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Questo nuovo protocollo comporta la quantificazione della progressione della calcificazione cardiovascolare da immagini seriali di tomografia a emissione di micro positroni (PET)/micro tomografia computerizzata (TC) in piccoli animali da ricerca.
La micro tomografia a emissione di positroni (PET) e la micro tomografia computerizzata (TC) sono strumenti di ricerca potenti e ideali per seguire la progressione della calcificazione cardiovascolare. Grazie alla loro natura non invasiva, i piccoli animali da ricerca possono essere ripresi in più punti temporali. La sfida risiede nella quantificazione accurata della calcificazione cardiovascolare. Qui, forniamo un protocollo, utilizzando le immagini delle fasi successive della malattia come modello, per quantificare con precisione la progressione della calcificazione cardiovascolare negli studi longitudinali. Il protocollo prevede 1) l'allineamento dell'area del torace in più immagini dello stesso animale durante uno studio longitudinale come primo passo, 2) la definizione di una regione di interesse (ROI) situata all'interno del cuore e dell'aorta nel sito di depositi di calcio più grandi che diventano evidenti nelle immagini successive e 3) la segmentazione e la quantificazione simultanea dei depositi di calcio in tutte le immagini acquisite durante lo studio longitudinale. Questo metodo semplificato migliora l'accuratezza dell'analisi delle immagini nel seguire la progressione della calcificazione cardiovascolare, migliorando la precisione della definizione del ROI e riducendo la variabilità associata alle tecniche precedenti che analizzano le singole scansioni in modo indipendente.
Le malattie cardiovascolari sono una delle principali cause globali di morbilità e mortalità, che richiede un'indagine rigorosa per scoprirne i meccanismi e ideare strategie preventive e terapeutiche efficaci. La calcificazione dell'arteria coronarica (CAC) è ampiamente riconosciuta dagli esperti del settore come fattore predittivo delle malattie cardiovascolari, aumentando significativamente il rischio di mortalità cardiovascolare 1,2,3,4,5. Le calcificazioni microscopiche....
Le immagini rappresentative presentano una femmina di topo con deficit di apolipoproteina E (Apoe-/-). I protocolli sperimentali sono stati esaminati e approvati dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali dell'Università della California, Los Angeles.
1. Scansione degli animali
Metodi di analisi
Questa sezione illustra l'utilizzo corretto attraverso risultati rappresentativi. Qui, mostriamo l'immagine combinata microPET/microCT di un singolo topo scansionato a 15 e 18 mesi di età, dopo essere stato sottoposto a una dieta occidentale (21% di grassi, 0,2% di colesterolo) dai 12 ai 14 mesi di età. Seguendo le sezioni 2-8 del protocollo per la quantificazione della calcificazione, quattro ricercatori indipendenti hanno misurato separatamente i.......
Questo nuovo protocollo è un approccio migliorato alla quantificazione della calcificazione cardiovascolare. A causa della natura non invasiva dell'imaging, possono essere acquisite immagini microCT longitudinali per seguire la progressione della calcificazione cardiovascolare nei piccoli animali. Sebbene le immagini microCT da sole possano mostrare la progressione del contenuto di calcio, le immagini microPET, quando disponibili, possono fornire ulteriori livelli di informazioni, in pa.......
Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
Ringraziamo tutti i membri dell'UCLA Crump Preclinical Imaging Technology Center per il loro aiuto nell'acquisizione e nella trasmissione dei dati, nonché nella manutenzione delle apparecchiature e delle infrastrutture. Ringraziamo Jeffrey Collins per il suo aiuto nel funzionamento del ciclotrone e nella sintesi di 18F-NaF. Ringraziamo l'UCLA Statistical Consulting Group per il loro aiuto con l'analisi statistica. Questo lavoro è supportato dal NIH Cancer Center Support Grant (2 P30 CA016042-44 a MT) e dal National Institutes of Health, Heart, Lung, and Blood Institute (HL137647 e HL151391 a YT e LLD). Lo scanner GNEXT PET/....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.5 cc Sterile Insulin Syringes | Exel International | #26028 | Used for IV injection of 18F-NaF PET Tracer |
18F-NaF PET Tracer | CNSI Cyclotron | ||
Biorender | Biorender | Used for figure 1 | |
Female Apoe-/- mouse | Jackson Laboratories | #002052 | B6.129P2-Apoetm1Unc/J |
GNEXT PET/CT | Sofie Biosciences, Dulles, Virginia | ||
Isoflurane | Piramal Critical Care | Used as anesthesia for mouse imaging | |
ORS Dragonfly | Comet Technologies Canada Inc. | ||
SPSS Statistics | IBM | ||
Western diet for mice | Envigo | #TD88139 | 21% fat, 0.2% cholesterol |
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