chromatin-immunoprecipitation-chip-to-assay-dynamic-histone

Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) to Assay Dynamic Histone Modification in Activated Gene Expression in Human Cells

In response to a variety of extracellular ligands, the STAT (signal transducer and activator of transcription) transcription factors are rapidly recruited ...

University of Virginia

STAT1 &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5206;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x5206;&#x914D;&#x4F46;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x57DF;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x7279;&#x70B9;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668; STAT1&#xFF0C;&#x7ED9;&#x6B63;&#x5E38; dna &#x7684;&#x7535;&#x6CF3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7387;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x63A2;&#x8BA8;&#xFF0C;&#x4F46;&#x672A;&#x80FD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x62A5;&#x544A;&#x6B64; STAT1(K544A/E545A) &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5438;&#x5F15;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5171;&#xFF0C;STAT1(K544A/E545A) &#x7A81;&#x53D8;&#x6709;&#x5FAE;&#x5999;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x6D3B;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x79EF;&#x7D2F;&#xFF1A; &#x7A81;&#x53D8;&#x5177;&#x6709;&#x53EF;&#x6BD4;&#x6027;&#x4E0E; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0; k(off) K(d)&#x3002;&#x4E0A;&#x7387;&#x548C;&#x901F;&#x7387;&#x7684; DNA &#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x5BFC;&#x81F4; STAT &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E0A;&#x7684; STAT1(K544A/E545A) &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5C45;&#x4F4F;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x5173;&#x95ED;&#x7387;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6548;&#x80FD;&#x4E3A; STAT1(N460A)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8D1F;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4EA7;&#x91CF;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x590D;&#x6742;&#x88C5;&#x914D;&#x6D89;&#x53CA;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; STAT1 &#x7387;&#x3002;

&#x4ECE; DNA &#x89E3;&#x79BB;&#x65F6;&#x95F4;&#x786E;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; STAT1 &#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;

The STAT1 transcription factor is organized into several highly conserved domains, each of which has been assigned a function with the exception of the linker domain. We previously characterized a mutant in the linker domain of STAT1 that gave normal DNA binding using a standard probe in an electrophoretic mobility assay but failed to activate transcription in response to interferon gamma. We now report the mechanistic basis for the inactivity of this STAT1(K544A/E545A) mutant. Rather than failing to attract transcriptional coactivators, the STAT1(K544A/E545A) mutant has a subtle biophysical defect, which prevents accumulation of the activated protein on chromatin in vivo: the mutant has comparable K(d) with greatly increased k(off) for DNA binding. The increase in both on-rate and off-rate of DNA binding results in a substantially reduced residence time of STAT1(K544A/E545A) on STAT binding sites. We find a similar correlation between off-rate and transcriptional potency for STAT1(N460A), which bears a mutation in the DNA binding domain. These results yield insight into the rate of complex assembly involving STAT1 that leads to transcriptional stimulation.

Dissociation time from DNA determines transcriptional function in a STAT1 linker mutant.

Le facteur de transcription STAT1 est organis&#xE9; en plusieurs domaines hautement conserv&#xE9;s, dont chacun a &#xE9;t&#xE9; attribu&#xE9;e une fonction &#xE0; l&#x26;#39;exception du domaine de liaison. Nous avons d&#xE9;j&#xE0; caract&#xE9;ris&#xE9; un mutant dans le domaine de liaison de STAT1 qui a donn&#xE9; liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN normal en utilisant une sonde standard dans un test de mobilit&#xE9; &#xE9;lectrophor&#xE9;tique, mais a &#xE9;chou&#xE9; &#xE0; activer la transcription en r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;interf&#xE9;ron gamma. D&#xE9;sormais, nous pr&#xE9;sentons la base m&#xE9;caniste &#xE0; l&#x26;#39;inactivit&#xE9; de cette STAT1 (K544A/E545A) mutant. Plut&#xF4;t que n&#x26;#39;attirent coactivateurs transcription, la STAT1 (K544A/E545A) mutante pr&#xE9;sente un d&#xE9;faut subtile biophysique, qui emp&#xEA;che l&#x26;#39;accumulation de la prot&#xE9;ine activ&#xE9;e sur la chromatine in vivo: le mutant a K comparables (d) avec beaucoup plus k (off) pour liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN. L&#x26;#39;augmentation &#xE0; la fois sur les taux et hors taux de r&#xE9;sultats liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN dans un temps de s&#xE9;jour r&#xE9;duit consid&#xE9;rablement de STAT1 (K544A/E545A) sur les sites de liaison STAT. Nous trouvons une corr&#xE9;lation similaire entre hors-taux et de la puissance de la transcription pour STAT1 (N460A), qui porte une mutation dans le domaine de liaison ADN. Ces r&#xE9;sultats donnent un aper&#xE7;u du rythme du montage complexe impliquant STAT1 qui m&#xE8;ne &#xE0; la stimulation de la transcription.

Temps de dissociation de l&#x26;#39;ADN d&#xE9;termine la fonction transcriptionnelle dans un mutant STAT1 Linker

Die Dissoziation von DNA Zeit bestimmt Transkriptions-Funktion in einem STAT1 Linker Mutante.

Il fattore di trascrizione STAT1 &egrave; organizzato in diversi domini altamente conservate, ognuno dei quali &egrave; stato assegnato una funzione ad eccezione del dominio linker. Abbiamo precedentemente caratterizzato un mutante del dominio linker di STAT1 che ha dato normale DNA binding utilizzando una sonda standard in un&#39;analisi di mobilit&agrave; elettroforetica, ma non &egrave; riuscito ad attivare la trascrizione in risposta alla gamma interferone. Riportiamo ora le basi meccanicistiche per l&#39;inattivit&agrave; di questa mutante STAT1(K544A/E545A). Piuttosto che non riuscendo ad attirare coattivatori trascrizionali, il mutante STAT1(K544A/E545A) ha un difetto di biofisico sottile, che impedisce l&#39;accumulo della proteina attivata su cromatina in vivo: il mutante ha K(d) comparabili con k(off) notevolmente aumentato per il grippaggio del DNA. L&#39;aumento sia sul tasso e off-rate di legame del DNA si traduce in un tempo di STAT1(K544A/E545A) su siti di legame STAT residenza sostanzialmente ridotto. Troviamo una simile correlazione tra potenza off-rate e trascrizionale per STAT1(N460A), che porta una mutazione nel dominio di legame del DNA. Questi risultati danno spaccato il tasso dell&#39;assembly complessi che coinvolgono STAT1 che porta alla stimolazione di transcriptional.

Tempo di dissociazione dal DNA determina la funzione trascrizionale in un mutante del linker STAT1.

STAT1&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x6B63;&#x5E38;DNA&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x3B3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;STAT1&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x3053;&#x306E;STAT1&#xFF08;K544A/E545A&#xFF09;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x57FA;&#x672C;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3080;&#x3057;&#x308D;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3001;STAT1&#xFF08;K544A/E545A&#xFF09;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;in vivo&#x3067;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x4E0A;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x9632;&#x304E;&#x3001;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;K&#xFF08;&#x30AA;&#x30D5;&#xFF09;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;K&#xFF08;D&#xFF09;&#x3092;&#x6301;&#x3064;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3002; STAT&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;STAT1&#x306E;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x6EDE;&#x7559;&#x6642;&#x9593;&#xFF08;K544A/E545A&#xFF09;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x4E0A;&#x306E;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x62C5;&#x3046;STAT1&#xFF08;N460A&#xFF09;&#x306E;&#x30AA;&#x30D5;&#x7387;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x80FD;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;STAT1&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

DNA&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x6642;&#x9593;&#x306F;STAT1&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

STAT1 &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC608;&#xC678; &#xD568;&#xC218; &#xD560;&#xB2F9; &#xB41C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xC900; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xC0C1; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xAC10;&#xB9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; stat1&#xC758; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08;&#xC774; STAT1(K544A/E545A) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. Transcriptional coactivators &#xC720;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC2E0; STAT1(K544A/E545A) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; chromatin in vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xACB0;&#xD568;: &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; k(off)&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; K(d). -&#xC18D;&#xB3C4; &#xBC0F; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD574;&#xC81C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB298;&#xB9AC;&#xBA74; &#xD569;&#xACC4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; STAT1(K544A/E545A)&#xC758; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xCCB4;&#xB958; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9FA;&#xB294; &#xB2E4; STAT1(N460A)&#xC758; &#xC624;&#xD504; &#xC18D;&#xB3C4; transcriptional &#xD798; &#xC0AC;&#xC774; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; transcriptional &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; stat1&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC744;.

DNA&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xAC04; STAT1 &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; transcriptional &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El factor de transcripci&#xF3;n STAT1 est&#xE1; organizado en varios dominios altamente conservados, cada uno de los cuales se ha asignado una funci&#xF3;n con la excepci&#xF3;n del dominio enlazador. Hemos caracterizado previamente un mutante en el dominio enlazador de STAT1 que dio uni&#xF3;n al ADN normal utilizando una sonda de nivel en un ensayo de movilidad electrofor&#xE9;tica, pero no para activar la transcripci&#xF3;n en respuesta a interfer&#xF3;n gamma. Ahora reportamos la base mec&#xE1;nica de la inactividad de este STAT1 (K544A/E545A) mutante. En lugar de dejar de atraer coactivadores transcripcionales, la STAT1 (K544A/E545A) mutante tiene un defecto sutil biof&#xED;sico, lo que impide la acumulaci&#xF3;n de la prote&#xED;na activada en la cromatina in vivo: el mutante tiene K comparables (d) con mucho mayor k (apagado) para de uni&#xF3;n al ADN. El aumento en tanto en velocidad y fuera de la tasa de los resultados de uni&#xF3;n al ADN en un tiempo de residencia reducido sustancialmente de STAT1 (K544A/E545A) en los sitios de uni&#xF3;n STAT. Encontramos una correlaci&#xF3;n similar entre fuera de ritmo y la potencia de la transcripci&#xF3;n de STAT1 (N460A), que lleva una mutaci&#xF3;n en el dominio de uni&#xF3;n al ADN. Estos resultados arrojar luz sobre el tipo de montaje complejo que involucra STAT1 que conduce a la estimulaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n.

