המחברים לא תודות לך

בעלי חיים שוכנו במתקן טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת דרום דנמרק לפי הנחיות מוסדיים. כל הניסויים בוצעו על פי המדריך מכוני הבריאות הלאומיים עבור טיפול והשתמש של חיות מעבדה. זהו הליך הניתוח חריפה, ההישרדות.
1. הכנת אבובים, אלקטרודה, מכשירי ניתוח
<ol><li>השתמש המיקרוכירורגית הכלים הבאים: מספריים כירורגיים, מספריים מיקרו זוויתי, מלקחיים רקמות, זוג דומונט #7 מלקחיים מיקרו מעוקל #5, בעל מחט מיקרו ואת רטרקטורים. הערה: זה הליך חריפה, הכלים לא צריך להיות מעוקר. לאחר השימוש, לנקות ולמחוק את הטיפים עם 70% אתנול.</li>
	<li>להשרות את הצנרור 70% אתנול, ואז לשטוף את זה עם סטרילי 0.9% NaCl עם הפרין U/mL 100 לפני השימוש. להשאיר את הצנרור מלא כדי להימנע מהחדרה בועות אוויר לתוך המערכת.</li>
	<li>לחתוך חתיכה באורך 20-30 ס מ של פוליאתילן (PE) אבובים-50 כדי להפוך צנתר עבור המידה ICP. ודא לאורך צינור קצר ככל האפשר להפחית את הלחץ לשבור.</li>
	<li>בנד סטרילי 24G מחט--לצד עד המחט שובר באמצע. חברו את פיסת עם שפוע לקצה הדיסטלי של לאורך צינור PE להכנסה לתוך מנ הפין. הכנס השני כמעט עד ה-hub להתחברות מתמר לחץ. למלא את המערכת heparinized מלוחים (100 U/mL).</li>
	<li>כדי להפוך את האלקטרודה מצופה טפלון דו-קוטבי, חוטים לחתוך מיקרומטר 125 שתי כסף כדי באורך שווה. השתמש חתיכה של נייר דבק כדי לצרף את החוטים על קצה השולחן ושרשר אותן יחד. לאחר מכן, לצרף האלקטרודה צלחת שחורה.</li>
	<li>עושים חתך קטן לתוך טפלון ולהשתמש מלקחיים מיקרו #5 להתפשט באורך 4-5 מ מ של ציפוי טפלון את קצות האלקטרודות. חתוך את הטיפים עם איזמל להשיג אורך אפילו וליצור ווים על ידי כיפוף את הקצוות סביב קצה להב סכין קהה.</li>
	<li>קלטת האלקטרודה עם תום הארכת במקצת מעל קצה הלוח השחור עם ווים כלפי מעלה. מערבבים את דבק סיליקון על צלחת פלסטיק עבור 10 s וגלישת בועה דבק מסביב האלקטרודה 1-2 מ מ הקרס.</li>
	<li>לאפשר לו להתייבש במשך כ- 5 דקות לפני השימוש (איור 1). רצועת טפלון של מקטע ארוך יותר בצד השני, כדי לאפשר חיבור ממריץ. הערה: עם מחדש עושה הווים בקצה הדיסטלי, האלקטרודה חוזר פעמים רבות.</li>
</ol>2. הכנת החיה
<ol><li>לאחר מאלחש את החיה, לגלח את החצי התחתון של הבטן, צוואר, שריר חיץ הנקבים. לשפשף את החיה עם אלכוהול 70% ואחריו povidone יוד שלוש פעמים. מניחים את החולדה על כרית מחוממת כירורגי במצב פרקדן. החל הוטרינר העין משחה, לעבור את ההרדמה לידי קונוס האף עם 2.5% חמצן איזופלוריין ו- 0.8 L/min כנשא. הערה: התאם את רמת איזופלוריין וחמצן כדי להשיג רמה סבירה של הרדמה.</li>
</ol>3. הכנה presurgical
<ol><li>בצע את ההליך הכירורגי כולו תחת מיקרוסקופ הפעלה: הגדלה ועד 3.15 X 20 X מספיקה. שימוש בכפפות, לשמור על סביבה נקייה במהלך הניתוח. מניחים את החולדה על תלוי.</li>
</ol>4. Ischiocavernosus שרירים לנתיחה למדידה של ICP
<ol><li>עם סכין, מספריים ישר ושימוש דומונט #7 מעוקל מלקחיים מיקרו לגרום של 1 ס מ אנכי העור חתך רוחבי 5 מ מ עד האמצע מתחיל ברמה של הבסיס של הפין והארכת כלפי מטה (איור 2 א). השתמש מקלון, הפרד בזהירות את הכביש הצדדי fascia אל שק האשכים (איור 2B). לאחר לנתח fascia, לצרף רטרקטורים, ימשש עם כותנה-טיפ-החלפה כדי למצוא את tuberosity ischial (איור 2C).</li>
	<li>לנתח דרך המדיאלי רקמת שומן בנקודה זו עד לשריר ischiocavernosus הוא מדמיין (איור 3 א). השתמש זוג מלקחיים מיקרו מעוקל דומונט #7, longitudinally נפרדות השריר. Albuginea tunica יופיעו כמבנה לבנים בהירים (איור 3B). באמצעות מלקחיים מיקרו מיקרו מספריים, לחשוף את albuginea tunica במידה מספקת כדי לראות כמובן שלה (איור 3C).</li>
