Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) to Assay Dynamic Histone Modification in Activated Gene Expression in Human Cells

In response to a variety of extracellular ligands, the STAT (signal transducer and activator of transcription) transcription factors are rapidly recruited ...

University of Virginia

&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x9798;&#x6C28;&#x9187; 1-&#x78F7;&#x9178; (S1P) &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x809D;&#x53D7;&#x4F53;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;-1 &#xFF08;&#x673A; LRH-1&#xFF09; &#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; S1P &#x8BF1;&#x5BFC; mcf-7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7D20; E2 (PGE2) &#x673A; LRH-1 mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4F9B;&#x517B;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;S1P &#x548C; PGE2 &#x523A;&#x6FC0;&#x62DB;&#x8058;&#x673A; LRH-1 &#x8425;&#x53CD;&#x5E94;&#x5143;&#x4EF6;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (CREB)&#x3001; CCAAT/&#x589E;&#x5F3A;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (C/EBP) &#x548C; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; II (Pol II) &#x5230;&#x673A; LRH-1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x589E;&#x52A0;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 &#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x3002;S1P &#x548C; PGE2 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E92;&#x52A8;&#x7684; CREB &#x548C;&#x673A; LRH-1&#xFF0C;&#x5F3A;&#x5316;&#x7531; C/EBPdelta &#x548C;&#x5171; CREB &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (CBP) &#x548C;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x53D7;&#x4F53;&#x8F85;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;-3 (SRC-3&#xFF09;&#x3002;CREB &#x548C;&#x673A; LRH-1 &#x534F;&#x540C;&#x589E;&#x52A0;&#x673A; LRH-1 &#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x81EA;&#x8EAB;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A; LRH-1 &#x6697;&#x793A;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x9798;&#x6C28;&#x9187; 1-&#x78F7;&#x9178;&#x8C03;&#x8282;&#x809D;&#x53D7;&#x4F53;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;-1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

In this study, we examined the role of sphingosine-1-phosphate (S1P) in regulating the transcription of the liver receptor homologue-1 (LRH-1) in breast cancer cells. We show that S1P induces LRH-1 mRNA expression in MCF-7 cells in a prostaglandin E2 (PGE2)-dependent manner. Both S1P and PGE2 stimulate the recruitment of LRH-1, cAMP response element binding protein (CREB), CCAAT/enhancer binding proteins (C/EBP), and RNA Polymerase II (Pol II) to the LRH-1 promoter, as well as increase acetylation of histone H3 in this region of chromatin. S1P and PGE2 promote the direct interaction of CREB and LRH-1, which is potentiated by C/EBPdelta and the coactivators CREB-binding protein (CBP), and steroid receptor coactivator-3 (SRC-3). CREB and LRH-1 synergistically increase LRH-1 transcription, suggesting an integral role for LRH-1 in regulating the transcription of its own gene.

Sphingosine-1-phosphate regulates the expression of the liver receptor homologue-1.

Dans cette &eacute;tude, nous avons examin&eacute; le r&ocirc;le de la sphingosine-1-phosphate (S1P) dans la r&eacute;gulation de la transcription du r&eacute;cepteur h&eacute;patique homologue-1 (LRH-1) dans les cellules canc&eacute;reuses du sein. Nous montrons que S1P induit LRH-1 ARNm dans les cellules MCF-7 une prostaglandine E2 (PGE2)-fa&ccedil;on d&eacute;pendante. S1P et la PGE2 stimulent le recrutement de LRH-1, cAMP response element binding protein (CREB), prot&eacute;ines de liaison de fef/enhancer (C/EBP) et l&#39;ARN polym&eacute;rase II (Pol II) au promoteur LRH-1, mais aussi augmenter l&#39;ac&eacute;tylation des histones H3 dans cette r&eacute;gion de la chromatine. S1P et PGE2 favorisent l&#39;interaction directe de CREB et LRH-1, qui est potentialis&eacute;e par C/EBPdelta les coactivateurs CREB-binding protein (CBP) et les r&eacute;cepteurs st&eacute;ro&iuml;des coactivateur-3 (SRC-3). CREB et LRH-1 augmentent en synergie LRH-1 transcription, sugg&eacute;rant un r&ocirc;le pour LRH-1 dans la r&eacute;gulation de la transcription de ses propres g&egrave;nes.

Sphingosine-1-phosphate r&eacute;gule l&#39;expression du r&eacute;cepteur du foie homologue-1.

In dieser Studie wurden die Rolle der Sphingosin-1-Phosphat (S1P) bei der Regulierung der Transkription der Leber Rezeptor Homolog-1 (LRH-1) in Brustkrebs-Zellen. Wir zeigen, dass S1P LRH-1 mRNA Ausdruck in MCF-7 Zellen in Prostaglandin E2 (PGE2) induziert-abh&auml;ngigen Weise. S1P und PGE2 stimulieren die Rekrutierung von LRH-1, cAMP Response Element verbindliches Protein (CREB), CCAAT / / Enhancer-Binding-Proteine (C/EBP) und der RNS-Polymerase II (Pol II) an den Projekttr&auml;ger LRH-1 sowie Acetylierung der Histone H3 in dieser Region des Chromatins zu erh&ouml;hen. S1P und PGE2 f&ouml;rdern die direkte Interaktion von CREB und LRH-1, die von C/EBPdelta Coactivators CREB-verbindliches Protein (CBP) und der Steroid-Rezeptor Coaktivator-3 (SRC-3) potenzierte ist. CREB erh&ouml;hen LRH-1 und synergistisch LRH-1 Transkription, schl&auml;gt eine integrale Rolle f&uuml;r LRH-1 bei der Regulierung der Transkription des eigenen Gens.

Sphingosin-1-Phosphat reguliert den Ausdruck der Leber Rezeptor Homolog-1.

In questo studio, abbiamo esaminato il ruolo della sfingosina-1-fosfato (S1P) nella regolazione della trascrizione del recettore epatico omologo-1 (LRH-1) in cellule di cancro al seno. Mostriamo che S1P induce espressione del mRNA LRH-1 nelle cellule MCF-7 in una prostaglandina E2 (PGE2)-modo dipendente. Sia S1P e PGE2 stimolano il reclutamento di LRH-1, cAMP response element binding protein (CREB), sequenza/enhancer binding proteins (C/EBP) e RNA polimerasi II (Pol II) al promotore LRH-1, cos&igrave; come aumenta l&#39;acetilazione dell&#39;istone H3 in questa regione di cromatina. S1P e PGE2 promuovere l&#39;interazione diretta di CREB e LRH-1, che viene potenziato C/EBPdelta e la trascrizione CREB-binding protein (CBP) e steroidi recettore coactivator-3 (SRC-3). CREB e LRH-1 sinergicamente aumentare la trascrizione di LRH-1, suggerendo un ruolo integrale per LRH-1 nella regolazione della trascrizione del relativo proprio gene.