Tiempo de disociaci&#xF3;n de ADN determina la funci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n en un mutante vinculador STAT1

&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684; mRNAs &#x5728; stat92E &#x8F68;&#x8FF9;&#x53CC;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6765;&#x81EA;&#x5148;&#x524D;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x5C06;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;DeltaNSTAT92E&#xFF0C;&#x7F3A;&#x5C11; N &#x7AEF;&#x7684;&#x7F16;&#x7801; 133 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x3002;&#x6297;&#x4F53;&#x68C0;&#x6D4B;&#x80DA;&#x80CE; (1-5 h)&#xFF0C;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5168;&#x957F;&#x548C;&#x622A;&#x65AD;&#x548C; mRNA &#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A; RT-PCR &#x53CD;&#x5E94;&#x7B26;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x5230;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; STATs N &#x603B;&#x7AD9;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x6709;&#x79EF;&#x6781;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86; DeltaNSTAT92E &#x65E9;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; RNAi &#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684; DeltaNSTAT92E &#x5230; STAT92E &#x6BD4;&#x7387;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x578B;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; STAT92E &#x6D3B;&#x52A8;&#x5236;&#x6B62;&#x517C;&#x5BB9;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; STAT92E &#x7684;&#x7F29;&#x5199;&#x5F62;&#x5F0F;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x4E0D;&#x65AD;&#x589E;&#x591A;&#x7684;&#x8D1F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

STAT92E &#x7531; N-&#x672B;&#x671F;&#x7684;&#x8D1F;&#x5411;&#x8C03;&#x63A7;&#x622A;&#x65AD; STAT &#x86CB;&#x767D;&#x66FF;&#x4EE3;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4ECE;&#x6D3E;&#x751F;&#x3002;

Previously unrecognized mRNAs originating from a dual promoter at the stat92E locus are described. One of these encodes a truncated protein, DeltaNSTAT92E, that lacks the N-terminal 133 amino acids. Antibodies detect both the full-length and truncated molecules early in embryogenesis (1-5 h), and mRNA detection by specific RT-PCR reactions accords with the protein distribution. Given that the N termini of mammalian STATs are known to have positive functions in transcriptional activation, we explored the role of DeltaNSTAT92E early in embryogenesis. By increasing the DeltaNSTAT92E-to-STAT92E ratio in overexpression and RNAi experiments, we observe phenotypes compatible with suppression of wild-type STAT92E activity. We therefore conclude that the short form of STAT92E is a naturally occurring dominant-negative product that can be added to the growing list of negative regulators of STAT activity.

Negative regulation of STAT92E by an N-terminally truncated STAT protein derived from an alternative promoter site.

ARNm non reconnues ant&#xE9;rieurement provenant d&#x26;#39;un double promoteur au niveau du locus stat92E sont d&#xE9;crits. Un de ces code pour une prot&#xE9;ine tronqu&#xE9;e, DeltaNSTAT92E, qui n&#x26;#39;a pas les 133 N-terminaux acides amin&#xE9;s. Anticorps d&#xE9;tecter &#xE0; la fois les mol&#xE9;cules de pleine longueur et tronqu&#xE9;e au d&#xE9;but de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se (1-5 h), et la d&#xE9;tection des ARNm par des accords sp&#xE9;cifiques r&#xE9;actions de RT-PCR avec la distribution des prot&#xE9;ines. &#xC9;tant donn&#xE9; que les extr&#xE9;mit&#xE9;s N de stats de mammif&#xE8;res sont connus pour avoir des fonctions positives dans l&#x26;#39;activation transcriptionnelle, nous avons explor&#xE9; le r&#xF4;le de DeltaNSTAT92E au d&#xE9;but de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se. En augmentant le rapport DeltaNSTAT92E-&#xE0;-STAT92E la surexpression et de RNAi exp&#xE9;riences, on observe des ph&#xE9;notypes compatibles avec la suppression de l&#x26;#39;activit&#xE9; STAT92E de type sauvage. Nous concluons donc que la forme courte de STAT92E est un ph&#xE9;nom&#xE8;ne naturel dominant n&#xE9;gatif produit qui peut &#xEA;tre ajout&#xE9; &#xE0; la liste croissante des r&#xE9;gulateurs n&#xE9;gatifs de l&#x26;#39;activit&#xE9; STAT.

La r&#xE9;gulation n&#xE9;gative de STAT92E par une prot&#xE9;ine STAT N-terminale tronqu&#xE9;e d&#xE9;riv&#xE9;e &#xE0; partir d&#x26;#39;un site promoteur alternatif

Negative Regulation der STAT92E durch einen N-terminal verk&#xFC;rzten STAT-Proteins von einem alternativen Ort Promotor abgeleitet ist.

In precedenza non riconosciuta mRNA proveniente da un promotore dual presso il locus stat92E &egrave; descritti. Uno di questi codifica per una proteina tronca, DeltaNSTAT92E, che manca del N-terminale 133 aminoacidi. Anticorpi rilevare entrambe le molecole full-length e troncate all&#39;inizio della embriogenesi (1-5 h) e rilevamento di mRNA da specifiche reazioni di RT-PCR si accorda con la distribuzione della proteina. Dato che i termini N dei mammiferi STATs sono noti per avere funzioni positive in attivazione trascrizionale, abbiamo esplorato il ruolo di DeltaNSTAT92E presto in embriogenesi. Aumentando il rapporto di DeltaNSTAT92E-a-STAT92E in esperimenti di RNAi e iperespressione, osserviamo fenotipi compatibile con soppressione dell&#39;attivit&agrave; STAT92E wild-type. Concludiamo quindi che la forma abbreviata di STAT92E &egrave; un natura prodotto dominante-negativo che pu&ograve; essere aggiunto alla lista crescente dei regolatori negativi della attivit&agrave; STAT.

Regolazione negativa di STAT92E da un N-terminale troncato STAT proteine derivate da un sito alternativo promotore.

stat92E&#x5EA7;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;mRNA&#x304C;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;133&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;DeltaNSTAT92E&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x3068;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#xFF08;1-5 h&#xFF09;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;RT-PCR&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5354;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x308B;mRNA&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;stats&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x304C;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;DeltaNSTAT92E&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;RNAi&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;DeltaNSTAT92E&#x5BFE;STAT92E&#x6BD4;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;STAT92E&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;STAT92E&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;STAT&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x5929;&#x7136;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x4EE3;&#x66FF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7531;&#x6765;&#x306E;N-&#x672B;&#x7AEF;&#x5207;&#x65AD;STAT&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;STAT92E&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; mRNAs stat92E &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD80;&#xC871; N &#xB9E8;&#xB05D; DeltaNSTAT92E &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; 133 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;. &#xD56D; &#xCCB4; embryogenesis (1-5 h) &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xC798;&#xB9B0; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; RT-PCR &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; mRNA &#xAC10;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC640; &#xD611;&#xC815;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD1B5;&#xACC4;&#xC758; N &#xD14C;&#xB974;&#xBBF8;&#xB2C8; transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; embryogenesis Deltanstat92e&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD0D0;&#xD5D8;. RNAi &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; overexpression DeltaNSTAT92E STAT92E &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xB298;&#xB824; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACE0;&#xAE30;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; STAT92E &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; &#xD638;&#xD658; &#xAD00;&#xCC30;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; stat92e&#xC758; &#xC57D;&#xC2DD;&#xC740; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xC81C;&#xD488; &#xD569;&#xACC4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBAA9;&#xB85D;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

N-&#xB9D0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; stat92e&#xC758; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC790;&#xB97C; &#xD569;&#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xCCB4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;.

Anteriormente ARNm no reconocidos procedentes de un promotor doble en el locus stat92E se describen. Una de ellas codifica una prote&#xED;na truncada, DeltaNSTAT92E, que carece de los N-terminales 133 amino&#xE1;cidos. Los anticuerpos detectan tanto las mol&#xE9;culas de larga duraci&#xF3;n y truncado a principios de la embriog&#xE9;nesis (1-5 h), y la detecci&#xF3;n de mRNA por RT-PCR espec&#xED;ficas de los acuerdos de las reacciones con la distribuci&#xF3;n de las prote&#xED;nas. Teniendo en cuenta que los extremos N de estad&#xED;sticas de mam&#xED;feros se sabe que tienen funciones positivas en la activaci&#xF3;n transcripcional, hemos explorado el papel de DeltaNSTAT92E temprano en la embriog&#xE9;nesis. Al aumentar la proporci&#xF3;n DeltaNSTAT92E a STAT92E en la sobreexpresi&#xF3;n y experimentos de RNAi, observamos fenotipos compatibles con supresi&#xF3;n de la actividad STAT92E de tipo salvaje. Por consiguiente, concluimos que la forma corta de STAT92E es una forma natural dominante negativo del producto que se puede agregar a la lista creciente de los reguladores negativos de la actividad STAT.

Regulaci&#xF3;n negativa de STAT92E por una prote&#xED;na STAT N-terminal truncado Derivado de un sitio promotor alternativo

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x548C;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16; STAT3 &#x4F9D;&#x8D56;&#xFF0C;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x8865;&#x5145; enhanceosome alpha2-&#x5DE8;&#x7403; (alpha2 M) &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7EED;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8FD9;&#x3002;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53; (GR) &#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x65E0; STAT3 enhanceosome &#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;enhanceosome &#x4E00;&#x5305;&#x542B; c &#x541B;/C-fos &#x548C;&#x534E;&#x4FA8;&#x57CE;-1&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20; (GR&#xFF0C;c &#x541B;&#x3001; &#x534E;&#x4FA8;&#x57CE; 1) &#x5177;&#x6709;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46; STAT3 &#x624D;&#x80FD;&#x770B;&#x5230;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;Enhanceosome GR &#x548C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; STAT3 &#x5360;&#x9886;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7531;&#x5927;&#x7EA6; 5-10 &#x5206;&#x949F;&#x5728;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; II (Pol II) &#x5230;&#x6765;&#x3002;Enhanceosome &#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x7EC4;&#x88C5;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5242;&#x5927;&#x7EA6; 90 &#x5206;&#x949F;&#x3002;&#x5F53;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-6 &#x548C;&#x654F;&#x6377;&#x88AB;&#x5220;&#x9664; &#xFF08;&#x4E4B;&#x540E;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597; 30 &#x5206;&#x949F;&#xFF09; &#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684; enhanceosome &#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x7684; 30 &#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x5931;&#x8E2A;&#x6307;&#x793A;&#x7EED;&#x671F;&#x7684; STAT3 &#x548C; GR &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5FC5;&#x987B;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; IL &#x7684;&#x7EE7;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;-6 + &#x654F;&#x6377;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x603B;&#x6838;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; STAT3 &#x80FD;&#x591F;&#x675F;&#x7F1A; DNA&#xFF0C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x76F8;&#x8FDE;&#x7684; STAT3 &#x6297;&#x62D2;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x56DE;&#x6536;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301; enhanceosome&#x3002;&#x65AD;&#x53E5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x80FD;&#x5B8C;&#x5168;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x5927;&#x7EA6; 30 &#x5206;&#x949F;&#x8FC7;&#x5883;&#x65F6;&#x95F4; Pol II &#x8DE8; alpha2-Mlocus &#x7684;&#x5B8C;&#x6574; enhanceosome &#x5360;&#x9886;&#x663E;&#x793A;&#x6EDE;&#x540E;&#x3002;

STAT3 &#x4F9D;&#x8D56; enhanceosome &#x7EC4;&#x88C5;&#x548C;&#x62C6;&#x5378;&#xFF1A; &#x4E0E; GR &#x5168;&#x8F6C;&#x5F55;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; &alpha; 2-&#x5DE8;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

We describe a detailed time course of the assembly and disassembly of a STAT3-dependent, glucocorticoid-supplemented enhanceosome for the alpha2-macroglobulin (alpha2-M) gene and compare this with a detailed time course of transcription of the gene by run-on analysis. The glucocorticoid receptor (GR) can associate with the enhanceosome without STAT3. Furthermore, the enhanceosome contains c-Jun/c-Fos and OCT-1 constitutively. All of these factors (GR, c-Jun, OCT-1) have transcription activation domains, but STAT3 is required for the observed transcriptional increase. The time course of enhanceosome occupation by GR and tyrosine-phosphorylated STAT3 shows that these transcription factors precede by approximately 5-10 min the arrival of RNA polymerase II (Pol II). The enhanceosome remains assembled for approximately 90 min in the continued presence of both inducers. When IL-6 and Dex are removed (after 30 min of treatment), the disappearance within an additional 30 min of the established enhanceosome indicates that renewal of STAT3 and GR binding must occur in the continued presence of IL-6+Dex. Compared with the total nuclear tyrosine-phosphorylated STAT3 capable of binding DNA, the chromatin-associated STAT3 resists dephosphorylation and appears to recycle to maintain the enhanceosome. Run-on transcription shows a lag after full enhanceosome occupation that can be largely but not completely explained by the approximately 30 min transit time of Pol II across the alpha2-Mlocus.