	<li>לאחר כיול של ההגדרות מערכות, הכנס אבובים דרך העור על חיץ הנקבים, לוודא שהוא אכן פועל במקביל מנ הפין (איור 4). אשאיר את הקו במקום ולשמור את החתך לח עם תמיסת מלח.</li>
</ol>5. CN לנתיחה לגירוי
<ol><li>לעשות 2 ס מ נמוך, קו האמצע החתך בבטן דרך העור, שימוש, ראשית, אזמל, ולאחר מכן עם זוג מספריים ישרים וחדים מיקרו. ליצור חתך התאמת דרך fascia לאורך לינאה אלבה, שרירי הרקמה הבסיסית ולחשוף את שלפוחית השתן, בלוטת הערמונית.</li>
	<li>השתמש רטרקטורים לקבל חשיפה טובה. השתמש מטליות צמר גפן-טיפ הערמונית להפריד רקמת שומן כדי לקבל הדמיה ברורה של גנגליון האגן הגדולות (MPG) ו- CN, פועל על ההיבט דורסולטרלי של הערמונית (איור 5).</li>
	<li>לאחר ויזואליזציה של MPG ו- CN, בזהירות פצעים וחתכים fascia המכסים העצב דיסטלי ל MPG 2-5 מ"מ עם מספריים בזווית מיקרו (איור 6a). עם השימוש של מלקחיים מיקרו #5, להפיץ את הרקמה בכל צד של העצב ותחתיו לשחרר חלק ארוך 4 מ מ (איור 6b) והחלק 9-0 בתפר תחת העצב (איור 6 c).</li>
	<li>להעלות את רמת העצב מעט בעזרת התפר (איור 7 א) כדי להקל על השמה של הווים של האלקטרודה דו-קוטבי סביב העצב (איור 7 ב). תן עוזר תערובת דבק סיליקון שני עם קצה אינסולין מחט יבש ס' 5 העצב ולהחיל הדבק על האזור סביב הווים, העצב (איור 7 c, d). לשמור את העצב מוגברות על ידי משיכת מעט האלקטרודה עבור 1 דקות לאפשר את הדבק להתייבש.</li>
	<li>הסר את רטרקטורים, למעט רטרקטורים שבצד ימין כדי להימנע מכל מושך או פיתול של האלקטרודה. הרטב את האיברים החשופים עם גזה מלוחים ושכב טבולים תמיסת מלח מעל החתך.</li>
</ol>6. חלול הגוף תעלות למדידה של ICP
<ol><li>לשחזר את החזיית albuginea tunica באמצעות רטרקטורים. הקפד לא לצרף את רטרקטורים לשריר ischiocavernosus כמו זה יעוות את מנ.</li>
	<li>לצרף את המחט ותורידי את הצנרור עם מלוחים heparinized לפני החדרת אותו לתוך albuginea tunica. שמור את albuginea tunica מתוח, באמצעות מלקחיים מיקרו מעוקל דומונט #7 ביד אחת (הלא-דומיננטי), מחזיק את albuginea tunica ואת שאר השרירים שמעליה דיסטלי עד לנקודה של ההכנסה. . תחזיקי את המחט עם מלקחיים ישר מיקרו ובשניה דומיננטי וודא להציג את זה במקביל עם הקורס של גוף חלול (איור 8).</li>
	<li>לדחוף את המחט 5-8 מ מ לתוך הגוף חלול. לשטוף את הצנרור ולחץ על מנ כדי לבדוק את הקו (איור 9). ודא כי ישנם אין דליפות. הדקו את הצנרור אל השולחן עם קלטת כדי למנוע משיכת בשוגג על הקו. הסר את רטרקטורים.</li>
</ol>7. גירוי של CN
<ol><li>עם התוכנית הקלטה (למשל, ספייק 2) פועל, ללא הרף להקליט שני תרופתי ומרושעת עורקי הלחץ.</li>
	<li>להגדיר את הפרמטרים הבאים ממריץ (למשל, SD9 דשא מכשירים, ראה טבלה של חומרים) לגירוי CN: הנוכחי-mA, תדירות הרץ 16, מתח 3 V, ואת רוחב על גב 5 50 להחיל s של גירוי עם מינימום של 1 דקה של 1.5 לנוח בין stimulations. הערה: Stimulations הראשונה בדרך כלל תוצאה של תגובה מופחתת (איור 10).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Eckhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Untersuchungen &#252;ber die Erektion des Hundes In: Beitr&#228;ge zur Anatomie und Physiologie. , 123-166 (1863).</li><li>Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+as+a+model+for+the+study+of+penile+erection.">The rat as a model for the study of penile erection.</a> J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).</li><li>Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+characterization+of+a+bio-assay+of+erectile+function+in+a+rat+model.">The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model.</a> J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).