Sfingosina-1-fosfato regola l&#39;espressione del recettore epatico omologo-1.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3001;&#x809D;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;-1 (LRH-1&#xFF09; &#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30B7;&#x30F3; 1 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178; &#xFF08;&#x8178;&#x7BA1;) &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x8178;&#x7BA1; mcf-7 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30F3; E2 (PGE2) &#x306E; LRH 1 mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;-&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8178;&#x7BA1;&#x3068; PGE2 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x52DF;&#x96C6; LRH 1 &#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x8981;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (CREB)&#x3001;CCAAT/&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (C/EBP) &#x3068; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; II &#xFF08;&#x30DD;&#x30EB; II&#xFF09; LRH 1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; H3 &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8178;&#x7BA1;&#x3068; PGE2 CREB &#x3068; C/EBPdelta &#x3068;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; CREB &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (CBP) &#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;-3 (SRC-3) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3057;&#x305F; LRH-1 &#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684; CREB &#x3068; LRH 1 LRH 1 &#x8EE2;&#x5199; LRH-1 &#x306E;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B4;&#x30B7;&#x30F3; 1 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x809D;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0; 1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC04; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; homologue-1 (LRH-1) &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; sphingosine-1-&#xC778;&#xC0B0; (S1P) &#xC5ED;&#xD560; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC; S1P LRH 1 mRNA &#xC2DD; MCF 7 &#xC140; &#xC2A4;&#xD0C0; &#xAE00;&#xB780; &#xB518; E2 (PGE2) &#xC720;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;-&#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C;. S1p&#xACFC; PGE2 &#xC790;&#xADF9; &#xCC44;&#xC6A9; LRH 1&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CREB), CCAAT/&#xC99D;&#xAC15; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (C/EBP) LRH 1 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; II (Pol II) &#xCEA0;&#xD504;&#xB85C; chromatin&#xC758;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; H3 &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4;&#xC758; acetylation &#xC99D;&#xAC00;. S1p&#xACFC; PGE2 CREB LRH-1, C/Ebpdelta&#xC640; coactivators CREB &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CBP) &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; coactivator-3 (SRC-3)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; potentiated&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;. CREB LRH 1 synergistically &#xC99D;&#xAC00; LRH 1 &#xC804;&#xC0AC; LRH-1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

Sphingosine-1-&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADDC;&#xC81C; &#xAC04; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; homologue 1 &#xC2DD;.

En este estudio, se examin&oacute; el papel de la esfingosina-1-fosfato (S1P) en la regulaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n del h&iacute;gado del receptor hom&oacute;logo-1 (LRH-1) en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama. Mostramos que S1P induce la expresi&oacute;n del mRNA de LRH-1 en c&eacute;lulas MCF-7 en una prostaglandina E2 (PGE2)-manera dependiente. Tanto S1P y PGE2 estimulan la contrataci&oacute;n de LRH-1, campo de la prote&iacute;na de uni&oacute;n del elemento de respuesta (CREB), prote&iacute;nas de uni&oacute;n a CCAAT/enhancer (C/EBP) y ARN polimerasa II (Pol II) al promotor LRH-1, como aumentar la acetilaci&oacute;n de la histona H3 en esta regi&oacute;n de la cromatina. S1P y PGE2 promueven la interacci&oacute;n directa de CREB y LRH-1, que se potencia por C/EBPdelta y la prote&iacute;na de uni&oacute;n al CREB de activaci&oacute;n (CBP), esteroide receptor coactivator-3 (fuente-3). CREB y LRH-1 sin&eacute;rgicamente aumentan LRH-1 transcripci&oacute;n, sugiriendo un papel integral para LRH-1 en la regulaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n de sus propios genes.

Esfingosina-1-fosfato regula la expresi&oacute;n del receptor hep&aacute;tico hom&oacute;logo-1.

&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (CRF BP) &#x901A;&#x7528;&#x62A5;&#x544A;&#x683C;&#x5F0F;&#x548C;&#x5C3F;&#x76AE; 1 &#xFF08;Ucn 1&#xFF09; &#x7ED1;&#x5B9A;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x9632;&#x6B62; CRF &#x53D7;&#x4F53; (CRFR) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x89C4;&#x8303;&#x901A;&#x7528;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x795E;&#x7ECF;&#x80BD;&#x4E0E;&#x53CA;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x9C9C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x77E5;&#x5173;&#x4E8E;&#x5141;&#x8BB8;&#x901A;&#x7528; BP picomolar &#x4EB2;&#x548C;&#x4E0E;&#x7ED1;&#x5B9A; CRF &#x548C; Ucn 1 &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C; 76 &#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684; CRF BP &#x5168;&#x9762;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x626B;&#x63CF;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5F71;&#x54CD; Ucn 1 &#x4E2A;&#x901A;&#x7528;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6B8B;&#x7559;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x80BD;&#x6D3E;&#x751F;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178; 56 CRF BP.&#x4E19;&#x6C28;&#x9178;&#x66FF;&#x6362; (R56A) &#x6709;&#x540C;&#x6837;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x5929;&#x95E8;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178; 62 (D62A) &#x51CF;&#x5C11;&#x4E3A;&#x901A;&#x7528;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x5927;&#x7EA6; 100 &#x500D;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x5F71;&#x54CD; Ucn 1 &#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x901A;&#x7528;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x51CF;&#x5C11;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178; 25 CRF &#x80BD;&#xFF0C;&#x66FF;&#x4EE3; Glu(25) &#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x5927;&#x7EA6; 2 &#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x5B58;&#x5728; Arg(56) &#x548C; Asp(62) &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x901A;&#x7528; BP &#x901A;&#x7528; BP &#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; CRF-BP(R56A) &#x548C; CRF-BP(D62A) &#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x6291;&#x5236; CRFR1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B; HEK293T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x901A;&#x7528;&#x62A5;&#x544A;&#x683C;&#x5F0F;&#x53CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x548C;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x5782;&#x4F53;&#x524D;&#x53F6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x901A;&#x7528; BP &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4FDD;&#x7559;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6291;&#x5236;&#x8BF1;&#x5BFC; Ucn 1 CRFR1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BC1;&#x660E;&#x901A;&#x7528; BP &#x901A;&#x7528;&#x62A5;&#x544A;&#x683C;&#x5F0F;&#x548C; Ucn 1&#xFF0C;&#x5F00;&#x8F9F;&#x65B0;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x901A;&#x7528; BP &#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x5177;&#x6709;&#x72EC;&#x7279;&#x548C;&#x53EF;&#x5206;&#x79BB;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x66F2;&#x9762;&#x3002;

&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x5730;&#x53D6;&#x6D88;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x901A;&#x7528;&#x62A5;&#x544A;&#x683C;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5230;&#x5C3F; 1 &#x76AE;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (CRF BP&#xFF09;&#x3002;

Corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) binds CRF and urocortin 1 (Ucn 1) with high affinity, thus preventing CRF receptor (CRFR) activation. Despite recent progress on the molecular details that govern interactions between CRF family neuropeptides and their cognate receptors, little is known concerning the mechanisms that allow CRF-BP to bind CRF and Ucn 1 with picomolar affinity. We conducted a comprehensive alanine scan of 76 evolutionarily conserved residues of CRF-BP and identified several residues that differentially affected the affinity for CRF over Ucn 1. We determined that both neuropeptides derive their similarly high affinity from distinct binding surfaces on CRF-BP. Alanine substitutions of arginine 56 (R56A) and aspartic acid 62 (D62A) reduce the affinity for CRF by approximately 100-fold, while only marginally affecting the affinity for Ucn 1. The selective reduction in affinity for CRF depends on glutamic acid 25 in the CRF peptide, as substitution of Glu(25) reduces the affinity for CRF-BP by approximately 2 orders of magnitude, but only in the presence of both Arg(56) and Asp(62) in human CRF-BP. We show that CRF-BP(R56A) and CRF-BP(D62A) have lost the ability to inhibit CRFR1-mediated responses to CRF that activate luciferase induction in HEK293T cells and ACTH release from cultured rat anterior pituitary cells. In contrast, both CRF-BP mutants retain the ability to inhibit Ucn 1-induced CRFR1 activation. Collectively our findings demonstrate that CRF-BP has distinct and separable binding surfaces for CRF and Ucn 1, opening new avenues for the design of ligand-specific antagonists based on CRF-BP.

