Per iniziare, posiziona il cucciolo di topo anestetizzato sul tavolo in posizione ventrale. Tira leggermente la parte posteriore della testa del cucciolo per visualizzare le suture craniche del cranio attraverso la pelle. Trova lambda sul cranio.
Il ventricolo o il sito di iniezione saranno visibili a metà strada tra lambda e l'occhio. Ad angolo perpendicolare, forare la pelle con la punta di una pipetta di vetro, si osserverà una resistenza iniziale e una leggera rientranza concava. Una volta forato, tenere la punta in posizione e premere una volta il pedale del microiniettore per iniettare un microlitro della miscela plasmidico.