</li><li>Martinez-Pineiro, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+for+the+study+of+penile+erection:+pharmacologic+and+electrical-stimulation+parameters.">Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters.</a> Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).</li><li>Hayashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+FK1706+on+erectile+function+following+bilateral+cavernous+nerve+crush+injury+in+a+rat+model.">The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model.</a> J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).</li><li>Burnett, A. L., Becker, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophilin+ligands+promote+penile+neurogenesis+and+erection+recovery+after+cavernous+nerve+injury.">Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury.</a> J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).</li><li>Yamashita, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+injury-related+erectile+dysfunction+following+nerve-sparing+radical+prostatectomy:+a+novel+experimental+dissection+model.">Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model.</a> Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).</li><li>Burnett, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GGF2+is+neuroprotective+in+a+rat+model+of+cavernous+nerve+injury-induced+erectile+dysfunction.">GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction.</a> J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).</li><li>Lin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticle+Improved+Stem+Cell+Therapy+for+Erectile+Dysfunction+in+a+Rat+Model+of+Cavernous+Nerve+Injury.">Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury.</a> J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).</li><li>Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+erectile+dysfunction.">Animal models of erectile dysfunction.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).</li><li>Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+as+an+animal+model+for+male+erectile+function+evaluation+in+sexual+medicine+research.">Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research.</a> J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).</li><li>Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+pitfalls+in+some+of+the+experimental+studies+in+erectile+function+and+dysfunction:+a+consensus+article.">Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article.</a> J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).</li><li>Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigative+models+in+erectile+dysfunction:+a+state-of-the-art+review+of+current+animal+models.">Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models.</a> J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).</li><li>Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+sequelae+of+cavernous+nerve+injury+in+the+rat:+is+there+model+dependency.">Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency.</a> J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).</li><li>Albersen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injections+of+adipose+tissue-derived+stem+cells+and+stem+cell+lysate+improve+recovery+of+erectile+function+in+a+rat+model+of+cavernous+nerve+injury.">Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury.</a> J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