STAT3-dependent enhanceosome assembly and disassembly: synergy with GR for full transcriptional increase of the alpha 2-macroglobulin gene.

Nous d&#xE9;crivons un cours du temps d&#xE9;taill&#xE9; de l&#x26;#39;assemblage et le d&#xE9;montage d&#x26;#39;un STAT3-d&#xE9;pendante, les glucocortico&#xEF;des compl&#xE9;t&#xE9; enhanceosome pour la alpha2-macroglobuline (alpha2-M), le g&#xE8;ne et les comparer avec un cours du temps d&#xE9;taill&#xE9; de la transcription du g&#xE8;ne par le ruissellement sur l&#x26;#39;analyse . Le r&#xE9;cepteur des glucocortico&#xEF;des (GR) peut associer &#xE0; la enhanceosome sans STAT3. En outre, le enhanceosome contient c-Jun/c-Fos et PTOM-1 constitutivement. Tous ces facteurs (GR, c-Jun, l&#x26;#39;OCT-1) ont des domaines d&#x26;#39;activation de transcription, mais STAT3 est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;augmentation observ&#xE9;e de la transcription. Le cours du temps de l&#x26;#39;occupation enhanceosome par le GR et de la tyrosine-phosphoryl&#xE9;s STAT3 montre que ces facteurs de transcription pr&#xE9;c&#xE9;der min environ 5-10 l&#x26;#39;arriv&#xE9;e de l&#x26;#39;ARN polym&#xE9;rase II (Pol II). Le enhanceosome reste assembl&#xE9; pendant environ 90 min dans la pr&#xE9;sence continue de deux inducteurs. Lorsque l&#x26;#39;IL-6 et Dex sont retir&#xE9;s (apr&#xE8;s 30 min de traitement), la disparition dans un d&#xE9;lai suppl&#xE9;mentaire de 30 min de l&#x26;#39;enhanceosome &#xE9;tablie indique que le renouvellement de STAT3 et GR de liaison doit se produire dans la pr&#xE9;sence continue de l&#x26;#39;IL-6 + Dex. En comparaison avec le total des tyrosine-phosphoryl&#xE9;s nucl&#xE9;aires capables de STAT3 liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN, la chromatine du STAT3 associ&#xE9;e r&#xE9;siste d&#xE9;phosphorylation et appara&#xEE;t &#xE0; recycler pour maintenir la enhanceosome. Ex&#xE9;cutez-la transcription montre un d&#xE9;calage apr&#xE8;s l&#x26;#39;occupation enhanceosome complet qui peut &#xEA;tre en grande partie mais pas compl&#xE8;tement expliqu&#xE9; par le temps de transit d&#x26;#39;environ 30 min de Pol II &#xE0; travers le alpha2-Mlocus.

STAT3-d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e enhanceosome et d&#xE9;montage: Synergie avec GR Augmentation de la transcription compl&#xE8;te de l&#x26;#39;Alpha 2-macroglobuline Gene

STAT3-abh&#xE4;ngigen Enhanceosoms Auf-und Abbau: Synergie mit GR f&#xFC;r die volle transkriptionelle Erh&#xF6;hung der alpha 2-Makroglobulin-Gen.

Descriviamo un decorso dettagliato dell&#39;Assemblea e smontaggio di un dipendente di STAT3, enhanceosome glucocorticoide-integrato per il gene--alfa2-macroglobulina (alpha2-M) e confrontare questo con un corso a tempo dettagliate della trascrizione del gene di arresto analisi. Il recettore glucocorticoidi (GR) pu&ograve; essere associato il enhanceosome senza STAT3. Inoltre, il enhanceosome contiene c-Jun/c-Fos e OCT-1 costitutivamente. Tutti questi fattori (GR, c-Jun, OCT-1) hanno trascrizione attivazione domini, ma STAT3 &egrave; necessaria per l&#39;aumento di transcriptional osservato. Il corso di tempo dell&#39;occupazione enhanceosome GR e tirosina fosforilata STAT3 dimostra che questi fattori di trascrizione precedono di circa 5-10 min all&#39;arrivo della RNA polimerasi II (Pol II). Il enhanceosome rimane assemblato per circa 90 min nella presenza costante di due induttori. Quando IL-6 e Dex sono rimossi (dopo 30 min di trattamento), la scomparsa all&#39;interno di un ulteriore 30 min del enhanceosome stabilito indica che rinnovo dell&#39;associazione STAT3 e GR deve verificarsi nella continua presenza di IL-6++ Dex. Confrontato con il totale nucleare tirosina fosforilata STAT3 in grado di legare il DNA, la cromatina associata STAT3 resiste defosforilazione e appare a riciclare per mantenere il enhanceosome. Trascrizione frenato Mostra un ritardo dopo la enhanceosome piena occupazione che pu&ograve; essere in gran parte ma non completamente spiegato con il circa 30 min tempo di transito Pol II attraverso l&#39;alfa2-Mlocus.

STAT3-dipendente enhanceosome montaggio e smontaggio: sinergia con GR per aumento pieno trascrizionale del gene dell&#39;alfa--2-macroglobulina.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;STAT3&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3001;&#x3B1;2-&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;&#x3B1;2-M&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30BB;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x88DC;&#x5145;&#x3057;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;GR&#xFF09;&#x306F;&#x3001;STAT3&#x305A;&#x306B;&#x30BB;&#x30AA;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30BB;&#x30AA;&#x306F;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;c-Jun/c-Fos&#x3068;OCT-1&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#xFF08;GR&#x3001;c-Jun&#x306E;&#x306F;&#x3001;OCT-1&#xFF09;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;STAT3&#x304C;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;5&#x301C;10&#x5206;&#x9593;&#x3001;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;II&#xFF08;Pol II&#xFF09;&#x306E;&#x5230;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5148;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;GR&#x3068;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;STAT3&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30BB;&#x30AA;&#x5360;&#x9818;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x3002;&#x30BB;&#x30AA;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x7D04;90&#x5206;&#x9593;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x3002; IL-6&#x3068;&#x654F;&#x6377;&#x304C;&#xFF08;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;30&#x5206;&#x5F8C;&#xFF09;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30AA;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;30&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x6D88;&#x5931;&#x306F;&#x3001;STAT3&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x66F4;&#x65B0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;GR&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;IL-6 + Dex&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x6838;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;STAT3&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;STAT3&#x306F;&#x3001;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30AA;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30F3;&#x8EE2;&#x5199;&#x3B1;2-Mlocus&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30DD;&#x30EB;II&#x306E;&#x7D04;30&#x5206;&#x306E;&#x901A;&#x904E;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30D5;&#x30EB;&#x30BB;&#x30AA;&#x5360;&#x9818;&#x5F8C;&#x306E;&#x9045;&#x308C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

STAT3&#x4F9D;&#x5B58;&#x30BB;&#x30AA;&#x7D44;&#x7ACB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x89E3;&#x4F53;&#xFF1A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;2  - &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5168;&#x8EE2;&#x5199;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;GR&#x3068;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30B8;&#x30FC;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC758; &#xC138;&#xBD80; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4; &#xBC0F; STAT3 &#xC885;&#xC18D;&#xC758; &#xD574;&#xCCB4; &#xAE30;&#xC220; alpha2-macroglobulin (alpha2-M) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; enhanceosome glucocorticoid &#xBCF4;&#xC644; &#xC2E4;&#xD589; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4;&#xC640; &#xC774;&#xAC83;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0;. Glucocorticoid &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GR) enhanceosome STAT3 &#xC5C6;&#xC774; &#xC5F0;&#xACB0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, enhanceosome&#xB294; c-6 &#xC6D4;/c-Fos &#xBC0F; &#xD3EC;&#xD568; 10 &#xC6D4;-1 constitutively. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; (GR, c-6 &#xC6D4;, 10 &#xC6D4;-1) &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; STAT3 &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; transcriptional &#xC99D;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;. GR&#xACFC; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated stat3&#xC758; enhanceosome &#xC810;&#xB839; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC774; &#xC57D; 5-10 &#xBD84;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (Pol II) 2 &#xC138;&#xC758; &#xB3C4;&#xCC29; &#xC55E;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Enhanceosome &#xB450; inducers&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC57D; 90 &#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xB9BD; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-6&#xC640; &#xB371; &#xC2A4; (&#xD6C4; 30 &#xBD84; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758;) &#xC81C;&#xAC70;, &#xC124;&#xC815; &#xB41C; enhanceosome&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; 30 &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &#xC2E4;&#xC885; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; stat3&#xC640; GR &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC31;&#xC2E0; IL&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;-+ 6 &#xB371; &#xC2A4;. &#xCD1D; &#xD575; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated STAT3 DNA&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; chromatin &#xAD00;&#xB828; STAT3 dephosphorylation &#xC800;&#xD56D; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; enhanceosome&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xC778; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC804;&#xC0AC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; alpha2-Mlocus&#xC5D0;&#xC11C; 2 &#xCC28; &#xD22C;&#xD45C; &#xC18C; &#xC57D; 30 &#xBD84; &#xD658;&#xC2B9; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC804;&#xCCB4; enhanceosome &#xC810;&#xB839; &#xD6C4; lag&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

STAT3 &#xC885;&#xC18D; enhanceosome &#xC870;&#xB9BD;&#xACFC; &#xD574;&#xCCB4;: &#xC54C;&#xD30C; 2 macroglobulin &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; transcriptional &#xC99D;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xD560;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xACFC;.