Residues of corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) that selectively abrogate binding to CRF but not to urocortin 1.

Corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) lie CRF et urocortine 1 (Ucn 1) avec une affinit&eacute; &eacute;lev&eacute;e, ainsi l&#39;activation des r&eacute;cepteurs (CRFR) pr&eacute;vention du CRF. Malgr&eacute; des progr&egrave;s r&eacute;cents sur les d&eacute;tails mol&eacute;culaires qui r&eacute;gissent les interactions entre les CRF famille neuropeptides et de leurs r&eacute;cepteurs apparent&eacute;s, on sait peu sur les m&eacute;canismes qui permettent aux CRF-BP lier les CRF et Ucn 1 avec affinit&eacute; picomoles. Nous avons effectu&eacute; un scan complet alanine de 76 r&eacute;sidus &eacute;volutivement conserv&eacute;s du CRF-BP et identifi&eacute; plusieurs r&eacute;sidus qui affect&eacute;es diff&eacute;remment l&#39;affinit&eacute; pour CRF sur 1 CUN. Nous avons d&eacute;termin&eacute; que les deux neuropeptides d&eacute;rivent leur affinit&eacute; &eacute;lev&eacute;e des surfaces de liaison distincte sur les substitutions de CRF-BP. Alanine d&#39;arginine 56 (R56A) et l&#39;acide aspartique 62 (D62A) r&eacute;duire l&#39;affinit&eacute; pour CRF par environ 100 fois, tout en touchant l&eacute;g&egrave;rement l&#39;affinit&eacute; pour l&#39;Ucn 1. La r&eacute;duction s&eacute;lective en affinit&eacute; pour CRF d&eacute;pend de l&#39;acide glutamique 25 du peptide de la CRF, comme substitution de Glu(25) r&eacute;duit l&#39;affinit&eacute; pour le CRF-BP environ 2 ordres de grandeur, mais seulement en pr&eacute;sence de Arg(56) et Asp(62) en humain CRF-BP. Nous montrons que CRF-BP(R56A) et CRF-BP(D62A) ont perdu la capacit&eacute; d&#39;inhiber les r&eacute;ponses v&eacute;hicul&eacute;es par les CRFR1 au Tr&eacute;sor qui activent l&#39;induction de la lucif&eacute;rase dans les cellules HEK293T et ACTH lib&egrave;rent des cellules ant&eacute;hypophysaires cultiv&eacute;es de rats. En revanche, les deux mutants CRF-BP conservent la capacit&eacute; d&#39;inhiber l&#39;activation induite par l&#39;Ucn 1 CRFR1. Collectivement, nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que les CRF-BP a des surfaces de liaison distincte et s&eacute;parable pour CRF et 1 de l&#39;Ucn, ouvrant de nouvelles voies pour la conception des antagonistes de ligand sp&eacute;cifique bas&eacute; sur CRF-BP.

R&eacute;sidus de corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) abroger s&eacute;lectivement les liant &agrave; la CRF, mais pas &agrave; urocortine 1.

Corticotropin-Releasing-Factor-Binding-Protein (CRF-BP) bindet CRF und Urocortin 1 (Ucn 1) mit hoher Affinit&auml;t, somit verhindern CRF (CRFR)-Rezeptor-Aktivierung. Trotz der j&uuml;ngsten Fortschritte auf die molekularen Details, die Interaktionen zwischen CRF Familie Neuropeptide und ihre Verwandten Rezeptoren Regeln ist wenig bekannt &uuml;ber die Mechanismen, die CRF-BP CRF und Ucn 1 mit pikolomaren Affinit&auml;t binden zu erm&ouml;glichen. Wir einen umfassende Alanin-Scan 76 evolution&auml;r konservierte R&uuml;ckst&auml;nde des CRF-BP durchgef&uuml;hrt und identifiziert mehrere R&uuml;ckst&auml;nde, die die Affinit&auml;t f&uuml;r CRF differentiell &uuml;ber Ucn 1 betroffen. Wir festgestellt, dass die beiden Neuropeptide leiten ihre &auml;hnlich hohen Affinit&auml;t von unterschiedlichen Bindung Oberfl&auml;chen auf CRF-BP. Alanin Substitution von Arginin 56 (R56A) und Asparagins&auml;ure 62 (D62A) reduzieren die Affinit&auml;t f&uuml;r CRF von ca. 100-fold und nur geringf&uuml;gig beeinflussen die Affinit&auml;t f&uuml;r Ucn-1. Die selektive Reduktion in einer Affinit&auml;t f&uuml;r CRF h&auml;ngt von Glutamins&auml;ure 25 in der CRF-Peptid, wie Substitution von Glu(25) die Affinit&auml;t f&uuml;r CRF-BP um etwa 2 Gr&ouml;&szlig;enordnungen, aber nur in Anwesenheit von Arg(56) und Asp(62) im menschlichen CRF-BP verringert. Wir zeigen, dass CRF-BP(R56A) und CRF-BP(D62A) wurden CRFR1-vermittelte Reaktionen auf CRF hemmen, die Luciferase-Induktion in HEK293T Zellen aktivieren und ACTH-Pressemitteilung vom kultivierten Ratte anterior Hypophyse Zellen. Im Gegensatz dazu behalten beide CRF-BP-Mutanten CRFR1 Ucn 1-induzierte Aktivierung zu hemmen. Gemeinsam zeigen unsere Ergebnisse, dass CRF-BP unterscheidbar und trennbarer Bindung Oberfl&auml;chen f&uuml;r CRF und Ucn 1, &ouml;ffnen neue Wege f&uuml;r die Gestaltung der Ligand-spezifische Antagonisten basierend auf CRF-BP hat.

R&uuml;ckst&auml;nde des Corticotropin Releasing Factor-verbindliches Protein (CRF-BP), die selektive Bindung CRF aber nicht Urocortin 1 aufhebt.

Corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) associa CRF e urocortin 1 (Ucn 1) con alta affinit&agrave;, cos&igrave; impedendo attivazione recettore (CRFR) di CRF. Nonostante i recenti progressi sui dettagli molecolari che regolano le interazioni tra famiglia neuropeptidi CRF e loro recettori affine, poco &egrave; noto riguardo i meccanismi che permettono di CRF-BP associare CRF e Ucn 1 con affinit&agrave; picomolar. Abbiamo condotto una scansione completa dell&#39;alanina di 76 evolutionarily conserved residui di CRF-BP e identificati diversi residui che differenzialmente colpite l&#39;affinit&agrave; per CRF sopra 1 Ucn. Abbiamo determinato che entrambe neuropeptidi derivano loro similmente ad alta affinit&agrave; da superfici decisamenete distinti su sostituzioni di alanina CRF-BP di arginina 56 (R56A) e l&#39;acido aspartico 62 (D62A) ridurre l&#39;affinit&agrave; per CRF da circa 100 volte, mentre che interessano solo marginalmente l&#39;affinit&agrave; per l&#39;Ucn 1. La riduzione selettiva affinit&agrave; per CRF dipende dall&#39;acido glutammico 25 in peptide CRF, come sostituzione di Glu(25) riduce l&#39;affinit&agrave; per CRF-BP circa 2 ordini di grandezza, ma solo in presenza di entrambi Arg(56) e Asp(62) in umano CRF-BP. Mostriamo che CRF-BP(R56A) e CRF-BP(D62A) hanno perso la capacit&agrave; di inibire risposte CRFR1-mediato di CRF che attivano induzione luciferase HEK293T cellule e ACTH rilascio dalle cellule dell&#39;ipofisi anteriore ratto colta. In contrasto, entrambi mutanti CRF-BP mantengono la capacit&agrave; di inibire l&#39;attivazione indotta da Ucn 1 CRFR1. Collettivamente i nostri risultati dimostrano che CRF-BP ha superfici decisamenete distinti e separabili per CRF e 1 Ucn, aprendo nuove vie per il design degli antagonisti del ligando specifico basato su CRF-BP.

Residui di corticotropin releasing factor-binding protein (CRF-BP) che selettivamente abrogare associazione CRF ma non urocortin 1.

&#x526F;&#x814E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x523A;&#x6FC0;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (CRF BP) CRF &#x3068; urocortin 1 (Ucn 1) &#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x9632;&#x6B62;&#x306E; CRF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (CRFR) &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CRF &#x5BB6;&#x65CF;&#x795E;&#x7D4C;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x5C55;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x5C11;&#x3057; CRF BP CRF &#x3068; Ucn 1 picomolar &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;CRF BP &#x306E; 76 &#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x7570;&#x7684; CRF &#x306E;&#x89AA;&#x548C; Ucn 1 &#x4EE5;&#x4E0A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027; &#xFF08;R56A&#xFF09; CRF &#x8DEA;&#x304F;&#x30A2;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x7F6E;&#x63DB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; 56 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178; 62 (D62A) &#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; CRF &#x306E;&#x7D04; 100 &#x500D; Ucn 1 &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x4E2D;&#x3068;&#x5224;&#x65AD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CRF BP &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D04; 2 &#x6841;&#x306E;&#x5E74;&#x304C; Arg(56) &#x3068; Asp(62) &#x4EBA;&#x9593; CRF BP &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067; Glu(25) &#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3088;&#x3046;&#x9078;&#x629E;&#x9084;&#x5143; CRF &#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178; 25 CRF &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CRF-BP(R56A) &#x3068; CRF-BP(D62A) hek293t &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B; CRFR1 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5FDC;&#x7B54; CRF &#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;ACTH &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x57F9;&#x990A;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x524D;&#x65B9; pituitary &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; CRF BP &#x5909;&#x7570; Ucn 1 &#x8A98;&#x8D77; CRFR1 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;CRF BP CRF &#x3068; Ucn 1&#x3001;CRF-BP &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7279;&#x7570;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9053;&#x3092;&#x958B;&#x304F;&#x305F;&#x3081;&#x306F;&#x3063;&#x304D;&#x308A;&#x3068;&#x5206;&#x96E2;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; CRF &#x304C; urocortin 1 &#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x7834;&#x68C4;&#x3059;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x526F;&#x814E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x523A;&#x6FC0;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (CRF BP) &#x306E;&#x3002;

Corticotropin &#xBC29;&#xCD9C; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CRF BP) &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBC29;&#xC9C0; CRF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (CRFR) &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; CRF &#xACE0; urocortin 1 (Ucn 1)&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC9C4;&#xD589; CRF &#xAC00;&#xC871; neuropeptides&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC871; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xC138;&#xBD80; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC57D;&#xAC04; CRF-&#xD608;&#xC555;, CRF&#xC640; Ucn 1 picomolar &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CRF BP&#xC758; 76 &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xCC28;&#xB3D9; Ucn 1 CRF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; neuropeptides (R56A) &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; 56&#xC758; CRF bp. &#xC54C;&#xB77C;&#xB2CC; &#xB300;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xD30C;&#xC0DD; aspartic &#xC0B0; 62 (D62A) &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; CRF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC57D; &#xC57D;, &#xB2E8; marginally Ucn 1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xACB0;&#xC815;. Glu(25)&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xC57D; 2 &#xBC30;&#xB098;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; arg(56)&#xC640; Asp(62) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CRF bp&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB9CC; CRF &#xD608;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; CRF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xAC10;&#xC18C; CRF &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0D0;&#xC0B0; 25&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CRF-BP(R56A) &#xBC0F; CRF-BP(D62A) HEK293T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; CRF &#xC751;&#xB2F5; CRFR1 &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC783; &#xC5C8; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC950; &#xC55E;&#xCABD; &#xB1CC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ACTH&#xB97C; &#xD480;&#xC5B4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xB450; CRF BP &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Ucn 1 &#xC720;&#xB3C4; CRFR1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; CRF BP CRF&#xC640; Ucn 1, &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xBCC4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; CRF &#xD608;&#xC555;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC124;&#xACC4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBC29;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACE0;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xB9AC;&#xD560; &#xC218; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; urocortin 1 &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; CRF&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD30C;&#xAE30; &#xD558;&#xB294; corticotropin &#xBC29;&#xCD9C; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CRF BP)&#xC758; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;.

Prote&iacute;na de uni&oacute;n a factor de liberaci&oacute;n de corticotropina (CRF-BP) une a CRF y Urocortina 1 (Ucn 1) con alta afinidad, as&iacute; previniendo activaci&oacute;n de receptores (CRFR) CRF. A pesar de los recientes avances en los detalles moleculares que gobiernan las interacciones entre CRF familia neurop&eacute;ptidos y sus receptores cognados, poco se conoce sobre los mecanismos que permiten CRF-BP enlazar CRF y Ucn 1 con afinidad picomolar. Se llev&oacute; a cabo una exploraci&oacute;n completa de la alanina de 76 residuos evolutivamente conservados de CRF-BP y se identificaron varios residuos que afect&oacute; diferencialmente la afinidad para CRF sobre la 1 de la Ucn. Se determin&oacute; que ambos neurop&eacute;ptidos derivan su semejantemente alta afinidad de las superficies de Uni&oacute;n distintas en sustituciones de CRF-BP. alanina de arginina 56 (R56A) y &aacute;cido asp&aacute;rtico 62 (D62A) reducen la afinidad para CRF por aproximadamente cien veces, mientras s&oacute;lo marginalmente, que afectan a la afinidad por la Ucn 1. La reducci&oacute;n selectiva en afinidad por CRF depende de &aacute;cido glut&aacute;mico 25 en el p&eacute;ptido de la FCI, como sustituci&oacute;n de Glu(25) reduce la afinidad para CRF-BP por aproximadamente 2 &oacute;rdenes de magnitud, pero s&oacute;lo en presencia de tanto Arg(56) y Asp(62) en humano CRF-BP. Demostramos que CRF-BP(R56A) y CRF-BP(D62A) han perdido la capacidad de inhibir respuestas mediadas por CRFR1 a CRF que activan la inducci&oacute;n de la luciferasa en las c&eacute;lulas HEK293T y ACTH liberarse de las c&eacute;lulas pituitaria anterior cultivadas de rata. Por el contrario, ambos mutantes de CRF-BP conservan la capacidad de inhibir la activaci&oacute;n inducida por Ucn 1 CRFR1. Colectivamente, nuestros resultados demuestran que la CRF-BP tiene superficies distintas y separables para CRF y 1 de la Ucn, abriendo nuevos caminos para el dise&ntilde;o de los antagonistas de ligando espec&iacute;fico basado en CRF-BP.

