פרוטוקול זה מספק קווים מנחים שלב אחר שלב לנתיב גישה הניתן לשחזור לאזורי עניין בגזע המוח הקאודלי ובחוט הצוואר העליון. טכניקה זו מגבירה את הדיוק בעת אספקת נפחי הזרקה קטנים לאזורי עניין מוגבלים בגזע המוח הקאודלי ובחוט הצוואר העליון. טכניקה זו הייתה וניתן ליישם על מודלים אחרים של בעלי חיים.
ד"ר ורוניק ונדרהורסט, פרופסור לנוירולוגיה והחוקרת הראשית של מעבדת ואנדרהורסט, תדגים את ההליך הזה. ודא שזרימת החמצן מופנית לחרוט האף. הזיזו את העכבר למסגרת הסטריאוטקסית והניחו את האף בחרוט אף גמיש.
מקם את העכבר במסגרת הסטריאוטקסית באמצעות סרגלי אוזניים בלבד. מניחים חומר סיכה על העיניים. Anteroflex את ראש העכבר לזווית של 90 מעלות על ידי הנחיה ידנית של האף.
כדי לאבטח מיקום זה, הניחו מחסום פלסטיק בין עמודי מוט האוזן של מתאם העכבר במקביל לעמודים כאשר החלק השטוח של הגולגולת משמש כהפניה. מניחים את כרית החימום מתחת לעכבר ומוודאים שהצוואר ושאר הגוף ממוקמים במקביל לשולחן על ידי הגבהת הגוף עם קופסה קטנה. מניחים וילון מתחת לגוף.
הזריקו מנה אחת של ארבעה מיליגרם לקילוגרם לקילוגרם Meloxicam בשחרור איטי תת עורית בנפח של שני מיקרוליטרים לגרם של משקל הגוף. נקו את אתר החתך הניתוחי תחילה עם כרית הכנה של 70% אלכוהול, אחר כך עם כרית הכנה של בטאין, ואז שוב עם כרית הכנה לאלכוהול ותנו לו להתייבש. יש לחטא את הידיים ולשים כפפות סטריליות, ולאחר מכן להניח וילון באתר הניתוח.
ודא שהעכבר מורדם כראוי על ידי צביטה של הבהונות או בדיקת רפלקס הקרנית. הפחיתו את האיזופלורן כדי לשמור על הרמות של 2.0. בצע חתך של סנטימטר אחד עד 1.2 ס"מ עם להב כירורגי של 10 מקצה העצם העורפית לכיוון הכתפיים בתנועה חלקה אחת.
בזהירות לבצע חתך בקו האמצע של שריר הטרפז, וחושף את שרירי הלוגוס קפיטיס הזוגיים. מניחים את שני הווים החוזרים בין שרירי הלוגוס קאפיטיס הזוגיים, אחד מכוון שמאלה והשני ימינה. השתמש במלקחיים הלמינקטומיים הבוטים כדי להפריד בין הבטן השמאלית והימנית של שריר הלוגוס קפיטיס הזוגי, החל מהאוקסיפוט שבו קו האמצע נראה בקלות.
הנחה את המלקחיים הבוטים על פני עצם האוקסיפוט בקו האמצע עד למקום שבו הוא פוגש את הדורה מאטר הציסטרינלית ואז המשך על פני הדורה מאטר אל האטלס. מקם מחדש את הנסיגים והתאים את המתח על ידי מיקום מחדש של ההמוסטאטים. השתמש במלקחיים למינכטומיה קהה כדי להפריד את השרירים עוד יותר בקו האמצע כדי לקבל תצוגה טובה של גזע המוח והמוח הקטן.