המטרה העיקרית של מחקר זה היה לתיאור טכניקה כירורגית פשוטה של תעלות הפין מנ להקלטה של ICP ובידוד של CN עבור electrostimulation. הצגנו שינויים הקרע של גוף חלול כדי לפשט את הניתוח לשחזור הקלטות של העלייה של ICP לספק גירוי CN. עם חתך אנכי העור 1 ס מ, לרוחב לבסיס של הפין, באמצעות את tuberosity ischial מוחשי כמו הדרכה, השג...

מחקר in vivo של תפקוד זיקפה אצל חיות ניסוי החלה בשנת 1863 עם ניסיוני עבודתה החלוצית של אקהארט1. Electrostimulation של העצבים האגן שימש כדי לעודד את ICP מוגבר בכלבים. לאורך כלהמאה ה-20, פרוטוקולים ניסויים דומים שימשו חיות גדולות כגון כלבים, קופים, חתולים, ארנבים. הערכת תפקוד זיקפה ב עכברוש פותחה לראשונה על ידי קווינלן. et al. 19892. השיטה מאז ששינה, מתעדכנת על-ידי מספר השני קבוצות34. כיום, החולדה היא הנפוצה ביותר במודל חיה לומדים הפתולוגיה של אין-אונות, הערכת אפשרויות הטיפול המתעוררים. השלבים העיקריים של ההליך כוללים, הקלטה לחץ דם סיסטמי באמצעות קו העורק הראשי, תעלות של מנ הפין מודדים ICP, גירוי של CN לזירוז גידול ICP. למרות מספר חוקרים יש מעודן. המודל שלה הפארמצבטית נותרה בעיה, התוצאות משתנה דווחו על ידי מעבדות שונות. מספר מלכודות עדיין נמשכות.
הקודם מאמרים5,6,7,8,9,10 לתאר את השימוש של חשיפה מלאה הפין עם degloving של הפין עבור גוף חלול תעלות. זו לא גישה אופטימלית כמו מניפולציה וגורם לנתיחה משובש לפגיעה מבנים, המהווה מרכיב חיוני לתפקוד זיקפה. ניתוח CN כבר מתואר היטב10,11, אבל גירוי של העצב אינה אופטימלית עקב גורמים רבים יכולים להשפיע על תוצאות הניסוי. הטכניקה של גירוי CN כולל הרמת העצב מן הרקמה שמסביב על ידי משיכת האלקטרודה הוק דו-קוטבי, אשר ממוקם סביב העצב, וייבוש העצב לפני כל גירוי. זה יכול להוביל דרגות שונות של נזק עצבי ודליפה חשמל הנוכחי, והתוצאה תהיה תגובה מופחתת או כוזב עלייה ICP באמצעות גירוי של מסלולים חלופיים למשל, שרירי רצפת האגן, שלפוחית השתן, מערכת העיכול בדרכי12. כל הגורמים הללו מגבילים הפארמצבטית.
במהלך המחקר, הבחנו כי עומק והן בסוג ההרדמה יש השפעה עמוקה ICP. שימשו הן סודיום פנטוברביטל, קטמין/חריגות השירותים הווטרינריים או קטמין/midazolam הזרקה או שאיפת חמצן/איזופלוריין.
כאן אנו מתארים שיטה כירורגית פשוטה ולספק נתונים כדי לתמוך סטנדרטיזציה של פרוטוקול נסיוני.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="741">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Adson forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11006-12</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Dumont #7 forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11271-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Dumont #5 forceps</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">11273-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">ToughCut Mayo scissor</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">14110-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Miniature Vannas Spring scissor</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">15006-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Ultra Fine Hemostat</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">13020-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Crile Hemostat</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">13004-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Kwik-Sil Adhesive</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">KWIK-SIL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Teflon coated silver wire 0.125 mm</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">AGT0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Elastic wire retractors</td>
			<td style="width:199px;">Custom made</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Scalpel blade</td>
			<td style="width:199px;">Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">10023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">PE-50 tubing</td>
			<td style="width:199px;">Warner Instruments</td>
			<td style="width:119px;">64-0753</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">23 G Needle</td>
			<td style="width:199px;">Kruuse</td>
			<td style="width:119px;">121272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">SD-9 Square Pulse Stimulator</td>
			<td style="width:199px;">Somatco</td>
			<td style="width:119px;">1077/183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Blood pressure transducer and cable</td>
			<td style="width:199px;">World Precision Instruments</td>
			<td>BLPR2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Raucotupf Cotton-tipped Applicators</td>
			<td style="width:199px;">Lohmann-Raucher</td>
			<td style="width:119px;">11966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Pro-ophta Ocular Sticks</td>
			<td style="width:199px;">Lohmann-Raucher</td>
			<td style="width:119px;">16515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">NaCl 0,9 % 100 mL</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Heparin</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">25 mL Syringe</td>
			<td style="width:199px;">Odense University Hospital</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Vet eye ointment - Viscotears</td>
			<td style="width:199px;">Local pharmacy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">silver wires&#160;</td>
			<td colspan="2">Science Products GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:257px;">Silicon Glue&#160;</td>
			<td colspan="3">Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cavernous nerve stimulation and recording of intracavernous pressure in a rat