Se describe la evoluci&#xF3;n temporal detallada del montaje y desmontaje de un dependiente de STAT3, complementado por glucocorticoides enhanceosome para la alfa2-macroglobulina (alfa 2-M) de genes y comparar esto con un curso de tiempo detallado de la transcripci&#xF3;n del gen por la fuga en el an&#xE1;lisis . El receptor de glucocorticoides (GR) puede asociarse con el enhanceosome sin STAT3. Adem&#xE1;s, el enhanceosome contiene c-Jun/c-Fos y 01 de octubre-constitutivamente. Todos estos factores (GR, c-junio, octubre-1) tienen dominios de transcripci&#xF3;n de activaci&#xF3;n, pero STAT3 es necesaria para el aumento observado de la transcripci&#xF3;n. El curso temporal de la ocupaci&#xF3;n enhanceosome por GR y la tirosina fosforilados STAT3 muestra que estos factores de transcripci&#xF3;n preceden por aproximadamente 5-10 minutos de la llegada de la ARN polimerasa II (pol II). El enhanceosome sigue siendo ensamblado por aproximadamente 90 minutos en la presencia continua de ambos inductores. Cuando la IL-6 y Dex se eliminan (despu&#xE9;s de 30 minutos de tratamiento), la desaparici&#xF3;n dentro del plazo adicional de 30 minutos de la enhanceosome establecida indica que la renovaci&#xF3;n de STAT3 y GR uni&#xF3;n debe ocurrir en la presencia continua de la IL-6 + Dex. En comparaci&#xF3;n con los totales nucleares tirosina fosforilados STAT3 capaces de uni&#xF3;n a ADN, el STAT3 asociada a la cromatina se resiste a la desfosforilaci&#xF3;n y parece reciclar para mantener el enhanceosome. Run-en la transcripci&#xF3;n muestra un retraso despu&#xE9;s de la ocupaci&#xF3;n enhanceosome completo que puede ser en gran parte pero no completamente explicada por el tiempo de tr&#xE1;nsito de aproximadamente 30 minutos de Pol II a trav&#xE9;s de la alfa-2 Mlocus.

STAT3 dependiente de la Asamblea enhanceosome y desmontaje: La sinergia con los recursos gen&#xE9;ticos para la totalidad del aumento de la transcripci&#xF3;n de la alfa 2-macroglobulina Gene

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50; (STAT) 1 &#x4F9D;&#x6B21;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F53;&#x3001; &#x4E8C;&#x7518;&#x9187;&#x7684;&#x672B;&#x5C3E;&#x9644;&#x8FD1;&#x4E92;&#x60E0; Src &#x540C;&#x6E90; 2 &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x4E92;&#x52A8;&#x4E8C;&#x805A;&#x5F62;&#x6210;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5230;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E73;&#x884C;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#x63D0;&#x793A;&#x5E76;&#x8FD4;&#x56DE;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5B8C;&#x6210;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x706D;&#x6D3B;&#x5468;&#x671F;&#x3002;Dimerize &#x975E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x524D;&#x9762;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x754C;&#x9762; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF; (ND) &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E8C;&#x805A;&#x3002;&#x65B0;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x975E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; STAT1 &#x5305;&#x542B;&#x9495;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x6709;&#x6B63;&#x6587; STAT1&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x53CD;&#x5411;&#x5E73;&#x884C;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x53CD;&#x5411;&#x5E73;&#x884C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#xFF0C;Src 2 &#x540C;&#x6E90;&#x57DF;&#x662F;&#x76F8;&#x53CD;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5377;&#x6750;&#xFF1A; &#x7EBF;&#x5708;&#x4E0E; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684;&#x53CA;&#x5176;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x76F8;&#x4E92;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F53;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF1A; &#x7EBF;&#x5708; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x63A5;&#x53E3;&#x6216;&#x963B;&#x6B62;&#x975E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x4E8C;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6297; dephosphorylation &#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x6297;&#x6027;&#x7684; ND &#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x63A5;&#x53E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5E76;&#x884C; STAT1 phosphodimer &#x7ECF;&#x5386;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x91CD;&#x6392; &#xFF08;&#x5E73;&#x884C;&#x4E8E; antiparallel&#xFF09; &#x63D0;&#x51FA;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x3002;

&#x5468;&#x671F;&#x53CD;&#x5411;&#x5E73;&#x884C;&#x7684;&#x4E8C;&#x805A;&#x7ED3;&#x6784;&#x975E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; STAT1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5931;&#x6548;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

IFN-gamma treatment of cells leads to tyrosine phosphorylation of signal transducer and activator of transcription (STAT) 1 followed by dimerization through a reciprocal Src homology 2-phosphotyrosine interaction near the -COOH end of each monomer, forming a parallel structure that accumulates in the nucleus to drive transcription. Prompt dephosphorylation and return to the cytoplasm completes the activation-inactivation cycle. Nonphosphorylated STATs dimerize, and a previously described interface between N-terminal domain (ND) dimers has been implicated in this dimerization. A new crystal structure of nonphosphorylated STAT1 containing the ND dimer has two possible configurations for the body of STAT1, one of which is antiparallel. In this antiparallel structure, the Src homology 2 domains are at opposite ends of the dimer, with the coiled:coil domain of one monomer interacting reciprocally with the DNA-binding domain of its partner. Here, we find that mutations in either the coiled:coil/DNA-binding domain interface or the ND dimer interface block dimerization of nonphosphorylated molecules and cause a resistance to dephosphorylation in vivo and resistance to a tyrosine phosphatase in vitro. We conclude that a parallel STAT1 phosphodimer not bound to DNA most likely undergoes a conformational rearrangement (parallel to antiparallel) to present the phosphotyrosine efficiently for dephosphorylation.

Implications of an antiparallel dimeric structure of nonphosphorylated STAT1 for the activation-inactivation cycle.

L&#x26;#39;IFN-gamma de cellules de traitement conduit &#xE0; la phosphorylation de tyrosine du r&#xE9;cepteur de signaux et l&#x26;#39;activateur de la transcription (STAT) suivie par une dim&#xE9;risation par une homologie Src 2-r&#xE9;ciproque phosphotyrosine interaction pr&#xE8;s de la-COOH fin de chaque monom&#xE8;re, formant une structure parall&#xE8;le qui s&#x26;#39;accumule dans la noyau pour entra&#xEE;ner la transcription. D&#xE9;phosphorylation rapide et retour vers le cytoplasme compl&#xE8;te le cycle d&#x26;#39;activation-inactivation. STAT non phosphoryl&#xE9;e dim&#xE9;riser, et une interface d&#xE9;crite pr&#xE9;c&#xE9;demment entre domaine N-terminal (ND) dim&#xE8;res a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans cette dim&#xE9;risation. Une structure de cristal de STAT1 nouvelle non phosphoryl&#xE9;e contenant le dim&#xE8;re ND a deux configurations possibles pour le corps de STAT1, dont l&#x26;#39;un est antiparall&#xE8;le. Dans cette structure antiparall&#xE8;le, les Src homologie 2 domaines sont &#xE0; des extr&#xE9;mit&#xE9;s oppos&#xE9;es du dim&#xE8;re, avec le serpentin: domaine de bobine interagissant mutuellement un monom&#xE8;re avec le domaine liant l&#x26;#39;ADN de son partenaire. Ici, nous constatons que les mutations soit dans la spirale: bobine / interface domaine liant l&#x26;#39;ADN ou la dim&#xE9;risation ND dim&#xE8;re bloc d&#x26;#39;interface de mol&#xE9;cules non phosphoryl&#xE9;e et provoquer une r&#xE9;sistance &#xE0; la d&#xE9;phosphorylation in vivo et une r&#xE9;sistance &#xE0; une tyrosine phosphatase in vitro. Nous concluons qu&#x26;#39;une phosphodimer parall&#xE8;le STAT1 pas li&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;ADN le plus probable subit un r&#xE9;arrangement conformationnel (parall&#xE8;le &#xE0; antiparall&#xE8;le) pour pr&#xE9;senter le phosphotyrosine efficacement pour la d&#xE9;phosphorylation.

Cons&#xE9;quences d&#x26;#39;une structure dim&#xE8;re antiparall&#xE8;le de STAT1 non phosphoryl&#xE9;e pour le cycle d&#x26;#39;activation-inactivation

Implikationen eines antiparallelen dimere Struktur von nichtphosphorylierten STAT1-Aktivierung f&#xFC;r die Inaktivierung Zyklus.

Trattamento IFN-gamma delle cellule porta alla fosforilazione della tirosina del trasduttore di segnale e attivatore di trascrizione (STAT) 1 seguito da dimerizzazione attraverso un 2-phosphotyrosine interazione reciproca di Src homology vicino a fine - COOH di ogni monomero, formando una struttura parallela che si accumula nel nucleo per trascrizione in auto. Defosforilazione pronta e ritorno al citoplasma completa il ciclo di attivazione-disattivazione. Statistiche nonphosphorylated dimerize, e un&#39;interfaccia precedentemente descritta tra dimeri (ND) dominio N-terminale &egrave; stata implicata in questa dimerizzazione. Una nuova struttura di cristallo di nonphosphorylated STAT1 contenente il dimero ND ha due possibili configurazioni per il corpo di STAT1, uno dei quali &egrave; antiparallelo. In questa struttura antiparallelo, i domini di Src homology 2 sono alle estremit&agrave; opposte del dimero, con la spirale: dominio della bobina di un monomero reciprocamente interagendo con il dominio DNA-binding del suo partner. Qui, troviamo che le mutazioni in entrambi la spirale: bobina/DNA-binding domain interfaccia o ND dimero bloccare la dimerizzazione di molecole nonphosphorylated e causare una resistenza alla dephosphorylation in vivo e la resistenza di una fosfatasi tirosina in vitro. Possiamo concludere che un parallelo STAT1 phosphodimer non legato al DNA probabilmente subisce un riarrangiamento conformazionale (parallelo al antiparallelo) per presentare il phosphotyrosine efficientemente per defosforilazione.

Le implicazioni di una struttura dimerica antiparallelo di STAT1 nonphosphorylated per l&#39;attivazione-disattivazione del ciclo.

&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;IFN-&#x3B3;&#x51E6;&#x7406;&#x304C;&#x4E26;&#x5217;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5404;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;-COOH&#x7AEF;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x9006;&#x6570;Src&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;2&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x304C;&#x7D9A;&#x304F;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;STAT&#xFF09;1&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6838;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C8;&#x3092;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x5FA9;&#x5E30;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x975E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x7D71;&#x8A08;&#x60C5;&#x5831;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;N-&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;ND&#xFF09;&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x9593;&#x306B;&#x524D;&#x8FF0;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; ND&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x975E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;STAT1&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;STAT1&#x306E;&#x672C;&#x4F53;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x69CB;&#x6210;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x884C;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5E73;&#x884C;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Src&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;2&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306B;&#x306F;&#x6B21;&#x306E;&#x3068;&#x304A;&#x308A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;1&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;/ DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;ND&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB;STAT1&#x306E;phosphodimer&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#xFF08;&#x5E73;&#x884C;&#x306B;&#x5E73;&#x884C;&#xFF09;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x975E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;STAT1&#x306E;&#x53CD;&#x5E73;&#x884C;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xC140;&#xC758; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30;&#xC758; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xC804;&#xC0AC; (STAT) &#xB4A4;&#xC5D0; &#xAC01; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC758;-COOH &#xB05D;&#xBD80;&#xBD84; &#xC0C1;&#xD638; Src homology 2 phosphotyrosine &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; dimerization 1 &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD95;&#xC801; &#xB418;&#xB294; &#xBCD1;&#xB82C; &#xAD6C;&#xC870; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xD504;&#xB86C;&#xD504;&#xD2B8; dephosphorylation &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xADC0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC744; &#xC644;&#xB8CC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nonphosphorylated &#xD1B5;&#xACC4; dimerize &#xBC0F; &#xC55E;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;&#xD55C; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (ND) &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xAC00;&#xC774; dimerization&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. ND dimer &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; nonphosphorylated stat1&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD138; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; STAT1, &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; antiparallel&#xC758; &#xBCF8;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC774; antiparallel &#xAD6C;&#xC870; Src homology 2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xCF54;&#xC77C;&#xACFC; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xBC18;&#xB300;&#xD3B8; &#xB05D;&#xC740;: &#xC2DC;&#xD504; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC758; &#xCF54;&#xC77C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCC3E;&#xC744; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xCF54;&#xC77C;: &#xCF54;&#xC77C;/DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; ND dimer &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; nonphosphorylated &#xBD84;&#xC790;&#xC758; dimerization&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; dephosphorylation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678;&#xB294; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300;&#xAC1C; DNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBCD1;&#xB82C; STAT1 phosphodimer phosphotyrosine dephosphorylation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58; (&#xD3C9;&#xD589; antiparallel)&#xB97C; &#xACAA; &#xC2B5; &#xACB0;&#xB860;.

