. Nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitters were used to play the USVs back. Finally, to investigate the preference of subject mice to selected USVs, pairs of two differing USV signals were played back simultaneously in a two-choice test box. By repeatedly entering a defined zone near an ultrasound emitter and searching the wire mesh in front of the emitter, the mouse reveals its preference for one sound over another. This model allows comparing the attractiveness of the various features of mouse USVs, in various contexts.

Ultrasonic vocalizations (USVs) in mice differ depending on age, sex, condition, and genetic background. Using two ultrasound emitters broadcasting simultaneously in different locations, this two-choice test can evaluate murine recognition and preference responses to different characteristics of USVs.

קביעת העדפות Ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

Recording Mouse Ultrasonic Vocalizations to Evaluate Social Communication

Mice emit ultrasonic vocalizations in different contexts throughout development and in adulthood. These vocal signals are now currently used as proxies for modeling the genetic bases of vocal communication deficits. Characterizing the vocal behavior of mouse models carrying mutations in genes associated with neuropsychiatric disorders such as autism spectrum disorders will help to understand the mechanisms leading to social communication deficits. We provide here protocols to reliably elicit ultrasonic vocalizations in pups and in adult mice. This standardization will help reduce inter-study variability due to the experimental settings. Pup isolation calls are recorded throughout development from individual pups isolated from dam and littermates. In adulthood, vocalizations are recorded during same-sex interactions (without a sexual component) by exposing socially motivated males or females to an unknown same-sex conspecific. We also provide a protocol to record vocalizations from adult males exposed to an estrus female. In this context, there is a sexual component in the interaction. These protocols are established to elicit a large amount of ultrasonic vocalizations in laboratory mice. However, we point out the important inter-individual variability in the vocal behavior of mice, which should be taken into account by recording a minimal number of individuals (at least 12 in each condition). These recordings of ultrasonic vocalizations are used to evaluate the call rate, the vocal repertoire and the acoustic structure of the calls. Data are combined with the analysis of synchronous video recordings to provide a more complete view on social communication in mice. These protocols are used to characterize the vocal communication deficits in mice lacking ProSAP1/Shank2, a gene associated with autism spectrum disorders. More ultrasonic vocalizations recordings can also be found on the mouseTube database, developed to favor the exchange of such data.

Mouse ultrasonic vocalizations are used as proxies to model the genetic bases of vocal communication deficits in mouse models for neuropsychiatric disorders. The present protocol describes three experimental contexts that reliably elicit ultrasonic vocalizations from pups (throughout development) and adult mice (same-sex interactions, male-estrus female interactions).

הקלטת עכבר Ultrasonic קולות של להערכת תקשורת חברתית

Mice emit ultrasonic vocalizations in different contexts throughout development and in adulthood. These vocal signals are now currently used as proxies ...

Targeted Training of Ultrasonic Vocalizations in Aged and Parkinsonian Rats

Voice deficits are a common complication of both Parkinson disease (PD) and aging; they can significantly diminish quality of life by impacting communication abilities. 1, 2 Targeted training (speech/voice therapy) can improve specific voice deficits,3, 4 although the underlying mechanisms of behavioral interventions are not well understood. Systematic investigation of voice deficits and therapy should consider many factors that are difficult to control in humans, such as age, home environment, age post-onset of disease, severity of disease, and medications. The method presented here uses an animal model of vocalization that allows for systematic study of how underlying sensorimotor mechanisms change with targeted voice training. The ultrasonic recording and analysis procedures outlined in this protocol are applicable to any investigation of rodent ultrasonic vocalizations.
The ultrasonic vocalizations of rodents are emerging as a valuable model to investigate the neural substrates of behavior.5-8 Both rodent and human vocalizations carry semiotic value and are produced by modifying an egressive airflow with a laryngeal constriction.9, 10 Thus, rodent vocalizations may be a useful model to study voice deficits in a sensorimotor context. Further, rat models allow us to study the neurobiological underpinnings of recovery from deficits with targeted training.
To model PD we use Long-Evans rats (Charles River Laboratories International, Inc.) and induce parkinsonism by a unilateral infusion of 7 &mu;g of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) into the medial forebrain bundle which causes moderate to severe degeneration of presynaptic striatal neurons (for details see Ciucci, 2010).11, 12 For our aging model we use the Fischer 344/Brown Norway F1 (National Institute on Aging).
Our primary method for eliciting vocalizations is to expose sexually-experienced male rats to sexually receptive female rats. When the male becomes interested in the female, the female is removed and the male continues to vocalize. By rewarding complex vocalizations with food or water, both the number of complex vocalizations and the rate of vocalizations can be increased (Figure 1).
An ultrasonic microphone mounted above the male's home cage records the vocalizations. Recording begins after the female rat is removed to isolate the male calls. Vocalizations can be viewed in real time for training or recorded and analyzed offline. By recording and acoustically analyzing vocalizations before and after vocal training, the effects of disease and restoration of normal function with training can be assessed. This model also allows us to relate the observed behavioral (vocal) improvements to changes in the brain and neuromuscular system.