הגירוי של העצב חלול (CN) ומדידת הלחץ תרופתי (ICP) נעשה שימוש נרחב על בדיקה והערכה של טיפולים לבעיות בזקפה. אולם, האמצעים שננקטו להשתנות בין המעבדות, החסרונות עדיין קיימים. מטרת מחקר זה הייתה לתיאור טכניקה כירורגית שיספק מודל לשחזור ואמין. על ידי חשיפת השריר ischiocavernosus בנקודה של ההכנסה על tuberosity ischial, יכול לצינוריות מנ הפין עם ניתוח מינימלי ופציעה למבנים מעורב בפונקציה זיקפה. גירוי חוזר ונשנה של CN, ללא צורך להרים וייבוש, הושג על-ידי שימוש של 125 µm אלקטרודת כסף דו קוטבית ודבק הסיליקון מסתיימים לבודד את המתחם אלקטרודה-עצב. שיטה זו מונעת neuropraxia על-ידי הפחתת מתיחה וייבוש העצב ומספק בבידוד מוחלט של העצב, שלילת זליגת חשמל ולמניעת גירוי של מסלולים חלופיים.

השימוש של הפרוטוקול עם ההגדרות המומלצות גירוי, בהרדמה אינהלציה עם איזופלוריין 2.0% חמצן 0.8 L/דקה, צריך לייצר תוצאות כמוצג באיור 11 ואיור12, בו יש מספר גב אל גב stimulations בין 75-80 מ מ כספית. איור 13 מציגה אותה תגובה יציב לאורך 20-מין גי...

Watch this Scientific Journal Video about Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat at JoVE.com

Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

מחקר זה מתאר הליך כירורגי מפושטת עם טכניקה לביצוע גירוי עצבי חלול עם הבידוד של האלקטרודה העצב מורכבים באמצעות דבק סיליקון או תרופתי לחץ מידה.

גירוי עצבי חלול ורישום של תרופתי בלחץ עכברוש

The stimulation of the cavernous nerve (CN) and measurement of intracavernous pressure (ICP) have been used extensively to test and evaluate therapies for ...

cavernous-nerve-stimulation-recording-intracavernous-pressure

Research

JoVE Journal

Medicine

12.4K Views.  University of Southern Denmark. מחקר זה מתאר הליך כירורגי מפושטת עם טכניקה לביצוע גירוי עצבי חלול עם הבידוד של האלקטרודה העצב מורכבים באמצעות דבק סיליקון או תרופתי לחץ מידה.

