Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Iniziare la somministrazione di plasma di DNA basata sull'elettroporazione posizionando un pezzo quadrato di pellicola di paraffina sul tavolo e comprimendo il gel dell'elettrodo sopra la pellicola. Quindi applicare una generosa quantità di gel per elettrodi su ciascuna paletta per coprire completamente le pale dell'elettrodo. Successivamente, tieni il cucciolo micro-iniettato con la miscela di DNA plasmidico nella mano non dominante, tenendo le dita dietro la testa.

Per posizionare la testa del cucciolo per l'elettroporazione, far scorrere delicatamente un dito sul lato dorsale successivo, posteriore alla testa, e posizionare l'elettrodo positivo all'esterno della testa dove è mirato il ventricolo. Posiziona l'elettrodo sull'occhio del cucciolo e premi leggermente le pale dell'elettrodo sulla parte rostrale della testa del cucciolo. Premere il pedale dell'elettrodo per avviare l'elettroporazione.

Ad ogni impulso, ruotare leggermente le palette dell'elettrodo, in senso antiorario, in modo che la paletta positiva si sposti verso la parte superiore della testa. Dopo l'ultimo impulso, rimuovere le pale e metterle da parte. I topi erano moribondi entro cinque mesi dall'elettroporazione, con la piena crescita del tumore rilevata attraverso la proteina reporter e l'analisi istologica.