Voice disorders are debilitating in aging and Parkinson disease. The ultrasonic vocalizations of rats, also affected by these conditions, can be used to study these voice disorders, their neural substrates, and the nature of functional recovery with behavioral intervention.

אימון ממוקד של קולות Ultrasonic בחולדות ומעלה פרקינסון

Voice deficits are a common complication of both Parkinson disease (PD) and aging; they can significantly diminish quality of life by impacting ...

Neuroscience

An Automated Rapid Iterative Negative Geotaxis Assay for Analyzing Adult Climbing Behavior in a Drosophila Model of Neurodegeneration

Neurodegenerative diseases are frequently associated with a progressive loss of movement ability, reduced life span, and age-dependent neurodegeneration. To understand the mechanism of these cellular events, and their causal relationships with each other, Drosophila melanogaster, with its sophisticated genetic tools and diverse behavioral features, are used as disease models for assessing neurodegenerative phenotypes. Here we describe a high-throughput method to analyze Drosophila adult negative geotaxis behavior, as an indication for possible motor defects associated with neurodegeneration. An automated machine is designed and developed to drive fly synchronization using an initial electric impulse, later allowing the recording of negative geotaxis behavior over a course of secs to mins. Images from the digitally recorded video are then processed with the self-designed RflyDetection software for statistical data manipulation. Different from the manually controlled negative geotaxis assay based on single fly, this precise, fast, and high-throughput protocol allows data acquisition from more than hundreds of flies simultaneously, providing an efficient approach to advance our understanding in the underlying mechanism of locomotor deficits associated with neurodegeneration.

An Automated Rapid Iterative Negative Geotaxis Assay for Analyzing Adult Climbing Behavior in a Drosophila Model of Neurodegeneration

This step-by-step protocol analyzes Drosophila negative geotaxis behavior using an automated multi-cylinder system that hosts hundreds of flies and synchronizes their action by an electric motor. Upon synchronization, fly negative geotaxis behavior is assayed, digitally recorded, and analyzed using the self-designed RflyDetection software.

וזמינותו אוטומטית מהירה Geotaxis שלילי איטרטיבי לניתוח התנהגות טיפוס למבוגרים מודל דרוזופילה הקשורים ניוון מוחיים

Neurodegenerative diseases are frequently associated with a progressive loss of movement ability, reduced life span, and age-dependent neurodegeneration. ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

מדגדג, טכניקה להשראת השפעה חיובית בעת טיפול חולדות

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Assessment of Sexual Behavior of Male Mice

Sexual behavior is highly species-specific. Although rodents have slightly different sexual behaviors, mice and rats have a similar sexual behavioral pattern. The purpose of this article is to describe the hormone-induced estrus ovariectomized female model and the experimental procedure for the assessment of sexual behavior of male mice. The most important sexual behavioral elements are demonstrated in the video and illustrations. The critical steps, advantages, and limitations of the sexual behavior test are explained as well. Finally, the behavior parameters are presented, and mounting, intromission, and ejaculation processes in mating are distinguished. Behavioral parameters are assessed in terms of the occurred duration and counts during the test period.

This article describes how to perform sexual behavior tests in male mice.

הערכה של התנהגות מינית של עכברים זכרים

Sexual behavior is highly species-specific. Although rodents have slightly different sexual behaviors, mice and rats have a similar sexual behavioral ...