Fonte: Laboratorio di Jeff Salacup - Università del Massachusetts Amherst

Come accennato nei video precedenti, il prodotto di un'estrazione con solvente organico, un estratto lipidico totale (TLE), è spesso una miscela complessa di centinaia, se non migliaia, di composti diversi. Il ricercatore è spesso interessato solo a una manciata di composti. Nel caso dei nostri due paleotermometri organici (U^k'₃₇ e MBT/CBT), l'interesse è per soli 6 composti (2 alchenoni e 4 tetraeteri isoprenoidali glicerolo dialchilglicerolo). Come discusso nei due video precedenti di questa serie, le tecniche di purificazione possono essere applicate al fine di ridurre il numero di composti in un campione analizzato. Queste tecniche possono alterare chimicamente i componenti indesiderati (saponificazione), sfruttare le diverse sostanze chimiche composte (cromatografia a colonna) o utilizzare le diverse forme e dimensioni delle molecole per includere o escludere determinati componenti dall'analisi (adduzione dell'urea). La struttura atomica di diverse sostanze chimiche porta alcuni composti organici a formare catene lunghe, strette e diritte (n-alcani e alchenoni), altri composti organici a formare strutture cicliche complesse, altri a formare strutture altamente ramificate e altri ancora che formano strutture sia cicliche che ramificate (GDCT) (Figura 1). Le diverse forme e dimensioni dei composti in un campione possono essere utilizzate per separarli l'uno dall'altro, più o meno allo stesso modo in cui un raccoglitore di monete separa monete di diversi tagli (dimensioni).

Figura 1. Confronto di diverse strutture chimiche. Decano, un alcano a catena diritta (A; da http://www.bpc.edu/mathscience/chemistry), cicloesano, un alcano ciclico (B; da http://www.bpc.edu/mathscience/chemistry), uno steroide, un idrocarburo policiclico (C; da www.wikiwand.com) e 2,2-dimetilbutano, un alcano ramificato (D; www.wikimedia.com). Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

1. Impostazione e preparazione dei materiali

1. Ottenere un estratto lipidico totale (TLE) utilizzando un metodo di estrazione con solvente (sonicazione, Soxhlet o estrazione con solvente accelerato (ASE)).
2. Acquista i seguenti materiali da qualsiasi rivenditore chimico: pipette e lampadine in vetro borosilicato bruciato; acqua pura; esano; Diclorometano (DCM); metanolo; urea.
   1. I reagenti devono essere puri e privi di idrocarburi. In alternativa, l'acqua pura può essere prodotta in laboratorio util

Questa tecnica di purificazione produce due fiale diverse; un addotto etichettato, contenente composti a catena diritta e raramente ramificati, e un altro non addotto etichettato, contenente composti altamente ramificati e ciclici. Questa procedura ha notevolmente ridotto la complessità di qualsiasi campione da analizzare su uno strumento. Questa diminuzione della complessità è spesso cruciale per l'analisi accurata dei composti bersaglio. Ad esempio, in ambienti nearshore dopo circa i...

L'adduzione dell'urea viene spesso utilizzata nella purificazione degli n-alcani, costituenti comuni della cera fogliare, al fine di rimuovere i composti co-eluitori prima dell'analisi isotopica. I rapporti isotopici di carbonio e idrogeno delle cere fogliari nelle piante contengono informazioni sulle vie metaboliche e sulle condizioni ambientali in cui la pianta ha usato e vissuto, rispettivamente. Per determinare i rapporti isotopici, è necessario caricare su un GC quantità molto grandi di composto. Tali grandi quant..