Residuos de la prote&iacute;na de uni&oacute;n a factor de liberaci&oacute;n de corticotropina (CRF-BP) selectivamente derogar vinculante CRF pero no Urocortina 1.

&#x60A3;&#x8005;&#x670D;&#x7528;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D27;&#x5F20;&#x7D20;&#x8F6C;&#x6362;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x795E;&#x7ECF;&#x6027;&#x6C34;&#x80BF;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x5728;&#x7F8E;&#x56FD;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x662F;&#x5426;&#x5728;&#x8FD1;&#x51E0;&#x5E74;&#x6765;&#x56FD;&#x5BB6;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x795E;&#x7ECF;&#x6027;&#x6C34;&#x80BF;&#x4F4F;&#x9662;&#x3002;

&#x63D0;&#x9AD8;&#x4F4F;&#x9662;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7531;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x795E;&#x7ECF;&#x6027;&#x6C34;&#x80BF;&#x5728;&#x7F8E;&#x56FD;&#x3002;

Angioedema may occur in patients taking angiotensin-converting enzyme inhibitors. With the more prevalent use of this class of medications in the United States, it is not known whether angioedema hospitalizations have increased nationally in recent years.

Increasing hospitalizations due to angioedema in the United States.

Angio-&oelig;d&egrave;me peut survenir chez les patients prenant des inhibiteurs de l&#39;enzyme conversion de l&#39;angiotensine. Avec l&#39;utilisation plus r&eacute;pandue de cette classe de m&eacute;dicaments aux &Eacute;tats-Unis, on ne sait pas si angio-&oelig;d&egrave;me hospitalisations ont augment&eacute; &agrave; l&#39;&eacute;chelle nationale au cours des derni&egrave;res ann&eacute;es.

Augmentation des hospitalisations dues &agrave; des angio-&oelig;d&egrave;me aux &Eacute;tats-Unis.

Angio&ouml;dem kann bei Patienten unter Angiotensin converting Enzym-Hemmern auftreten. Mit der h&auml;ufiger Nutzung dieser Klasse von Medikamenten in den Vereinigten Staaten ist nicht bekannt, ob Angio&ouml;dem Hospitalisierungen auf nationaler Ebene in den letzten Jahren zugenommen haben.

Erh&ouml;hung der Hospitalisierungen wegen Angio&ouml;dem in den Vereinigten Staaten.

L&#39;angioedema pu&ograve; verificarsi in pazienti che assumono gli inibitori enzima di conversione dell&#39;angiotensina. Con l&#39;uso pi&ugrave; diffuso di questa classe di farmaci negli Stati Uniti, non &egrave; noto se l&#39;angioedema ricoveri sono aumentati a livello nazionale negli ultimi anni.

Aumento ricoveri a causa di angioedema negli Stati Uniti.

&#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x6D6E;&#x816B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x5909;&#x63DB;&#x9175;&#x7D20;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x53D6;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x30A2;&#x30E1;&#x30EA;&#x30AB;&#x306E;&#x85AC;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6D41;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x6D6E;&#x816B;&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x304C;&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x5168;&#x56FD;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5165;&#x9662;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x6D6E;&#x816B;&#x3001;&#x7C73;&#x56FD;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

Angioedema angiotensin &#xBCC0;&#xD658; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC800; &#xD574;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC758;&#xC774; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xAC00; &#xB354; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; angioedema &#xC785;&#xC6D0;&#xC744; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xC804;&#xAD6D;&#xC801;&#xC73C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC5EC;&#xBD80; &#xAC83;&#xC740; &#xBAA8;&#xB978;&#xB2E4;.

&#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xAD6D;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; angioedema &#xC785;&#xC6D0; &#xC99D;&#xAC00;.

Angioedema puede ocurrir en pacientes que toman inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina. Con el uso m&aacute;s frecuente de esta clase de medicamentos en los Estados Unidos, no se sabe si el angioedema hospitalizaciones han aumentado a nivel nacional en los &uacute;ltimos a&ntilde;os.

Aumento de ingresos por angioedema en los Estados Unidos.

&#x80CC;&#x666F;&#xFF1A; &#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x4E16;&#x754C;&#x82E5;&#x5E72;&#x5730;&#x533A;&#x636E;&#x62A5;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x4E0D;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5728;&#x7F8E;&#x56FD;&#x3002;

&#x5728;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21; 2 &#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x589E;&#x52A0;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x4F4F;&#x9662;&#xFF1A; &#x7EBD;&#x7EA6;&#x5DDE;&#xFF0C;1990&#x5E74;-2006&#x5E74;&#x3002;

Background: Although an increase in the occurrence of anaphylaxis has been reported in several parts of the world, this phenomenon has not been described in the United States.

Increasing anaphylaxis hospitalizations in the first 2 decades of life: New York State, 1990 -2006.

Rappel : Bien qu&#39;une augmentation des cas d&#39;anaphylaxie a &eacute;t&eacute; signal&eacute;e dans plusieurs r&eacute;gions du monde, ce ph&eacute;nom&egrave;ne n&#39;a pas &eacute;t&eacute; d&eacute;crite aux Etats-Unis.

Augmentation des hospitalisations de l&#39;anaphylaxie dans les 2 premi&egrave;res d&eacute;cennies de la vie : l&#39;&eacute;tat de New York, 1990-2006.

Hintergrund: Obwohl das Vorkommen von Anaphylaxie Zunahme in mehreren Teilen der Welt gemeldet wurde, wurde dieses Ph&auml;nomen nicht in den Vereinigten Staaten beschrieben.

Erh&ouml;hung der Anaphylaxie Hospitalisierungen in den ersten 2 Jahrzehnten des Lebens: Staat New York, 1990-2006.

Sfondo: Anche se &egrave; stato segnalato un aumento dell&#39;insorgenza di anafilassi in diverse parti del mondo, questo fenomeno non &egrave; stata descritta negli Stati Uniti.

Ricoveri di anafilassi in aumento nei primi decenni di vita 2: stato di New York, 1990-2006.