Video: Cavernous Nerve Stimulation and Recording of Intracavernous Pressure in a Rat

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

מדידת לחץ תוך גולגולתי אפידורל בחולדות באמצעות מתמר סיבים אופטיים לחץ

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As such, primary or &#39;neuronal-like&#39; cell culture systems are commonly utilized. While&#160;these systems are relatively easy to work with, and are useful model systems in which various functional outcomes (such as cell death) can be readily quantified, the examined outcomes and pathways in cultured immature neurons (such as excitotoxicity-mediated cell death pathways) are not necessarily the same as those observed in mature brain, or in intact tissue. Therefore, there is the need to develop models in which cellular mechanisms in mature neural tissue can be examined. We have developed an in vitro technique that can be used to investigate a variety of molecular pathways in intact nervous tissue. The technique described herein utilizes rat cortical tissue, but this technique can be adapted to use tissue from a variety of species (such as mouse, rabbit, guinea pig, and chicken) or brain regions (for example, hippocampus, striatum, etc.). Additionally, a variety of stimulations/treatments can be used (for example, excitotoxic, administration of inhibitors, etc.). In conclusion, the brain slice model described herein can be used to examine a variety of molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

We have developed a brain slice model which can be used to examine molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.&#160;This technique generates viable mature brain tissue and reduces animal numbers required for experimentation, whilst keeping the neuronal circuitry, cellular interactions, and postsynaptic compartments partly intact.

הפעלת יתר רעיל גירוי של המוח כMicroslices<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של שבץ

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות<em&gt; In vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

A Multimodal Imaging- and Stimulation-based Method of Evaluating Connectivity-related Brain Excitability in Patients with Epilepsy

Resting-state functional connectivity MRI (rs-fcMRI) is a technique that identifies connectivity between different brain regions based on correlations over time in the blood-oxygenation level dependent signal. rs-fcMRI has been applied extensively to identify abnormalities in brain connectivity in different neurologic and psychiatric diseases. However, the relationship among rs-fcMRI connectivity abnormalities, brain electrophysiology and disease state is unknown, in part because the causal significance of alterations in functional connectivity in disease pathophysiology has not been established. Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) is a technique that uses electromagnetic induction to noninvasively produce focal changes in cortical activity. When combined with electroencephalography (EEG), TMS can be used to assess the brain's response to external perturbations. Here we provide a protocol for combining rs-fcMRI, TMS and EEG to assess the physiologic significance of alterations in functional connectivity in patients with neuropsychiatric disease. We provide representative results from a previously published study in which rs-fcMRI was used to identify regions with abnormal connectivity in patients with epilepsy due to a malformation of cortical development, periventricular nodular heterotopia (PNH). Stimulation in patients with epilepsy resulted in abnormal TMS-evoked EEG activity relative to stimulation of the same sites in matched healthy control patients, with an abnormal increase in the late component of the TMS-evoked potential, consistent with cortical hyperexcitability. This abnormality was specific to regions with abnormal resting-state functional connectivity. Electrical source analysis in a subject with previously recorded seizures demonstrated that the origin of the abnormal TMS-evoked activity co-localized with the seizure-onset zone, suggesting the presence of an epileptogenic circuit. These results demonstrate how rs-fcMRI, TMS and EEG can be utilized together to identify and understand the physiological significance of abnormal brain connectivity in human diseases.

Resting-state functional-connectivity MRI has identified abnormalities in patients with a wide range of neuropsychiatric disorders, including epilepsy due to malformations of cortical development. Transcranial Magnetic Stimulation in combination with EEG can demonstrate that patients with epilepsy have cortical hyperexcitability in regions with abnormal connectivity.

מולטימודליות Imaging- מבוסס גירוי אופן הערכת קישוריות הקשורות מוח רגיש בחולים עם אפילפסיה

Resting-state functional connectivity MRI (rs-fcMRI) is a technique that identifies connectivity between different brain regions based on correlations ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity (RSNA) is of great interest in many areas of research such as chronic kidney disease, hypertension, heart failure, diabetes and obesity. Unequivocal assessment of the role of the sympathetic nervous system is thus imperative for proper interpretation of experimental results and understanding of disease processes. RSNA has been traditionally measured in anesthetized rodents, including mice. However, mice usually exhibit very low systemic blood pressure and hemodynamic instability for several hours during anesthesia and surgery. Meaningful interpretation of RSNA is confounded by this non-physiological state, given the intimate relationship between sympathetic nervous tone and cardiovascular status. To address this limitation of traditional approaches, we developed a new method for measuring RSNA in conscious, freely-moving mice. Mice were chronically instrumented with radio-telemeters for continuous monitoring of blood pressure as well as a jugular venous infusion catheter and custom-designed bipolar electrode for direct recording of RSNA. Following a 48-72 hour recovery period, survival rate was 100% and all mice behaved normally. At this time-point, RSNA was successfully recorded in 80% of mice, with viable signals acquired up to 4 and 5 days post-surgery in 70% and 50% of mice, respectively. Physiological blood pressures were recorded in all mice (116&plusmn;2 mmHg; n=10). Recorded RSNA increased with eating and grooming, as well-established in the literature. Furthermore, RSNA was validated by ganglionic blockade and modulation of blood pressure with pharmacological agents. Herein, an effective and manageable method for clear recording of RSNA in conscious, freely-moving mice is described.