חזור על ההליך הנ"ל לפי הצורך עד שהמוח הקטן וגזע המוח יופיעו מתחת לדורה. באמצעות מלקחיים למינכטומיה קהים, נקו את הדורה מהחוטים הקטנים של רקמת החיבור על ידי הזזת המלקחיים מקו האמצע בכיוון רוחבי עד שתהיה תצוגה ברורה של גזע המוח, תוך יצירת מרחב רוחבי יותר. צפו במשטח הגבי של גזע המוח עם ציוני דרך מפורטים דרך הדורה הפתוחה.
השתמש במלקחיים הזוויתיים כדי לתפוס את הדורה המשתרעת מהעצם העורפית ועד האטלס, ולאחר מכן השתמש במספריים הקפיץ כדי ליצור פתח קטן של כ-0.5 עד 1.5 מילימטרים בדורה. לאחר פתיחת הדורה, יש לנקז עודפי נוזל מוחי עם קצה Q סטרילי. האובקס, הנקודה שבה התעלה המרכזית נפתחת לחדר הרביעי, היא נקודת האפס הקדמית-אחורית והמדיולטרלית הסטנדרטית.
מקם את הפיפטה או המזרק למטרה באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית. הורידו את הזרוע של הגב אל המשטח הגבי שנוצר מנקודת האפס הגבית. לאחר מכן הורידו את הפיפטה לגזע המוח והזריקו את התמיסה.
השאירו את המחט במקומה למשך דקה עד חמש דקות לאחר ההזרקה כדי להימנע ממסלול מחט בעת שימוש בנפחים שבין שלושה ל-50 ננו-ליטרים. לאחר מכן הרימו את הפיפטה או המזרק באמצעות הזרוע הסטריאוטקסית וחזור על כך עבור מטרות מרובות. הסר את הווים בזהירות משדה הניתוח.
שרירי הלוגוס קאפיטיס הזוגיים ייפלו בחזרה לתנוחה נייטרלית המכסה באופן מלא את הציסטרנה מגנה. אין לסגור את שריר הטרפז ואת דורה מאטר בקו האמצע מכיוון שהם שבירים מכדי להחזיק תפרים. סגור את העור עם 3 תפרים ניילון או פוליפרופילן.
גישת cisterna magna מאפשרת למקד את גזע המוח הקאודלי ואת המבנים של חוטי הצוואר העליונים שקשה להגיע אליהם בדרך אחרת באמצעות גישות סטריאוטקסיות סטנדרטיות או שהם מועדים למיקוד לא עקבי. בעכברים, מבנים כגון הגרעין ההיפוגלוסלי, קבוצת הנשימה הגחונית והיווצרות רשתית סמוכה בגזע המוח הקאודלי הותקפו באופן שגרתי באמצעות גישת cisterna magna כפי שהודגם כאן עבור הגרעין ההיפוגלוסלי והמדולה הגחונית. על מנת לקבוע את הדיוק של גישת הציסטרנה מגנה לעומת הגישה הסטנדרטית, נמדד המרחק בין אתרי המטרה המיועדים והממשיים במישורים האנטרופוסטריים, הבינוניים והדורסו-ונטרליים לאזורי הגחון והגב.
התוצאות מראות טעויות קטנות משמעותית במישורים האנטרופוסטריים, הבינוניים והדורסו-וונטרליים בהשוואה לגישה הסטנדרטית, מה שמדגיש את הדיוק המשופר של גישת cisterna magna עבור מטרות אלה. כאשר מנסים פרוטוקול זה, חשוב לוודא כי anteroflexion של הראש ואת הגובה של הגוף מבוצעת כמתואר. לאחר מכן, חשוב לזהות ציוני דרך מרכזיים לפני מניפולציה של השריר או הדורה מאטר.
אם ציוני דרך אלה לא יוכרו או אם הם אבדו, יהיה מאתגר להישאר מכוונים ולבצע את ההליך כמתוכנן. טכניקה זו סייעה להתמודד עם שאלות מושגיות הקשורות לארגון האנטומי התפקודי בתוך גזע המוח הקאודל וחבל הצוואר העליון.