&#x80CC;&#x666F;: &#x30A2;&#x30CA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x4E16;&#x754C;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306F;&#x30A2;&#x30E1;&#x30EA;&#x30AB;&#x5408;&#x8846;&#x56FD;&#x3067;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30A2;&#x30CA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30FC;&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x751F;&#x6D3B;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E; 2 &#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;: &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E8;&#x30FC;&#x30AF;&#x5DDE;&#x3001;1990&#x5E74; -2006&#x5E74;&#x3002;

&#xBC30;&#xACBD;: &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC138;&#xACC4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1; &#xD558;&#xC9C0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xBBF8;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C;.

&#xC0DD;&#xD65C;&#xC758; &#xCCAB; 2 &#xB144;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xC785;&#xC6D0; &#xC99D;&#xAC00;: &#xB274;&#xC695; &#xC8FC;, 1990-2006.

Fondo: Aunque un aumento en la ocurrencia de la anafilaxia se ha divulgado en varias partes del mundo, este fen&oacute;meno no se ha descrito en los Estados Unidos.

Aumento de hospitalizaciones de anafilaxia en las primeras 2 d&eacute;cadas de la vida: estado de Nueva York, 1990-2006.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8BD5;&#x56FE;&#x754C;&#x5B9A;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x3001; &#x5BF9;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x526F;&#x4F5C;&#x7528; &#xFF08;&#x8884;&#xFF09; &#x6709;&#x5173;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x80BA;&#x708E;&#x4F4F;&#x9662;&#x75C5;&#x4EBA;&#x5728;&#x7F8E;&#x56FD;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;

&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5BF9;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x6CBB;&#x7597;&#x80BA;&#x708E;&#x7684;&#x4F4F;&#x9662;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x4E0D;&#x5229;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

This study sought to define the incidence, economic impact, and nature of adverse drug effects (ADEs) related to antibiotics in pneumonia hospitalizations in the US.

Incidence and impact of adverse effects to antibiotics in hospitalized adults with pneumonia.

Cette &eacute;tude visait &agrave; d&eacute;finir l&#39;incidence, l&#39;impact &eacute;conomique et la nature des effets d&#39;effets ind&eacute;sirables des m&eacute;dicaments (EIM) associ&eacute;s aux antibiotiques hospitalisations de pneumonie dans les Etats-Unis.

Incidence et l&#39;impact des effets ind&eacute;sirables aux antibiotiques chez les adultes hospitalis&eacute;s avec une pneumonie.

Diese Studie versucht, H&auml;ufigkeit, wirtschaftlicher Bedeutung und Art der unerw&uuml;nschten Effekte (ADEs) mit Bezug zu Antibiotika bei Lungenentz&uuml;ndung Hospitalisierungen in den USA zu definieren.

H&auml;ufigkeit und Auswirkungen der Nebenwirkungen Antibiotika bei hospitalisierten Erwachsenen mit Lungenentz&uuml;ndung.

Questo studio ha cercato di definire l&#39;incidenza, l&#39;impatto economico e la natura degli effetti indesiderati (ADEs) correlati agli antibiotici in ricoveri di polmonite negli Stati Uniti.

Incidenza e l&#39;impatto di effetti avversi agli antibiotici negli adulti ospedalizzati con polmonite.

&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x3001;&#x7D4C;&#x6E08;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x306B;&#x80BA;&#x708E;&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x3067;&#x3001;&#x7C73;&#x56FD;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x7269;&#x6709;&#x5BB3;&#x52B9;&#x679C; (Ade) &#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x307E;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x3068;&#x80BA;&#x708E;&#x3067;&#x5165;&#x9662;&#x4E2D;&#x306E;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;, &#xACBD;&#xC81C; &#xC601;&#xD5A5; &#xBC0F; &#xC790;&#xC5F0;&#xC758; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xC57D; &#xD6A8;&#xACFC; (ADEs) &#xBBF8;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3D0; &#xB834; &#xC785;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xBC1C;&#xBCD1; &#xB960;&#xACFC; &#xD3D0; &#xB834;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785;&#xC6D0; &#xC131;&#xC778; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;.

Este estudio intent&oacute; definir la incidencia, impacto econ&oacute;mico y naturaleza de los efectos adversas (ADEs) relacionados con antibi&oacute;ticos en hospitalizaciones de neumon&iacute;a en los Estados Unidos.

Incidencia y el impacto de los efectos adversos a los antibi&oacute;ticos en adultos hospitalizados con neumon&iacute;a.

JAK STAT &#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;trimethylation &#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 79 &#xFF08;H3K79me3&#xFF09; &#x5728; H3 &#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5728; 5&#39; &#x7AEF;&#x7684; STAT1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 1 (IRF1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; DOT1L&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x4FEE;&#x6539; Lys-79&#xFF0C;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x7684;&#x975E;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x57DF;&#x8DE8; IRF1 &#x5728;&#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540C;&#x56FD;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x62DB;&#x52DF;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;DOT1L &#x4ECB;&#x5BFC; RNAi &#x67AF;&#x7AED;&#x9632;&#x6B62; H3K79me3 &#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5E76;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; IRF1 2 &#x6298;&#x9875;&#xFF0C;&#x5982;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x90A3;&#x6837;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;STAT1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176; DNA &#x8BC6;&#x522B;&#x5143;&#x7D20; IRF1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9644;&#x8FD1; 2 &#x6298;&#x9875;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; DOT1L &#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4E2D;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x82AF;&#x7247;&#x63ED;&#x793A; DOT1L STAT1 &#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x57DF;&#x6620;&#x5C04;&#x6807;&#x8BC6; DOT1L &#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A; (&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; 580-1183 &#x673A;&#x573A;) &#x4F5C;&#x4E3A; STAT1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x57DF;&#x3002;DOT1L STAT1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x8868;&#x8FBE;&#x538B;&#x6291; IRF1 &#x8F6C;&#x5F55; (2 &#x500D;) &#x548C;&#x5E72;&#x6270; STAT1 DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5728; IRF1 &#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; DOT1L &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A; STAT1 DOT1L &#x4EA4;&#x4E92;&#x6240;&#x9700;&#x7684; JAK STAT &#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x3002;

&#x7AEF;&#x7C92;&#x6C89;&#x9ED8; 1 &#x6837; (DOT1L) &#x4E92;&#x52A8;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7834;&#x788E;&#x662F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50; 1 (STAT1)-&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

JAK-STAT-activated gene expression is both rapid and transient and requires dynamic post-translational modification of the chromatin template. Previously, we showed that following IFN-Î³ treatment, trimethylation of histone H3 at lysine 79 (H3K79me3) is rapidly and highly induced in the 5'-end of the STAT1-dependent gene interferon regulatory factor 1 (IRF1), but the role of this histone modification was unexplored. Here we report that DOT1L, the non-SET domain containing methyltransferase that modifies Lys-79, is localized across IRF1 in the uninduced state and is not further recruited by IFN-Î³ induction. RNAi-mediated depletion of DOT1L prevents the induction of H3K79me3 and lowers the transcription of IRF1 2-fold, as expected. Surprisingly, STAT1 binding to its DNA recognition element near the IRF1 promoter is diminished 2-fold in the DOT1L-depleted cell line. In vivo and in vitro protein interaction assays reveal a DOT1L-STAT1 interaction. Domain mapping identifies the middle region of DOT1L (amino acids 580-1183) as the STAT1 interaction domain. Overexpression of the DOT1L STAT1 interaction domain represses IRF1 transcription (2-fold) and interferes with STAT1 DNA binding at IRF1 and endogenous DOT1L histone methyltransferase activity. Collectively, our findings reveal a novel STAT1-DOT1L interaction that is required for the regulation JAK-STAT-inducible gene expression.