&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; nonphosphorylated stat1&#xC758; antiparallel dimeric &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8; &#xC8FC;&#xAE30;.

IFN-gamma tratamiento de las c&#xE9;lulas conduce a la fosforilaci&#xF3;n de tirosina del transductor de se&#xF1;al y activador de la transcripci&#xF3;n (STAT) 1 seguido por dimerizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de una rec&#xED;proca homolog&#xED;a Src 2-fosfotirosina interacci&#xF3;n cerca del extremo COOH de cada mon&#xF3;mero, formando una estructura paralela que se acumula en el n&#xFA;cleo para dirigir la transcripci&#xF3;n. Desfosforilaci&#xF3;n del sistema y volver al citoplasma se completa el ciclo de activaci&#xF3;n-inactivaci&#xF3;n. STAT fosforilada dimerizar, y una interfaz se ha descrito anteriormente entre dominio N-terminal (ND) d&#xED;meros se ha implicado en esta dimerizaci&#xF3;n. Una nueva estructura cristalina de STAT1 fosforilada que contiene el d&#xED;mero ND dispone de dos configuraciones posibles para el cuerpo de STAT1, uno de los cuales es antiparalela. En esta estructura antiparalela, el SRC homolog&#xED;a 2 dominios est&#xE1;n en los extremos opuestos del d&#xED;mero, con la espiral: dominio bobina de un mon&#xF3;mero interactuar rec&#xED;procamente con el dominio de uni&#xF3;n al ADN de su pareja. Aqu&#xED;, nos encontramos con que las mutaciones en cualquiera de la espiral: la bobina / de uni&#xF3;n al ADN interfaz de dominio o la interfaz de d&#xED;mero ND dimerizaci&#xF3;n bloque de mol&#xE9;culas fosforilada y provocar una resistencia a la desfosforilaci&#xF3;n in vivo y la resistencia a una tirosina fosfatasa in vitro. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que un paralelo phosphodimer STAT1 no se une al ADN m&#xE1;s probable es que experimenta un cambio conformacional (paralelo al antiparalelo) para presentar la fosfotirosina eficiente para la desfosforilaci&#xF3;n.

Implicaciones de una estructura dim&#xE9;rica antiparalelo de STAT1 fosforilada para el ciclo de activaci&#xF3;n-desactivaci&#xF3;n

&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x5B50;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50; (STAT) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#xFF0C;&#x548C;&#x65F6;&#x6B63;&#x786E;&#x6267;&#x884C;&#x5B83;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x957F;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x7A33;&#x6001;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x53CA;&#x5B83;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6A21;&#x677F;&#x7684;&#x6539;&#x5EFA;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E3A;&#x54CD;&#x5E94; STAT &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x88AB;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E0D;&#x6E05;&#x3002;

&#x978D;&#x9694;&#x8111;&#x819C;&#x548C; RNF20 &#x7684;&#x62DB;&#x8058;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x52A8;&#x6001;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50; 1 (STAT1)-&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x57FA;&#x56E0; (IRF1)&#x3002;

Signal transducer and activator of transcription (STAT) activation of gene expression is both rapid and transient, and when properly executed it affects growth, differentiation, homeostasis and the immune response, but when dysregulated it contributes to human disease. Transcriptional activation is regulated by alterations to the chromatin template. However, the role of histone modification at gene loci that are activated for transcription in response to STAT signaling is poorly defined.

Menin and RNF20 recruitment is associated with dynamic histone modifications that regulate signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1)-activated transcription of the interferon regulatory factor 1 gene (IRF1).

Transducteur de signal et activateur de la transcription (STAT) d&#x26;#39;activation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique est &#xE0; la fois rapide et transitoire, et lorsqu&#x26;#39;ils sont correctement ex&#xE9;cut&#xE9;e, elle affecte la croissance, la diff&#xE9;renciation, l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie et la r&#xE9;ponse immunitaire, mais quand elle contribue &#xE0; une dysr&#xE9;gulation des maladies humaines. Activation de la transcription est r&#xE9;gul&#xE9;e par des modifications apport&#xE9;es au mod&#xE8;le chromatine. Cependant, le r&#xF4;le de la modification des histones au locus qui sont activ&#xE9;s pour la transcription en r&#xE9;ponse &#xE0; STAT est mal d&#xE9;finie.

Recrutement de Menin et RNF20 est associ&#xE9;e &#xE0; des modifications des histones dynamiques qui r&#xE9;gulent de transduction de signal et activateur de la transcription 1 (STAT1) activ&#xE9; par transcription de l&#x26;#39;interf&#xE9;ron Facteur 1 g&#xE8;ne r&#xE9;gulateur (IRF1)

Signal Wandler und Aktivator der Transkription (STAT) Aktivierung der Genexpression ist sowohl schnelle als auch vor&uuml;bergehend, und bei richtig wirkt sich auf Wachstum, Differenzierung, Hom&ouml;ostase und die Immunantwort, Ausf&uuml;hrung aber bei defekten, die es tr&auml;gt, zur menschlichen Erkrankungen. Transkriptionelle Aktivierung wird durch &Auml;nderungen an der Vorlage Chromatin geregelt. Allerdings ist die Rolle der Histon-&Auml;nderung bei gen-Loci, die f&uuml;r die Transkription als Reaktion auf die STAT Signalisierung aktiviert werden schlecht definiert.

Menin und RNF20 Einstellung ist verbunden mit dynamischen Histon-Modifikationen, die Signal-Wandler und Aktivator der Transkription 1 (STAT1) regulieren-Transkription des Gens ordnungspolitischen Faktor 1 Interferon (IRF1) aktiviert.

Segnale trasduttore e attivatore di trascrizione (STAT) attivazione dell&#39;espressione genica &egrave; rapida e transitoria e quando eseguito correttamente influisce sulla crescita, differenziazione, l&#39;omeostasi e la risposta immunitaria, ma quando contribuisce alla malattia umana. Attivazione trascrizionale &egrave; regolata da alterazioni al modello della cromatina. Tuttavia, il ruolo delle modifiche dell&#39;istone in loci del gene che vengono attivati per la trascrizione in risposta alla segnalazione STAT &egrave; scarsamente definito.

Reclutamento di Menin e RNF20 &egrave; associato con le modifiche dell&#39;istone dinamici che regolano il trasduttore di segnale e attivatore di trascrizione 1 (STAT1)-attiva la trascrizione del gene interferon regulatory factor 1 (IRF1).

&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#xFF08;STAT&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x5168;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;STAT&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Menin&#x3068;RNF20&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;1&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;STAT1&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#xFF08;IRF1&#xFF09;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#xB7;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xC804;&#xC0AC; (STAT)&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5;, &#xBD84;&#xD654;, &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBC0F; &#xB54C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; dysregulated &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;. Transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654; chromatin &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC804;&#xC0AC; &#xD569;&#xACC4; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; loci&#xC5D0;&#xC11C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Menin &#xBC0F; RNF20 &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; 1 (STAT1)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC801; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;-&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; (IRF1)&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transductor de se&#xF1;al y activador de la transcripci&#xF3;n (STAT) la activaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica es a la vez r&#xE1;pida y transitoria, y cuando se ejecuta, afecta el crecimiento, la diferenciaci&#xF3;n, la homeostasis y la respuesta inmune, pero cuando desregulada contribuye a la enfermedad humana. Activaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n est&#xE1; regulada por las modificaciones de la plantilla de la cromatina. Sin embargo, el papel de la modificaci&#xF3;n de las histonas en los loci de genes que se activan para la transcripci&#xF3;n en respuesta a STAT de se&#xF1;alizaci&#xF3;n no est&#xE1; bien definido.

Contrataci&#xF3;n Menin y RNF20 se asocia con la din&#xE1;mica modificaciones de las histonas que regulan la se&#xF1;al de transductor y activador de la transcripci&#xF3;n 1 (STAT1) activado por la transcripci&#xF3;n del factor regulador de interfer&#xF3;n 1 gen (IRF1)

JAK STAT &#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;trimethylation &#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 79 &#xFF08;H3K79me3&#xFF09; &#x5728; H3 &#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5728; 5&#39; &#x7AEF;&#x7684; STAT1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 1 (IRF1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; DOT1L&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x4FEE;&#x6539; Lys-79&#xFF0C;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x7684;&#x975E;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x57DF;&#x8DE8; IRF1 &#x5728;&#x975E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540C;&#x56FD;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x62DB;&#x52DF;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;DOT1L &#x4ECB;&#x5BFC; RNAi &#x67AF;&#x7AED;&#x9632;&#x6B62; H3K79me3 &#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5E76;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; IRF1 2 &#x6298;&#x9875;&#xFF0C;&#x5982;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x90A3;&#x6837;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;STAT1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176; DNA &#x8BC6;&#x522B;&#x5143;&#x7D20; IRF1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9644;&#x8FD1; 2 &#x6298;&#x9875;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; DOT1L &#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4E2D;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x82AF;&#x7247;&#x63ED;&#x793A; DOT1L STAT1 &#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x57DF;&#x6620;&#x5C04;&#x6807;&#x8BC6; DOT1L &#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A; (&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; 580-1183 &#x673A;&#x573A;) &#x4F5C;&#x4E3A; STAT1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x57DF;&#x3002;DOT1L STAT1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x8868;&#x8FBE;&#x538B;&#x6291; IRF1 &#x8F6C;&#x5F55; (2 &#x500D;) &#x548C;&#x5E72;&#x6270; STAT1 DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5728; IRF1 &#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; DOT1L &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A; STAT1 DOT1L &#x4EA4;&#x4E92;&#x6240;&#x9700;&#x7684; JAK STAT &#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x3002;

&#x7AEF;&#x7C92;&#x6C89;&#x9ED8; 1 &#x6837; (DOT1L) &#x4E92;&#x52A8;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7834;&#x788E;&#x662F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50; 1 (STAT1)-&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

JAK-STAT-activated gene expression is both rapid and transient and requires dynamic post-translational modification of the chromatin template. Previously, we showed that following IFN-Î³ treatment, trimethylation of histone H3 at lysine 79 (H3K79me3) is rapidly and highly induced in the 5'-end of the STAT1-dependent gene interferon regulatory factor 1 (IRF1), but the role of this histone modification was unexplored. Here we report that DOT1L, the non-SET domain containing methyltransferase that modifies Lys-79, is localized across IRF1 in the uninduced state and is not further recruited by IFN-Î³ induction. RNAi-mediated depletion of DOT1L prevents the induction of H3K79me3 and lowers the transcription of IRF1 2-fold, as expected. Surprisingly, STAT1 binding to its DNA recognition element near the IRF1 promoter is diminished 2-fold in the DOT1L-depleted cell line. In vivo and in vitro protein interaction assays reveal a DOT1L-STAT1 interaction. Domain mapping identifies the middle region of DOT1L (amino acids 580-1183) as the STAT1 interaction domain. Overexpression of the DOT1L STAT1 interaction domain represses IRF1 transcription (2-fold) and interferes with STAT1 DNA binding at IRF1 and endogenous DOT1L histone methyltransferase activity. Collectively, our findings reveal a novel STAT1-DOT1L interaction that is required for the regulation JAK-STAT-inducible gene expression.

