יצירת חולדות היפופאראתירואידיום באמצעות כריתת בלוטת התריס בסיוע פחמן ננו-חלקיקים

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא ליצור מודל חולדה של היפופאראתירואידיזם נרכש שקל לבסס, יציב באופיו ואינו מזיק לבלוטות התריס. היתרון העיקרי של מודל זה הוא הסרה מדויקת של בלוטות יותרת התריס בעזרת ננו-חלקיקי פחמן. אנו מקווים שהמודל יכול לעזור לפתור כמה שאלות בתחום היפופאראתירואידיזם.

לדוגמה, שימוש לפני הניתוח של סידן וויטמין D כדי להפחית את הסיכון של היפוקלצמיה לאחר בלוטת התריס. שיטה זו יכולה לספק תובנה כיצד תחלופת העצם מושפעת מאנלוגים של PTH וכיצד אנלוגים של PTH משפיעים על הגוף בשימוש ארוך טווח. מי שמבצע טכניקה זו בפעם הראשונה עשוי להתקשות לבצע מיקרו-מניפולציה תחת מיקרוסקופ סטריאו.

תרגול מסוים תחת מיקרוסקופ סטריאו עשוי להיות מועיל. כדי להתחיל, מניחים את החולדה המורדמת במצב שכיבה ומגלחים את הפרווה של אזור הצוואר הגחוני. לאחר ביצוע חתך כמתואר בכתב היד, יש לאתר את האונות של בלוטת התריס.

באמצעות מזרק 10 מיקרוליטר המצויד במחט משופעת של 30 מד, הזריקו מיקרוליטר אחד של תרחיף ננו-חלקיקי הפחמן לחלק המזיאלי של קרום בלוטת התריס. לאחר חמש דקות, השקו את האזור במי מלח כדי לנקות כל מתלה נוסף. ודא שבלוטות התריס הפכו שחורות והתבונן בבלוטת יותרת התריס שאינה מוכתמת.

חתכו את בלוטות יותרת התריס הלא מוכתמות באמצעות זוג מלקחיים ומספריים מיקרו-כירורגיים, ולאחר מכן סגרו את החתך בתפר מזרן אופקי קטוע. לאחר הניתוח, הניחו את החולדות על שמיכה חשמלית תרמוסטטית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי לשמור על חום גופם. לאחר שבעה ימים, לצייר 10 מיקרוליטר של דם באמצעות וריד הזנב.

מדדו את הסידן בסרום, הזרחן האנאורגני בסרום והורמון יותרת התריס בסרום באמצעות ערכות מסחריות. החולדות שעברו כריתת בלוטת התריס הציגו היפוקלצמיה יציבה והיפרפוספטמיה במשך תקופת תצפית של ארבעה שבועות. הורמון יותרת התריס בסרום לא זוהה בחולדות כריתת בלוטת התריס שבעה ימים לאחר הניתוח.

אוריאה בסרום וקריאטינין היו דומים בין קבוצות דמה וכריתת בלוטת התריס לאחר שבעה ימים לאחר הניתוח. ירידה ביוני סידן בשתן וברמות פוספט אנאורגני נצפתה שבועיים לאחר הניתוח. לא נצפו הבדלים משמעותיים במשקל הגוף בין קבוצות כריתת בלוטת התריס והדמה במשך 28 ימים.

הסרום C-telopeptide ירד באופן משמעותי בחולדות parathyroidectomy. לא היו הבדלים משמעותיים ברמות אוסטיאוקלצין בסרום. עם זאת, הזרקת תרחיף ננו-חלקיקים היא הדבר החשוב ביותר והזרקה מוצלחת היא קריטית לזיהוי והסרה נוכחית של בלוטות יותרת התריס.

שיטות אחרות כוללות ניתוח מונחה פלואורסצנטיות, הזרקת רעלן דיפטריה של עכברים טרנסגניים PTHcre-iDTR, וכריתת בלוטת התריס הסטרילית שיכולה לעזור לענות על שאלות בתחום בלוטת התריס.