A novel disrupter of telomere silencing 1-like (DOT1L) interaction is required for signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1)-activated gene expression.

L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne JAK-STAT-actif est &#xE0; la fois rapide et transitoire et n&#xE9;cessite dynamique modification post-traductionnelle de la matrice chromatine. Auparavant, nous avons montr&#xE9; qu&#x26;#39;&#xE0; la suite de l&#x26;#39;IFN-&#x3B3; traitement, trim&#xE9;thylation de l&#x26;#39;histone H3 lysine &#xE0; 79 (H3K79me3) est rapidement et fortement induite dans l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 5&#x26;#39;-du facteur STAT1-d&#xE9;pendante interf&#xE9;ron g&#xE8;ne r&#xE9;gulateur 1 (IRF1), mais le r&#xF4;le de cette modification des histones a &#xE9;t&#xE9; explor&#xE9;. Nous rapportons ici que DOT1L, le domaine non-SET contenant m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase qui modifie Lys-79, est localis&#xE9; dans IRF1 dans l&#x26;#39;&#xE9;tat non induit et n&#x26;#39;est pas encore recrut&#xE9; par l&#x26;#39;IFN-&#x3B3; par induction. ARNi &#xE0; m&#xE9;diation &#xE9;puisement des DOT1L emp&#xEA;che l&#x26;#39;induction de H3K79me3 et abaisse la transcription de IRF1 2 fois, comme pr&#xE9;vu. &#xC9;tonnamment, STAT1 se liant &#xE0; son &#xE9;l&#xE9;ment de reconnaissance d&#x26;#39;ADN &#xE0; proximit&#xE9; du promoteur IRF1 est diminu&#xE9;e de 2 fois dans la lign&#xE9;e cellulaire DOT1L appauvri. In vivo et in vitro d&#x26;#39;interactions prot&#xE9;iques r&#xE9;v&#xE8;lent une interaction DOT1L-STAT1. Cartographie de domaine identifie la r&#xE9;gion m&#xE9;diane de DOT1L (acides amin&#xE9;s 580-1183) que le domaine d&#x26;#39;interaction STAT1. La surexpression du domaine STAT1 interaction DOT1L r&#xE9;prime la transcription IRF1 (2 fois) et interf&#xE8;re avec STAT1 liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN au IRF1 et endog&#xE8;nes DOT1L activit&#xE9; histone m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase. Collectivement, nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent un roman STAT1-DOT1L interaction qui est requise pour l&#x26;#39;expression la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes JAK-STAT-inductible.

Un Disrupter Roman de Silencing des t&#xE9;lom&#xE8;res 1-like (DOT1L) d&#x26;#39;interaction est n&#xE9;cessaire pour transducteur de signal et activateur de la transcription 1 (STAT1) activ&#xE9; par l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique

JAK-STAT-aktiviert Genexpression ist sowohl schnelle als auch transiente und erfordert POSTTRANSLATIONELLE Dynamisierung der Chromatin-Vorlage. Zuvor haben wir gezeigt, dass folgende IFN-&gamma;-Behandlung, Trimethylation von Histon, die H3 an Lysin 79 (H3K79me3) schnell und hoch in die 5&#39;-Ende der STAT1-abh&auml;ngigen gen Interferon ordnungspolitischen Faktor 1 (IRF1), aber die Rolle dieser Histon-&Auml;nderung induziert wird war unerforscht. Hier berichten wir, dass DOT1L, die nicht-SET-Dom&auml;ne, die mit Methyltransferase, die Lys-79, &auml;ndert in IRF1 im uninduced Zustand lokalisiert ist und ist nicht weiter von IFN-&gamma; Induktion eingestellt. RNAi-vermittelte Ersch&ouml;pfung der DOT1L verhindert die Induktion von H3K79me3 und senkt die Transkription von IRF1 2-fach, wie erwartet. &Uuml;berraschenderweise STAT1 Bindung mit seiner DNA-Anerkennung-Element in der N&auml;he der IRF1-Projekttr&auml;ger ist 2-fach vermindert in der DOT1L-abgereichertem Zelllinie. In-vivo und in vitro-Protein Interaktion Proben zeigen eine DOT1L-STAT1-Interaktion. Domain-Mapping identifiziert die mittlere Region des DOT1L (Aminos&auml;uren 580-1183) als STAT1 Interaktion Dom&auml;ne. Eine &Uuml;berexpression von der DOT1L STAT1-Interaktion-Dom&auml;ne IRF1 Transkription (2-fach) unterdr&uuml;ckt und STAT1 DNA-Bindung an IRF1 und endogene DOT1L-Histon-Methyltransferase-Aktivit&auml;t beeintr&auml;chtigt. Gemeinsam enth&uuml;llen unsere Erkenntnisse einen Roman STAT1-DOT1L-Interaktion, die f&uuml;r die Regulierung der JAK-STAT-inducible Genexpression erforderlich ist.

Eine neuartige Disruptor Telomer Schweigen zu 1-wie (DOT1L) Interaktion ist erforderlich f&uuml;r Signal-Wandler und Aktivator der Transkription 1 (STAT1)-Genexpression aktiviert.

Espressione del gene JAK-STAT-attivato &egrave; rapida e transitoria e richiede la modifica alberino-di traduzione dinamica del modello della cromatina. In precedenza, abbiamo dimostrato che il seguente trattamento IFN-&gamma;, trimethylation dell&#39;istone H3 a lisina 79 (H3K79me3) &egrave; rapida e altamente indotta in 5&#39;-fine del STAT1-dipendente gene interferone fattore regolatore 1 (IRF1), ma il ruolo di questa modifica dell&#39;istone &egrave; inesplorato. Qui riportiamo che DOT1L, il dominio non-SET contenente metiltransferasi che modifica Lys-79, &egrave; localizzata in tutta IRF1 nello stato uninduced e non &egrave; ulteriormente assunti dall&#39;induzione di IFN-&gamma;. Svuotamento RNAi-mediata del DOT1L impedisce l&#39;induzione di H3K79me3 e abbassa la trascrizione di IRF1 2 volte, come previsto. Sorprendentemente, associazione STAT1 al suo elemento di riconoscimento del DNA vicino al promotore IRF1 &egrave; diminuita 2 volte nella linea cellulare DOT1L-esaurito. Analisi di interazione proteina in vivo e in vitro rivelano un&#39;interazione DOT1L-STAT1. Mappatura del dominio identifica la regione centrale del DOT1L (aminoacidi 580-1183) come il dominio di interazione STAT1. Iperespressione del dominio di interazione DOT1L STAT1 reprime la trascrizione di IRF1 (2 volte) e interferisce con il legame del DNA STAT1 presso IRF1 ed endogeno DOT1L istone metiltransferasi attivit&agrave;. Collettivamente, i nostri risultati rivelano un romanzo STAT1-DOT1L interazione che &egrave; richiesto per il regolamento JAK-STAT-inducible gene expression.