A novel disrupter of telomere silencing 1-like (DOT1L) interaction is required for signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1)-activated gene expression.

L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne JAK-STAT-actif est &#xE0; la fois rapide et transitoire et n&#xE9;cessite dynamique modification post-traductionnelle de la matrice chromatine. Auparavant, nous avons montr&#xE9; qu&#x26;#39;&#xE0; la suite de l&#x26;#39;IFN-&#x3B3; traitement, trim&#xE9;thylation de l&#x26;#39;histone H3 lysine &#xE0; 79 (H3K79me3) est rapidement et fortement induite dans l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 5&#x26;#39;-du facteur STAT1-d&#xE9;pendante interf&#xE9;ron g&#xE8;ne r&#xE9;gulateur 1 (IRF1), mais le r&#xF4;le de cette modification des histones a &#xE9;t&#xE9; explor&#xE9;. Nous rapportons ici que DOT1L, le domaine non-SET contenant m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase qui modifie Lys-79, est localis&#xE9; dans IRF1 dans l&#x26;#39;&#xE9;tat non induit et n&#x26;#39;est pas encore recrut&#xE9; par l&#x26;#39;IFN-&#x3B3; par induction. ARNi &#xE0; m&#xE9;diation &#xE9;puisement des DOT1L emp&#xEA;che l&#x26;#39;induction de H3K79me3 et abaisse la transcription de IRF1 2 fois, comme pr&#xE9;vu. &#xC9;tonnamment, STAT1 se liant &#xE0; son &#xE9;l&#xE9;ment de reconnaissance d&#x26;#39;ADN &#xE0; proximit&#xE9; du promoteur IRF1 est diminu&#xE9;e de 2 fois dans la lign&#xE9;e cellulaire DOT1L appauvri. In vivo et in vitro d&#x26;#39;interactions prot&#xE9;iques r&#xE9;v&#xE8;lent une interaction DOT1L-STAT1. Cartographie de domaine identifie la r&#xE9;gion m&#xE9;diane de DOT1L (acides amin&#xE9;s 580-1183) que le domaine d&#x26;#39;interaction STAT1. La surexpression du domaine STAT1 interaction DOT1L r&#xE9;prime la transcription IRF1 (2 fois) et interf&#xE8;re avec STAT1 liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN au IRF1 et endog&#xE8;nes DOT1L activit&#xE9; histone m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase. Collectivement, nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent un roman STAT1-DOT1L interaction qui est requise pour l&#x26;#39;expression la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes JAK-STAT-inductible.

Un Disrupter Roman de Silencing des t&#xE9;lom&#xE8;res 1-like (DOT1L) d&#x26;#39;interaction est n&#xE9;cessaire pour transducteur de signal et activateur de la transcription 1 (STAT1) activ&#xE9; par l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique

JAK-STAT-aktiviert Genexpression ist sowohl schnelle als auch transiente und erfordert POSTTRANSLATIONELLE Dynamisierung der Chromatin-Vorlage. Zuvor haben wir gezeigt, dass folgende IFN-&gamma;-Behandlung, Trimethylation von Histon, die H3 an Lysin 79 (H3K79me3) schnell und hoch in die 5&#39;-Ende der STAT1-abh&auml;ngigen gen Interferon ordnungspolitischen Faktor 1 (IRF1), aber die Rolle dieser Histon-&Auml;nderung induziert wird war unerforscht. Hier berichten wir, dass DOT1L, die nicht-SET-Dom&auml;ne, die mit Methyltransferase, die Lys-79, &auml;ndert in IRF1 im uninduced Zustand lokalisiert ist und ist nicht weiter von IFN-&gamma; Induktion eingestellt. RNAi-vermittelte Ersch&ouml;pfung der DOT1L verhindert die Induktion von H3K79me3 und senkt die Transkription von IRF1 2-fach, wie erwartet. &Uuml;berraschenderweise STAT1 Bindung mit seiner DNA-Anerkennung-Element in der N&auml;he der IRF1-Projekttr&auml;ger ist 2-fach vermindert in der DOT1L-abgereichertem Zelllinie. In-vivo und in vitro-Protein Interaktion Proben zeigen eine DOT1L-STAT1-Interaktion. Domain-Mapping identifiziert die mittlere Region des DOT1L (Aminos&auml;uren 580-1183) als STAT1 Interaktion Dom&auml;ne. Eine &Uuml;berexpression von der DOT1L STAT1-Interaktion-Dom&auml;ne IRF1 Transkription (2-fach) unterdr&uuml;ckt und STAT1 DNA-Bindung an IRF1 und endogene DOT1L-Histon-Methyltransferase-Aktivit&auml;t beeintr&auml;chtigt. Gemeinsam enth&uuml;llen unsere Erkenntnisse einen Roman STAT1-DOT1L-Interaktion, die f&uuml;r die Regulierung der JAK-STAT-inducible Genexpression erforderlich ist.

Eine neuartige Disruptor Telomer Schweigen zu 1-wie (DOT1L) Interaktion ist erforderlich f&uuml;r Signal-Wandler und Aktivator der Transkription 1 (STAT1)-Genexpression aktiviert.

Espressione del gene JAK-STAT-attivato &egrave; rapida e transitoria e richiede la modifica alberino-di traduzione dinamica del modello della cromatina. In precedenza, abbiamo dimostrato che il seguente trattamento IFN-&gamma;, trimethylation dell&#39;istone H3 a lisina 79 (H3K79me3) &egrave; rapida e altamente indotta in 5&#39;-fine del STAT1-dipendente gene interferone fattore regolatore 1 (IRF1), ma il ruolo di questa modifica dell&#39;istone &egrave; inesplorato. Qui riportiamo che DOT1L, il dominio non-SET contenente metiltransferasi che modifica Lys-79, &egrave; localizzata in tutta IRF1 nello stato uninduced e non &egrave; ulteriormente assunti dall&#39;induzione di IFN-&gamma;. Svuotamento RNAi-mediata del DOT1L impedisce l&#39;induzione di H3K79me3 e abbassa la trascrizione di IRF1 2 volte, come previsto. Sorprendentemente, associazione STAT1 al suo elemento di riconoscimento del DNA vicino al promotore IRF1 &egrave; diminuita 2 volte nella linea cellulare DOT1L-esaurito. Analisi di interazione proteina in vivo e in vitro rivelano un&#39;interazione DOT1L-STAT1. Mappatura del dominio identifica la regione centrale del DOT1L (aminoacidi 580-1183) come il dominio di interazione STAT1. Iperespressione del dominio di interazione DOT1L STAT1 reprime la trascrizione di IRF1 (2 volte) e interferisce con il legame del DNA STAT1 presso IRF1 ed endogeno DOT1L istone metiltransferasi attivit&agrave;. Collettivamente, i nostri risultati rivelano un romanzo STAT1-DOT1L interazione che &egrave; richiesto per il regolamento JAK-STAT-inducible gene expression.

Un romanzo distruttore dei telomeri silenziamento interazione (DOT1L) 1-come &egrave; richiesto per trasduttore di segnale e attivatore di trascrizione 1 (STAT1)-attivato l&#39;espressione genica.

JAK-STAT&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x3067;&#x3082;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;79&#x3067;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;IFN-&#x3B3;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#xFF08;H3K79me3&#xFF09;&#x306F;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;STAT1&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;IRF1&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;5&#x26;#39;-&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x3001;&#x672A;&#x8E0F;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DOT1L&#x3001;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;-79&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x975E;SET&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;IRF1&#x6E21;&#x3063;&#x3066;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;IFN-&#x3B3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DOT1L&#x306E;RNAi&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;H3K79me3&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;2&#x500D;&#x3001;&#x4E88;&#x60F3;&#x3069;&#x304A;&#x308A;IRF1&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;IRF1&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x4ED8;&#x8FD1;&#x306E;DNA&#x8A8D;&#x8B58;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;STAT1&#x306F;DOT1L&#x67AF;&#x6E07;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;2&#x500D;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;DOT1L-STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;DOT1L&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;580&#x304B;&#x3089;1183&#x307E;&#x3067;&#xFF09;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DOT1L STAT1&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;IRF1&#xFF08;2&#x500D;&#xFF09;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;STAT1 IRF1&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x5728;&#x6027;DOT1L&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5E72;&#x6E09;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x898F;&#x5236;JAK-STAT&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5C0F;&#x8AAC;STAT1-DOT1L&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;1&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#xFF08;DOT1L&#xFF09;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x652A;&#x4E71;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6027;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;STAT1&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

JAK &#xD569;&#xACC4; &#xD65C;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; chromatin &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF8; &#xADF8; &#xB2E4;&#xC74C; IFN-&gamma; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3 lysine 79 (H3K79me3)&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; STAT1 &#xC885;&#xC18D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 1 (IRF1)&#xC758; 5&#39;-&#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;&#xC774;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; trimethylation&#xC774; &#xD588;&#xB2E4; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; DOT1L, &#xC218;&#xC815; &#xB9AC;&#xC2A4;-79, methyltransferase&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBE44; &#xC9D1;&#xD569; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; IRF1 uninduced &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; IFN-&gamma; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Dot1l&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; RNAi &#xC911;&#xC7AC; h3k79me3&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC608;&#xC0C1; &#xB300;&#xB85C; 2-fold IRF1 &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB0AE;&#xCD98; &#xB2E4;. IRF1 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xADFC;&#xCC98;&#xC758; DNA &#xC778;&#xC2DD; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; STAT1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; 2-fold &#xAC10;&#xC18C; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, DOT1L &#xC18C;&#xC9C4; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; DOT1L STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. Dot1l&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB9E4;&#xD551; (&#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 580-1183) STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C;. Overexpression DOT1L STAT1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; IRF1 &#xC804;&#xC0AC; (2-fold) &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xBC0F; STAT1 DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; irf1&#xC640; &#xC0DD; DOT1L &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC18C;&#xC124; JAK-&#xD569;&#xACC4;-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; STAT1 DOT1L &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

1 &#xD615; (DOT1L) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC785;&#xC744; telomere&#xC758; &#xC18C;&#xC124; disrupter&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; 1 (STAT1)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;-&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