Anesthetized mice exhibit non-physiological systemic blood pressure, which precludes meaningful assessment of autonomic tone given the intimate relationship between blood pressure and the autonomic nervous system. Thus, a novel method to simultaneously record renal sympathetic nerve activity and blood pressure with intravenous infusion in conscious mice is outlined.

בגישה חדשנית עבור הקלטה בו זמנית של פעילות העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי, בהכרה, עכברים ערככם.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Subcutaneous Trigeminal Nerve Field Stimulation for Refractory Facial Pain

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. Neuromodulation techniques for chronic facial pain include deep brain stimulation and motor cortex stimulation, which are complex to perform. Subcutaneous nerve field stimulation is certified for chronic back pain and is the least invasive form of neuromodulation. We applied this technique to treat chronic and neuropathic trigeminal pain as an individual therapy concept. First, trial stimulation is performed. Subcutaneous leads are placed in the painful trigeminal dermatome under local anesthesia. The leads are connected to an external neurostimulator that applies constant stimulation. Patients undergo a 12 day outpatient trial to assess the effect of the stimulation. Electrodes are removed after the trial. If the patient reports pain reduction of at least 50% in intensity and/or attack frequency, a reduction in medication or increase in quality of life, permanent implantation is scheduled. New electrodes are implanted under general anesthesia and are subcutaneously tunneled to an infraclavicular internal pulse generator. Patients are able to turn stimulation on and off and to increase or decrease the stimulation amplitude as needed.
This technique represents a minimal invasive alternative to other more invasive means of neuromodulation for trigeminal pain such as motor cortex stimulation or deep brain stimulation.

Treating chronic or neuropathic facial pain can be challenging when medical or standard treatment fails. Subcutaneous nerve field stimulation is the least invasive form of neuromodulation and is used for chronic back pain. We applied this technology to treat chronic and neuropathic trigeminal facial pain.

תת עורית גידולי שדה העצבים עבור כאב פנים עקשן

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have been established by tamoxifen induced deletion of Ccm genes in postnatal animals. These mouse models provide invaluable tools to investigate molecular mechanism and therapeutic approaches for CCM disease. An accurate and quantitative method to assess lesion burden and progression is essential to harness the full value of these animal models. Here, we demonstrate the induction of CCM disease in a mouse model and the use of the contrast enhanced X-ray micro computed tomography (micro-CT) method to measure CCM lesion burden in mouse brains. At postnatal day 1 (P1), we used 4-hydroxytamoxifen (4HT) to activate Cre recombinase activity from the Cdh5-CreErt2 transgene to cleave the floxed allele of Ccm2. CCM lesions in mouse brains were analyzed at P8. For micro-CT, iodine based Lugol&#39;s solution was used to enhance contrast in brain tissue. We have optimized the scan parameters and utilized a voxel dimension of 9.5 &#181;m, which lead to a minimum feature size of approximately 25 &#181;m. This resolution is sufficient to measure CCM lesion volume and number globally and accurately, and provide high-quality 3-D mapping of CCM lesions in mouse brains. This method enhances the value of the established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for CCM and other cerebrovascular diseases.

This protocol demonstrates the induction of cerebral cavernous malformation disease in a mouse model and uses contrast enhanced micro computed tomography to measure lesion burden. This method enhances the value of established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for cerebral cavernous malformation and other cerebrovascular diseases.