Un romanzo distruttore dei telomeri silenziamento interazione (DOT1L) 1-come &egrave; richiesto per trasduttore di segnale e attivatore di trascrizione 1 (STAT1)-attivato l&#39;espressione genica.

JAK-STAT&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x3067;&#x3082;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;79&#x3067;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;IFN-&#x3B3;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#xFF08;H3K79me3&#xFF09;&#x306F;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;STAT1&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;IRF1&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;5&#x26;#39;-&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x3001;&#x672A;&#x8E0F;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DOT1L&#x3001;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;-79&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x975E;SET&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;IRF1&#x6E21;&#x3063;&#x3066;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;IFN-&#x3B3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DOT1L&#x306E;RNAi&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;H3K79me3&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;2&#x500D;&#x3001;&#x4E88;&#x60F3;&#x3069;&#x304A;&#x308A;IRF1&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;IRF1&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x4ED8;&#x8FD1;&#x306E;DNA&#x8A8D;&#x8B58;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;STAT1&#x306F;DOT1L&#x67AF;&#x6E07;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;2&#x500D;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;DOT1L-STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;DOT1L&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;580&#x304B;&#x3089;1183&#x307E;&#x3067;&#xFF09;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DOT1L STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;IRF1&#xFF08;2&#x500D;&#xFF09;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;STAT1 IRF1&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x5728;&#x6027;DOT1L&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x898F;&#x5236;JAK-STAT&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5C0F;&#x8AAC;STAT1-DOT1L&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;1&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#xFF08;DOT1L&#xFF09;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x652A;&#x4E71;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;STAT1&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

JAK &#xD569;&#xACC4; &#xD65C;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; chromatin &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF8; &#xADF8; &#xB2E4;&#xC74C; IFN-&gamma; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3 lysine 79 (H3K79me3)&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; STAT1 &#xC885;&#xC18D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 1 (IRF1)&#xC758; 5&#39;-&#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;&#xC774;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; trimethylation&#xC774; &#xD588;&#xB2E4; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; DOT1L, &#xC218;&#xC815; &#xB9AC;&#xC2A4;-79, methyltransferase&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBE44; &#xC9D1;&#xD569; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; IRF1 uninduced &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; IFN-&gamma; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Dot1l&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; RNAi &#xC911;&#xC7AC; h3k79me3&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC608;&#xC0C1; &#xB300;&#xB85C; 2-fold IRF1 &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB0AE;&#xCD98; &#xB2E4;. IRF1 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xADFC;&#xCC98;&#xC758; DNA &#xC778;&#xC2DD; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; STAT1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; 2-fold &#xAC10;&#xC18C; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, DOT1L &#xC18C;&#xC9C4; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; DOT1L STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. Dot1l&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB9E4;&#xD551; (&#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 580-1183) STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C;. Overexpression DOT1L STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; IRF1 &#xC804;&#xC0AC; (2-fold) &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xBC0F; STAT1 DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; irf1&#xC640; &#xC0DD; DOT1L &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC18C;&#xC124; JAK-&#xD569;&#xACC4;-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; STAT1 DOT1L &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

1 &#xD615; (DOT1L) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC785;&#xC744; telomere&#xC758; &#xC18C;&#xC124; disrupter&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; 1 (STAT1)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;-&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

JAK-STAT activado por la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica es a la vez r&#xE1;pido y transitorio y requiere din&#xE1;mico modificaci&#xF3;n post-traduccional de la plantilla de la cromatina. Anteriormente, hemos demostrado que el IFN-&#x3B3; despu&#xE9;s del tratamiento, trimethylation de la histona H3 en la lisina 79 (H3K79me3) es r&#xE1;pida y altamente inducida en el extremo 5 &#x26;#39;del gen STAT1-dependiente de interfer&#xF3;n factor regulador 1 (IRF1), pero el papel de la modificaci&#xF3;n de las histonas no hab&#xED;a sido explorado. Aqu&#xED; mostramos que DOT1L, el dominio no-SET contiene metiltransferasa que modifica Lys-79, se localiza en IRF1 en el estado no inducido y no est&#xE1; a&#xFA;n contratado por el IFN-&#x3B3; inducci&#xF3;n. RNAi mediada por el agotamiento de DOT1L impide la inducci&#xF3;n de H3K79me3 y disminuye la transcripci&#xF3;n de IRF1 2-pliegue, como se esperaba. Sorprendentemente, la uni&#xF3;n a su elemento de reconocimiento de ADN cerca del promotor IRF1 STAT1 se disminuye 2-pliegue en la l&#xED;nea celular DOT1L-agotado. En vivo y en ensayos in vitro de interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas muestran una interacci&#xF3;n DOT1L-STAT1. Cartograf&#xED;a de dominio identifica a la regi&#xF3;n media de DOT1L (amino&#xE1;cidos 580-1183) como el dominio de interacci&#xF3;n de STAT1. La sobreexpresi&#xF3;n del dominio de la interacci&#xF3;n DOT1L STAT1 reprime IRF1 transcripci&#xF3;n (2 veces) e interfiere con la uni&#xF3;n al ADN en STAT1 IRF1 y end&#xF3;genos DOT1L la actividad histona metiltransferasa. En conjunto, nuestros resultados ponen de manifiesto una novela STAT1-DOT1L interacci&#xF3;n que se requiere para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n del gen JAK-STAT-inducible.

Un interruptor de Novela de silenciar los tel&#xF3;meros 1-como (DOT1L) se requiere la interacci&#xF3;n de transductor de se&#xF1;al y activador de la transcripci&#xF3;n 1 (STAT1) activado por la Expresi&#xF3;n G&#xE9;nica

&#x2477; &#x978D;&#x9694;&#x8111;&#x819C;&#x5F71;&#x54CD;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8BF1;&#x751F; IRF1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728; pre mRNA &#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4FDD;&#x771F;&#x3002;

Knockdown of menin affects pre-mRNA processing and promoter fidelity at the interferon-gamma inducible IRF1 gene.

Knockdown de Menin affecte pr&#xE9;-ARNm de traitement et Fidelity promoteur &#xE0; l&#x26;#39;interf&#xE9;ron-gamma inductible IRF1 Gene

Niederschlag von Menin betrifft Pre-mRNA Processing und Projekttr&auml;ger Treue an das Interferon-Gamma durch Induktion IRF1 gen.

Atterramento di menin influisce sulla fedelt&agrave; di elaborazione e promotore pre-mRNA presso il gene IRF1 inducibile di interferone-gamma.

Menin&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&#x3B3;&#x8A98;&#x5C0E;IRF1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;pre-mRNA&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

Menin&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC0AC;&#xC804; mRNA &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; IRF1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Shaili Shah

Department of Biology

University of Virginia

Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) to Assay Dynamic Histone Modification in Activated Gene Expression in Human Cells

Shaili Shah

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University of Virginia

Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) to Assay Dynamic Histone Modification in Activated Gene Expression in Human Cells

Department of Biology