JAK-STAT activado por la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica es a la vez r&#xE1;pido y transitorio y requiere din&#xE1;mico modificaci&#xF3;n post-traduccional de la plantilla de la cromatina. Anteriormente, hemos demostrado que el IFN-&#x3B3; despu&#xE9;s del tratamiento, trimethylation de la histona H3 en la lisina 79 (H3K79me3) es r&#xE1;pida y altamente inducida en el extremo 5 &#x26;#39;del gen STAT1-dependiente de interfer&#xF3;n factor regulador 1 (IRF1), pero el papel de la modificaci&#xF3;n de las histonas no hab&#xED;a sido explorado. Aqu&#xED; mostramos que DOT1L, el dominio no-SET contiene metiltransferasa que modifica Lys-79, se localiza en IRF1 en el estado no inducido y no est&#xE1; a&#xFA;n contratado por el IFN-&#x3B3; inducci&#xF3;n. RNAi mediada por el agotamiento de DOT1L impide la inducci&#xF3;n de H3K79me3 y disminuye la transcripci&#xF3;n de IRF1 2-pliegue, como se esperaba. Sorprendentemente, la uni&#xF3;n a su elemento de reconocimiento de ADN cerca del promotor IRF1 STAT1 se disminuye 2-pliegue en la l&#xED;nea celular DOT1L-agotado. En vivo y en ensayos in vitro de interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas muestran una interacci&#xF3;n DOT1L-STAT1. Cartograf&#xED;a de dominio identifica a la regi&#xF3;n media de DOT1L (amino&#xE1;cidos 580-1183) como el dominio de interacci&#xF3;n de STAT1. La sobreexpresi&#xF3;n del dominio de la interacci&#xF3;n DOT1L STAT1 reprime IRF1 transcripci&#xF3;n (2 veces) e interfiere con la uni&#xF3;n al ADN en STAT1 IRF1 y end&#xF3;genos DOT1L la actividad histona metiltransferasa. En conjunto, nuestros resultados ponen de manifiesto una novela STAT1-DOT1L interacci&#xF3;n que se requiere para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n del gen JAK-STAT-inducible.

Un interruptor de Novela de silenciar los tel&#xF3;meros 1-como (DOT1L) se requiere la interacci&#xF3;n de transductor de se&#xF1;al y activador de la transcripci&#xF3;n 1 (STAT1) activado por la Expresi&#xF3;n G&#xE9;nica

&#x8F6C;&#x5BFC; (Janus &#x6FC0;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5B50;) &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;STAT &#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6A21;&#x677F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;monoubiquitination &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H2B (ubH2B) &#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#x5728; STAT1 &#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 1 (IRF1&#xFF09; &#x8868;&#x660E; deubiquitinase &#x62DB;&#x52DF;&#x57FA;&#x56E0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;RNAi &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6CDB;&#x7D20;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#xFF0C;USP22&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x4E8C;&#x6298;&#x9AD8; ubH2B &#x548C; IRF1 &#x4E8C;&#x6298;&#x4F4E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4F38;&#x957F;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; USP22 &#x6D88;&#x8017; 3-fold &#x51CF;&#x5C11;&#x4E3A; 2-&#x5411;&#x7684; 3&#39; &#x7AEF;&#x5288;&#x88C2;/polyadenylation&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;polyadenylation &#x56E0;&#x5B50; CPSF73 &#x4E0D;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x62DB;&#x52DF;&#xFF0C;&#x548C; 2 &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; (Ser2P) &#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; II &#x7684; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x4E5F;&#x53D7;&#x5230;&#x5E72;&#x6270;&#x3002;USP22 &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x52A0;&#x5DE5;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x88AB;&#x9006;&#x8F6C;&#x77AC;&#x6001; USP22 &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;ubH2B &#x5E2E;&#x52A9;&#x62DB;&#x8058; polyadenylation STAT1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5468;&#x671F;&#x7684; H2B &#x6CDB;/deubiquitination &#x6307;&#x5B9A; Ser2P&#xFF0C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x65AD;&#x88C2;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x548C; JAK STAT &#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0; 3&#39; &#x7AEF;&#x5904;&#x7406;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x9610;&#x8FF0; USP22 &#x804C;&#x80FD;&#x548C;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x63A8;&#x5B9A;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;-Chipumuro&#xFF0C;E.&#xFF0C;Henriksen&#xFF0C;&#x6587;&#x79D1;&#x7855;&#x58EB;&#x5B66;&#x4F4D;&#x3002;USP22 &#x6CDB;&#x7D20;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0; 3&#39; &#x7AEF;&#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x4F5C;&#x51FA;&#x4E86;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

&#x6CDB;&#x7D20;&#x6C34;&#x89E3; USP22 &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; JAK STAT &#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0; 3&#39; &#x7AEF;&#x5904;&#x7406;&#x3002;

The JAK-STAT (Janus kinase-signal transducer and activator of transcription) signaling pathway drives cellular growth, differentiation, and the immune response. STAT-activated gene expression is both rapid and transient and requires dynamic post-translational modification of the chromatin template. We previously showed that monoubiquitination of histone H2B (ubH2B) is highly dynamic at the STAT1 target gene, interferon regulatory factor 1 (IRF1), suggesting that a deubiquitinase is recruited during gene activation. Here, we report that RNAi-mediated knockdown of the ubiquitin hydrolase, USP22, results in 2-fold higher ubH2B, and 2-fold lower transcriptional elongation at IRF1. We also demonstrate that USP22 depletion diminishes 3'-end cleavage/polyadenylation by 2- to 3-fold. Furthermore, the polyadenylation factor CPSF73 is not effectively recruited, and serine 2 phosphorylation (Ser2P) of the C-terminal domain of RNA polymerase II is also disrupted. The transcriptional and processing defects observed in the USP22-knockdown cells are reversed by transient USP22 overexpression. Together, these results suggest that ubH2B helps recruit polyadenylation factors to STAT1-activated genes. We propose a working model, wherein a cycle of H2B ubiquitination/deubiquitination specifies Ser2P to regulate elongation and 3'-end processing of JAK-STAT-inducible mRNAs. These results further elaborate USP22 function and its role as a putative cancer stem cell marker.-Chipumuro, E., Henriksen, M. A. The ubiquitin hydrolase USP22 contributes to 3'-end processing of JAK-STAT inducible genes.

The ubiquitin hydrolase USP22 contributes to 3'-end processing of JAK-STAT-inducible genes.

Le JAK-STAT (Janus kinase-signal du transducteur et activateur de la transcription) la voie de signalisation moteur de la croissance cellulaire, la diff&#xE9;renciation, et la r&#xE9;ponse immunitaire. L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne STAT-activ&#xE9; est &#xE0; la fois rapide et transitoire et n&#xE9;cessite dynamique modification post-traductionnelle de la matrice de chromatine. Nous avons pr&#xE9;c&#xE9;demment montr&#xE9; que monoubiquitination des histone H2B (ubH2B) est tr&#xE8;s dynamique au niveau du g&#xE8;ne cible STAT1, facteur de r&#xE9;gulation interf&#xE9;ron 1 (IRF1), ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;une deubiquitinase est recrut&#xE9; lors de l&#x26;#39;activation du g&#xE8;ne. Ici, nous d&#xE9;clarons que l&#x26;#39;ARNi &#xE0; m&#xE9;diation knockdown de l&#x26;#39;ubiquitine hydrolase, USP22, les r&#xE9;sultats de 2 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e ubH2B, et 2 fois plus faible &#xE9;longation de la transcription &#xE0; IRF1. Nous d&#xE9;montrons &#xE9;galement que l&#x26;#39;appauvrissement de USP22 diminue l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;de clivage / polyad&#xE9;nylation de 2 - &#xE0; 3 fois. En outre, le facteur de polyad&#xE9;nylation CPSF73 n&#x26;#39;est pas effectivement recrut&#xE9;e, et la s&#xE9;rine phosphorylation 2 (Ser2P) du domaine C-terminal de l&#x26;#39;ARN polym&#xE9;rase II est &#xE9;galement interrompue. Les d&#xE9;fauts de transcription et de traitement observ&#xE9;s dans les cellules USP22-knockdown sont invers&#xE9;s par la surexpression USP22 transitoire. Ensemble, ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que des facteurs de polyad&#xE9;nylation ubH2B aide &#xE0; recruter STAT1 activ&#xE9;s g&#xE8;nes. Nous proposons un mod&#xE8;le de travail, dans lequel un cycle de l&#x26;#39;ubiquitination H2B / d&#xE9;ubiquitination sp&#xE9;cifie Ser2P de r&#xE9;glementer l&#x26;#39;allongement et l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;de traitement de JAK-STAT-inductibles ARNm. Ces r&#xE9;sultats encore &#xE9;labor&#xE9; USP22 fonction et son r&#xF4;le en tant que cellules souches du cancer putatif marker.-Chipumuro, E., Henriksen, MA USP22 ubiquitine hydrolase contribue &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;de traitement de g&#xE8;nes inductibles JAK-STAT.

Le USP22 ubiquitine hydrolase Contribue &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;Traitement des JAK-STAT-g&#xE8;nes inductibles

Der JAK-STAT (Janus Kinase-Signal-Wandler und Aktivator der Transkription)-Signalweg Laufwerke zellul&auml;re Wachstum, Differenzierung und die Immunantwort. STAT aktivierte Genexpression ist sowohl schnelle als auch transiente und erfordert POSTTRANSLATIONELLE Dynamisierung der Chromatin-Vorlage. Wir haben zuvor gezeigt, dass diese Monoubiquitination von Histon H2B (ubH2B) ist sehr dynamisch bei der STAT1-Ziel-gen, Interferon ordnungspolitischen Faktor 1 (IRF1), was darauf hindeutet, dass ein Deubiquitinase w&auml;hrend der Genaktivierung rekrutiert. Hier berichten wir &uuml;ber die RNAi-vermittelte Niederschlag des Ubiquitin-Hydrolase, USP22, Ergebnisse in 2-fold h&ouml;here ubH2B und 2-fold unteren transkriptionelle Bruchdehnung IRF1. Wir zeigen auch, dass der USP22 Ersch&ouml;pfung 3-fach von 2-zu 3&#39;-Ende Spaltung/Polyadenylierung verringert. Dar&uuml;ber hinaus der Polyadenylierung Faktor CPSF73 ist nicht effektiv rekrutiert, und Serin 2 Phosphorylierung (Ser2P) der C-terminalen Dom&auml;ne des RNS-Polymerase II ist auch gest&ouml;rt. Die transkriptionelle und Verarbeitung M&auml;ngel beobachtet in den USP22-Niederschlag-Zellen sind durch transiente USP22 &Uuml;berexpression r&uuml;ckg&auml;ngig machen. Zusammen, diese Ergebnisse weisen darauf hin, dass diese ubH2B hilft Polyadenylierung Faktoren STAT1 aktivierten Genen zu rekrutieren. Wir schlagen ein Arbeitsmodell, worin ein Zyklus von H2B Ubiquitination/Deubiquitination Ser2P, Dehnung und 3&#39;-enden-Bearbeitung der JAK-STAT-inducible mRNAs regulieren gibt. Diese Ergebnisse weiter zu erarbeiten, USP22-Funktion und seiner Rolle als ein mutma&szlig;liches Krebs Stammzelle Markierung.-Chipumuro, E., Henriksen, M. A. Das Ubiquitin-Hydrolase USP22 tr&auml;gt zur 3&#39;-Ende Verarbeitung der JAK-STAT durch Induktion Gene.

