1. Identificare il topo da immaginare nella sua gabbia e trasferirlo nella camera di induzione dell'anestesia.
2. Anestetizzare il mouse usando isoflurano e confermare il knockdown usando una tecnica di pizzicamento delle dita dei piedi. Prendi la zampa tra il pollice e l'indice e pizzica con fermezza per verificare la risposta. Se l'animale ritira il piede, dovresti aspettare o rifare con l'anestesia secondo il protocollo approvato.
3. Verificare che tutto il personale che entra nella struttura di imaging sia sicuro per la risonanza magnetica. Ciò include la rimozione di qualsiasi indumento / accessorio magnetico, la conferma dell'eliminazione di impianti magnetici o pacemaker e la rimozione di metalli contenenti piercing.
4. L'isoflurano aperto scorre al naso nella sala risonanza magnetica. Ciò consente di innescare il tubo più lungo con anestetico prima del trasferimento del topo per garantire che l'animale non si svegli.
5. Chiudere il flusso di isoflurano alla camera di induzione dell'anestesia e trasferire il mouse allo stadio di imaging. Posizionare il mouse sul palco in modo tale che la posizione approssimativa del cuore sia allineata con il centro del magnete.
6. Fissare il cono del naso e riconfermare il knockdown utilizzando la tecnica del pizzicamento della punta.
7. Inserire le tre condotte dell'elettrocardiogramma per via sottocutanea con una porta a sinistra e a destra del cuore e una alla base dell'arto posteriore sinistro.
8. Inserire la sonda di temperatura rettale utilizzando una guainata di sonda sterile e lubrificante.
9. Posizionare il sensore di respirazione del cuscino sulla regione epigastrica dell'addome e fissarlo in posizione utilizzando una piastra di cartone. Il cartone permetterà di garantire un segnale sensibile alla pressione.
10. Verificare che tutti i segnali fisiologici vengano acquisiti tramite il software di monitoraggio all'esterno della sala scanner. Se viene rilevata una frequenza cardiaca, una frequenza respiratoria o una temperatura al di fuori del range normale, mettere in pausa l'imaging e valutare se l'animale è adeguatamente anestetizzato. Se l'animale è in difficoltà, la somministrazione di anestesia deve cessare e l'animale deve essere riportato alla gabbia per riprendersi.
11. Impostare il modulo di riscaldamento e la ventola e iniziare a riscaldare il flusso d'aria verso l'animale. Fissare tutto il tubo dell'aria in posizione in modo che l'aria calda soffi verso il mouse a partire appena oltre la punta della coda.
12. Posizionare la bobina di gradiente sopra l'animale e assicurarsi che tutti i cavi / tubi siano fissati.

2. Risonanza magnetica cardiaca - Questa sezione può essere adattata per altre applicazioni.

1. Sintonizzare e abbinare la bobina di gradiente al di fuori del foro del magnete per garantire che il segnale massimo venga rilevato dal soggetto.
2. Inserire lentamente lo stadio di imaging nel foro del magnete in modo tale che l'animale sia posizionato direttamente al centro del foro. Ciò include assicurarsi che la bobina di gradiente abbia una spaziatura uguale lungo tutte le direzioni radiali. Questa è la posizione in cui il campo magnetico principale sarà più omogeneo.
3. Eseguire una scansione localizzatore/navigatore per confermare la posizione del mouse all'interno dello scanner. Alcuni segmenti del cuore dovrebbero essere visualizzati all'interno di tutti e tre i piani (cioè assiale, sagittale e coronale). In caso contrario, ripetere il processo di riposizionamento del mouse ed eseguire scansioni di localizzazione/navigazione fino a raggiungere la posizione desiderata.
4. Impostate i parametri per la sequenza FLASH. Ad esempio: TR/TE = 8,0/2,0 ms, FA = 20°, FOV = 35 x 35 mm, matrice = 192 x 192 e NEX = 6. Quindi, seleziona il trigger esterno da "on".
5. Sul software di monitoraggio, configurare i trigger esterni in modo tale che le sequenze mri vengano avviate identificando i picchi R nei cicli cardiaci e mentre la respirazione è stabile durante la fase espiratoria. Poiché queste due condizioni sono soddisfatte, la sequenza può essere eseguita in serie e i dati verranno acquisiti.
6. Prescrivere ed eseguire una fetta di sequenza FLASH iniziale nella vista coronale in modo tale che il piano della fetta segua l'asse dall'apice del cuore attraverso la valvola aortica. Questo ciclo cine iniziale fornirà una visione a due camere del cuore.
7. Facendo riferimento ai risultati della vista a due camere, prescrivere ed eseguire una nuova sequenza FLASH lungo l'asse della valvola apice-aortica per visualizzare una vista a quattro camere.
8. Infine, prescrivere una fetta ad asse corto che sia perpendicolare all'asse della valvola apice-aortica approssimativamente a metà del cuore. I muscoli papillari dovrebbero essere distintamente visibili all'interno dell'uscita del ciclo cine in questa posizione.
   1. Ulteriori fette possono essere acquisite parallelamente a questa per costruire volumi del cuore sincronizzati nel tempo. Questi volumi vengono creati concatenando loop cine adiacenti in post-elaborazione.
9. Una volta completata l'imaging, trasferire i dati acquisiti in una posizione appropriata per l'analisi e rimuovere l'animale dallo scanner.