Per iniziare l'etichettatura dei mitocondri preparare una soluzione 20 micromolare di BrdU in DMEM con siero bovino fetale al 10% o FBS. Quindi aggiungere il colorante di tracciamento dei mitocondri per regolare la concentrazione finale a 1,1 micromolari. Dopo 15 ore aggiungere 10 microlitri della soluzione di colorante di tracciamento dei mitocondri alla sospensione cellulare HeLa contenente i pozzetti.
Incubare le cellule per un'ora. Le condizioni utilizzate per marcare le molecole di DNA appena sintetizzate con BrdU hanno permesso la rilevazione del DNA marcato con BrdU nei mitocondri delle cellule HeLa. Il segnale ottenuto con anticorpi anti-BrdU era specifico e osservato solo nelle cellule trattate con BrdU.
Indipendentemente dal trattamento con BrdU, nessun segnale anticorpale anti-BrdU o anti-DNA è stato rilevato nei mitocondri delle cellule della fila zero. La quantificazione del segnale fluorescente degli anticorpi anti-BrdU ha indicato che le cellule della fila zero trattate con BrdU mostravano lo stesso basso livello di fluorescenza delle cellule BrdU non trattate, mentre il segnale per le linee parentali A549 e HeLa era 50 volte più alto.