Das Ubiquitin-Hydrolase USP22 tr&auml;gt zur Verarbeitung der 3&#39;-Ende der JAK-STAT-inducible Gene.

La via di segnalazione JAK-STAT (Janus chinasi-segnale trasduttore e attivatore di trascrizione) spinge la crescita cellulare, la differenziazione e la risposta immunitaria. Espressione genica STAT attivata &egrave; rapida e transitoria e richiede la modifica alberino-di traduzione dinamica del modello della cromatina. Abbiamo precedentemente dimostrato che monoubiquitination dell&#39;istone H2B (ubH2B) &egrave; altamente dinamico presso il gene bersaglio STAT1, fattore regolatore interferone 1 (IRF1), suggerendo che un deubiquitinase &egrave; reclutato durante l&#39;attivazione del gene. Qui, segnaliamo che RNAi-mediata atterramento di idrolasi di ubiquitin, USP22, risultati in 2 volte superiore ubH2B e 2 volte pi&ugrave; basso allungamento trascrizionale a IRF1. Abbiamo anche dimostrare che diminue deplezione USP22 3&#39;--fine scissione/poliadenilazione da 2 3 volte. Inoltre, il fattore di poliadenilazione CPSF73 non &egrave; effettivamente assunti e fosforilazione della serina 2 (Ser2P) del dominio C-terminale della RNA polimerasi II &egrave; anche perturbato. I difetti di transcriptional e di trasformazione osservati nelle cellule USP22-atterramento sono invertiti da transitori sovraespressione di USP22. Insieme, questi risultati suggeriscono che ubH2B aiuta a reclutare poliadenilazione fattori di geni attivati STAT1. Vi proponiamo un modello di lavoro, in cui un ciclo di H2B ubiquitination/deubiquitination specifica Ser2P regolare allungamento e 3&#39;-terminare l&#39;elaborazione dei mRNAs JAK-STAT-inducibile. Questi risultati ulteriormente elaborano USP22 funzione e il suo ruolo come un marcatore delle cellule staminali cancro putativo.-Chipumuro, E., Henriksen, M. A. L&#39;idrolasi di ubiquitin USP22 contribuiscono al 3&#39;-terminare l&#39;elaborazione di geni inducibili JAK-STAT.

L&#39;idrolasi di ubiquitin USP22 contribuiscono al 3&#39;-terminare l&#39;elaborazione di geni inducibili JAK-STAT.

&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;JAK-STAT&#xFF08;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30E4;&#x30CC;&#x30B9;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#xFF09;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; STAT&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x3067;&#x3082;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H2B&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#xFF08;ubH2B&#xFF09;&#x8131;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;STAT1&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;1&#xFF08;IRF1&#xFF09;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;RNAi&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3001;USP22&#x3001;2&#x500D;ubH2B&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;IRF1&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;2&#x500D;&#x4F4E;&#x3044;&#x8EE2;&#x5199;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 3&#x500D;&#x306B; - &#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;USP22&#x67AF;&#x6E07;&#x304C;2 3&#x26;#39;-&#x672B;&#x7AEF;&#x958B;&#x88C2;/&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x66F4;&#x306B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;CPSF73&#x306F;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x3089;&#x305A;&#x3001;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;II&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;2&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#xFF08;Ser2P&#xFF09;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3082;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; USP22-&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x51E6;&#x7406;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;USP22&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9006;&#x8EE2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ubH2B&#x304C;STAT1&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x52A9;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x4F38;&#x3073;&#x3068;JAK-STAT&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;mRNA&#x306E;3&#x26;#39;-&#x672B;&#x7AEF;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;Ser2P&#x6307;&#x5B9A;&#x3057;H2B&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;/&#x8131;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3001;&#x4F5C;&#x696D;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x7CBE;&#x5DE7;&#x306A;USP22&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x764C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;marker.-Chipumuro&#x3001;E.&#x3001;&#x30D8;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AF;&#x30BB;&#x30F3;&#x3001;MA&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;USP22 JAK-STAT&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;3&#x26;#39;-&#x672B;&#x7AEF;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;USP22&#x306F;JAK-STAT&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;3 &#x26;#39;&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;

JAK-&#xD569;&#xACC4; (&#xC57C;&#xB204;&#xC2A4; kinase &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xAE30;&#xC640; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xAE30;) &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xBD84;&#xD654;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;. &#xD569;&#xACC4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; chromatin &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; (ubH2B) monoubiquitination &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; h2b&#xB294; STAT1 &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 1 (IRF1), &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; deubiquitinase &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC911; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xADF8; RNAi &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;, USP22, 2-fold &#xB192;&#xC740; ubH2B &#xBC0F; irf1&#xC5D0;&#xC11C; 2-fold &#xB0AE;&#xC740; transcriptional &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; USP22 &#xC18C;&#xBAA8; &#xAC10;&#xC18C; 3&#39; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xBD84;&#xC5F4;/polyadenylation&#xB97C; 2-3-fold &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, polyadenylation &#xC694;&#xC18C; CPSF73 &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; 2 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; (Ser2P) RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; II&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xBC29;&#xD574;&#xB3C4;. USP22-&#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; transcriptional &#xBC0F; &#xCC98;&#xB9AC; &#xACB0;&#xD568; &#xACFC;&#xB3C4; USP22 overexpression&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xB300; &#xD558;&#xB294;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; ubH2B polyadenylation &#xC694;&#xC18C; STAT1 &#xD65C;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. H2B ubiquitination/deubiquitination&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xBC0F; JAK-&#xD569;&#xACC4;-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Mrnas&#xC758; 3&#39;-&#xB05D; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; ser2p&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC5C5; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB354; &#xC815;&#xAD50;&#xD55C; USP22 &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC0C1; &#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DD;.-Chipumuro, E., &#xD5E8;&#xB9AD;, M. A. &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; USP22 JAK &#xD569;&#xACC4; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 3&#39;-&#xC5D4;&#xB4DC; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; USP22 JAK-&#xD569;&#xACC4;-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; 3&#39;-&#xC5D4;&#xB4DC; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

El JAK-STAT (Janus quinasa-transductor de se&#xF1;ales y activador de la transcripci&#xF3;n) la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n impulsa el crecimiento celular, la diferenciaci&#xF3;n y la respuesta inmune. STAT-activa la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica es a la vez r&#xE1;pido y transitorio y requiere din&#xE1;mico modificaci&#xF3;n post-traduccional de la plantilla de la cromatina. Que anteriormente mostr&#xF3; que monoubiquitination de la histona H2B (ubH2B) es muy din&#xE1;mico en el objetivo de genes STAT1, el interfer&#xF3;n factor regulador 1 (IRF1), lo que sugiere que un deubiquitinase es reclutado durante la activaci&#xF3;n del gen. En este caso, nos informan de que RNAi mediada desmontables de la hidrolasa ubiquitina, USP22, da como resultado dos veces ubH2B superior, y 2 veces menor elongaci&#xF3;n transcripcional en IRF1. Tambi&#xE9;n demuestran que el agotamiento de USP22 disminuye extremo 3 &#x26;#39;de escisi&#xF3;n / poliadenilaci&#xF3;n por 2 - a 3 veces. Adem&#xE1;s, el factor de poliadenilaci&#xF3;n CPSF73 no est&#xE1; efectivamente contratados, y serina 2 fosforilaci&#xF3;n (Ser2P) del dominio C-terminal de la RNA polimerasa II se interrumpe tambi&#xE9;n. Los defectos de la transcripci&#xF3;n y procesamiento observados en las c&#xE9;lulas desmontables USP22-se invierten por la sobreexpresi&#xF3;n USP22 transitoria. En conjunto, estos resultados sugieren que los factores ubH2B ayuda a reclutar a poliadenilaci&#xF3;n STAT1 genes activados. Proponemos un modelo de trabajo, en la que un ciclo de ubiquitinaci&#xF3;n H2B / deubiquitination Ser2P especifica para regular la elongaci&#xF3;n y el extremo 3 &#x26;#39;de procesamiento de los ARNm de JAK-STAT-inducible. Estos resultados elaborado USP22 funci&#xF3;n y su papel como c&#xE9;lulas madre cancer&#xED;genas supuesta marker.-Chipumuro, E., Henriksen, MA La USP22 hidrolasa ubiquitina contribuye al extremo 3 &#x26;#39;de procesamiento de los genes inducibles JAK-STAT.

La USP22 hidrolasa ubiquitina Contribuye al extremo 3 &#x26;#39;de procesamiento de los genes de JAK-STAT-inducible

&#x2477; &#x978D;&#x9694;&#x8111;&#x819C;&#x5F71;&#x54CD;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8BF1;&#x751F; IRF1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728; pre mRNA &#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4FDD;&#x771F;&#x3002;

Knockdown of menin affects pre-mRNA processing and promoter fidelity at the interferon-gamma inducible IRF1 gene.

Knockdown de Menin affecte pr&#xE9;-ARNm de traitement et Fidelity promoteur &#xE0; l&#x26;#39;interf&#xE9;ron-gamma inductible IRF1 Gene

Niederschlag von Menin betrifft Pre-mRNA Processing und Projekttr&auml;ger Treue an das Interferon-Gamma durch Induktion IRF1 gen.

Atterramento di menin influisce sulla fedelt&agrave; di elaborazione e promotore pre-mRNA presso il gene IRF1 inducibile di interferone-gamma.

Menin&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&#x3B3;&#x8A98;&#x5C0E;IRF1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;pre-mRNA&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

Menin&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC0AC;&#xC804; mRNA &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; IRF1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Article	Year
Dissociation time from DNA determines transcriptional function in a STAT1 linker mutant. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 11834743	2002
Negative regulation of STAT92E by an N-terminally truncated STAT protein derived from an alternative promoter site. Genes & development\| PubMed ID: 12231627	2002
STAT3-dependent enhanceosome assembly and disassembly: synergy with GR for full transcriptional increase of the alpha 2-macroglobulin gene. Genes & development\| PubMed ID: 14522952	2003
Implications of an antiparallel dimeric structure of nonphosphorylated STAT1 for the activation-inactivation cycle. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 15753310	2005
Menin and RNF20 recruitment is associated with dynamic histone modifications that regulate signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1)-activated transcription of the interfero... Epigenetics & chromatin\| PubMed ID: 20825659	2010
A novel disrupter of telomere silencing 1-like (DOT1L) interaction is required for signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1)-activated gene expression. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 22002246	2011
The ubiquitin hydrolase USP22 contributes to 3'-end processing of JAK-STAT-inducible genes. FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology\| PubMed ID: 22067483	2012
Knockdown of menin affects pre-mRNA processing and promoter fidelity at the interferon-gamma inducible IRF1 gene. Epigenetics & chromatin\| PubMed ID: 22240255	2012

Melissa A. Henriksen

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