אינדוקציה והדמיה מיקרו-CT של המוח מומים חלול במודל עכבר

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Vagus Nerve Stimulation As an Adjunctive Neurostimulation Tool in Treatment-resistant Depression

Vagus nerve stimulation (VNS) is an approved neurostimulation therapy. The purpose of the method is to treat patients with therapy-resistant depression (TRD). VNS exhibits antidepressive and stabilizing effects. This method is particularly useful as a long-term treatment, in which up to two-thirds of patients respond. The vagus nerve stimulator is positioned on the left vagus nerve during a surgical procedure and is activated telemetrically by a wand connected to a handheld computerized device. The treating physician can perform various adjustments of the vagus nerve stimulator during in-office visits (e.g., by modifying stimulation intensity or stimulation frequency) to achieve maximum therapeutic effects with low side effects. Set-up of the device usually takes several months. Typical side effects include wound infection, temporary salivation, coughing, paralysis of the vocal cords, bradycardia, or even asystole. The patient can stop the VNS by placing a magnet over the generator. The current protocol describes delivery of the specific stimulation tool and methods for adjusting the tuning parameters to achieve the best remission rates in patients with TRD.

Vagus nerve stimulation (VNS) has been shown to be effective as an adjunct treatment for treatment-resistant depression (TRD). VNS leads to antidepressive and antisuicidal effects and quality of life improvements. This protocol offers a step-by-step guide to managing and adjusting a vagus nerve stimulator for efficient treatment of TRD.

קוצב וגאלי ככלי בגירוי ניהולה עמיד לטיפול בדיכאון

Vagus nerve stimulation (VNS) is an approved neurostimulation therapy. The purpose of the method is to treat patients with therapy-resistant depression ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

ההקלטה סימולטני אלקטרוקרדיוגרם ודם פולשנית בלחץ מדידה בחולדות

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Updated Technique for Reliable, Easy, and Tolerated Transcranial Electrical Stimulation Including Transcranial Direct Current Stimulation

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a noninvasive method of neuromodulation using low-intensity direct electrical currents. This method of brain stimulation presents several potential advantages compared to other techniques, as it is noninvasive, cost-effective, broadly deployable, and well-tolerated provided proper equipment and protocols are administered. Even though tDCS is apparently simple to perform, correct administration of the tDCS session, especially the electrode positioning and preparation, is vital for ensuring reproducibility and tolerability. The electrode positioning and preparation steps are traditionally also the most time consuming and error-prone. To address these challenges, modern tDCS techniques, using fixed-position headgear and pre-assembled sponge electrodes, reduce complexity and setup time while also ensuring that the electrodes are consistently placed as intended. These modern tDCS methods present advantages for research, clinic, and remote-supervised (at home) settings. This article provides a comprehensive step-by-step guide for administering a tDCS session using fixed-position headgear and pre-assembled sponge electrodes. This guide demonstrates tDCS using commonly applied montages intended for motor cortex and dorsolateral prefrontal cortex (DLPFC) stimulation. As described, selection of the head size and montage-specific headgear automates electrode positioning. Fully assembled pre-saturated snap-electrodes are simply affixed to the set position snap-connectors on the headgear. The modern tDCS method is shown to reduce setup time and reduce errors for both novice and expert operators. The methods outlined in this article can be adapted to different applications of tDCS as well as other forms of transcranial electrical stimulation (tES) such as transcranial alternating current stimulation (tACS) and transcranial random noise stimulation (tRNS). However, since tES is application specific, as appropriate, any methods recipe is customized to accommodate subject, indication, environment, and outcome specific features.

When administering transcranial direct current stimulation (tDCS), reproducible electrode preparation and placement are vital for a tolerated and effective session. The purpose of this article is to demonstrate updated modern setup procedures for the administration of tDCS and related transcranial electrical stimulation techniques, such as transcranial alternating current stimulation (tACS).

טכניקה מעודכנת עבור אמין, קל, ונסבל גירוי חשמלי Transcranial כולל Transcranial גירוי נוכחי ישיר

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a noninvasive method of neuromodulation using low-intensity direct electrical currents. This method of ...