הערכה של סמן ביולוגי אמין במודל של אלח דם של אלח דם של אלח דם הנגרם על-ידי נקב

המטרה העיקרית של מחקר זה היא להשתמש במודל עכבר של קשירת cecal ואלח דם המושרה לנקב כדי להעריך סמן ביולוגי אמין בדם של אלח דם. קשירת Cecal ונקב, או CLP בקיצור, הוא מודל רלוונטי מבחינה קלינית של אלח דם. CLP הוא מודל נפוץ במחקר אלח דם.

היסטון H3, או CitH3, מקורו ב- NETosis המושרה על ידי אלח דם. המחקר הקודם שלנו מדגים כי CitH3 הוא סמן ביולוגי אבחוני אמין של אלח דם. בחר עכברי C57BL/6 זכרים.

לשקול את העכבר, ולהרדים את העכבר על ידי שאיפה של 1.5% isoflurane. הנח את העכבר על כרית חימום. יש למרוח קרם דפילציה על הבטן ולהשאיר לא יותר מדקה אחת לפני הסרת הקרם והשיער.

הכינו כלי ניתוח סטריליים המתאימים לניתוח בעלי חיים מכרסמים. לחטא את עור הבטן עם יוד לפחות שלוש פעמים. יש לכסות את אזור הניתוח הניתוחי בעזרת וילונות כירורגיים סטריליים מתאימים.

השתמש במספריים כירורגיים סטריליים כדי לבצע חתך של כשני סנטימטרים בדופן הבטן, לאורך הלינאה אלבה. לזהות ולבודד את cecum מתוך חלל הצפק עם פינצטה סטרילית. ליגייט 75 נפח של cecum עם 4-0 תפר משי.

אין לנעוץ את כלי הדם המזנטריים. יש לציין, אחוז שונה של cecum ligated קובע את חומרת אלח דם. 25% מוביל לאלח דם בדרגה נמוכה, 50% מוביל לאלח דם בדרגה בינונית, ו-75% מוביל לאלח דם בדרגה גבוהה.

נקבו את הצקום על ידי ניקוב אחד דרך ודרך עם מחט 21 מד בנקודת האמצע שבין קצה הזנב לקשירה. סוחטים בעדינות את הצואה מתוך הצואה דרך חורי חדירה. יש לציין, כמות הצואה שנדחקה לתוך חלל הצפק צריכה להיות עקבית, שכן צואה קובעת גם את חומרת אלח דם.

החלף את הצקום כמו גם צואה לתוך חלל הבטן בעדינות. סגור את שכבת שרירי הבטן ואת שכבת העור עם 6-0 תפר משי. יש לחטא את החתך ביוד.

הזרקה של ketoprofen, חמישה מיליגרם לקילוגרם, צריך להתבצע על הרביע השמאלי התחתון של הבטן, כדי למנוע את cecum. הניחו את העכבר על כרית חימום עד להתאוששות מלאה. העכבר שוכן בחדר עם בקרת טמפרטורה ומקבל גישה חופשית למזון ולמים.

בעלי חיים יומתו על ידי מנת יתר של פחמן דו חמצני עם תסמינים של אלח דם, הרלוונטיים לנקודות הקצה המוגדרות מראש שלנו בהתבסס על המחקר שלנו שהוצג. עכברים מחולקים באופן אקראי לקבוצת ה-sham, לקבוצת CLP ולקבוצת הטיפול CLP בתוספת Cl-amidine או YW3-56. עכברים בקבוצת בושה מקבלים את כל הליכי CLP למעט קשירת cecum ונקב.

קצירת דם היקפי 24 שעות לאחר הניתוח והכנת סרום באמצעות צנטריפוגה. ריכוז CitH3 נקבע על ידי כתם מערבי וערכת ELISA שפותחה בעצמה. כפי שניתן לראות באיור 2, לא זוהה CitH3 בקבוצת ה-sham.

רמות CitH3 היו גבוהות לאחר החדרת CLP, אשר נחלש על ידי עיכוב PAD באופן משמעותי. בהתבסס על הנתונים שלנו, אנו מסיקים כי מחזור CitH3 הוא סמן ביולוגי אבחון אמין של אלח דם.