Dopo aver completato l'eutanasia primaria, controlla la perdita di risposta al dolore pizzicando il piede. Metti la rana sul dorso. Appunta ogni arto.
Tagliare la linea mediana della pelle, quindi tagliare lateralmente per creare due lembi di pelle. Afferrare la linea alba con una pinza e allontanarla dalla cavità celomica. Tagliare la muscolatura.
Tagliare o appuntare tutti i lembi fuori strada. Tagliare le ossa coracoidi con l'aiuto delle forbici da dissezione e rimuovere qualsiasi tessuto in eccesso per ottenere un migliore accesso al cuore. Quindi, spostare delicatamente lo stomaco dello Xenopus sezionato nella parte superiore del lobo del fegato sinistro.
Afferrare delicatamente una punta polmonare usando una pinza di tessuto e tirarla fuori dalla cavità celomica, quindi fissare il polmone attraverso la punta. Tirare il pericardio sottile stretto con una pinza di tessuto. Utilizzando la punta di un paio di forbici per iridectomia, perforare delicatamente il pericardio senza tagliare alcun tessuto sottostante.
Staccare il pericardio dalle camere cardiache. Afferrare delicatamente l'apice del ventricolo con una pinza. Senza perforare il ventricolo, inserire l'ago attraverso la chiusura della pinza nella camera del ventricolo.
Bloccare la pinza tissutale in posizione utilizzando un supporto per aghi o un emostato. Avviare il flusso della pompa a circa cinque millilitri al minuto. Questo ingorgerà le camere cardiache e il tronco arterioso.
Usa le forbici per fare un nick nel padiglione auricolare destro. Continuare il flusso della pompa fino a quando la vascolarizzazione dello stomaco sbianca. Lancia il padiglione auricolare del cuore sinistro.
Aumentare la portata della pompa a 10 millilitri al minuto. Utilizzando una pipetta di trasferimento, sciacquare la cavità celomica e il mezzo di perfusione. Se gli organi si spostano durante il risciacquo, spostarli delicatamente indietro per mantenere la visibilità dello stomaco e dei polmoni.
Per aiutare a visualizzare il perfufato che fuoriesce dal cuore, i padiglioni auricolari possono essere ulteriormente ridotti. Tenere l'ago in posizione fino a quando la vascolarizzazione dello stomaco e i polmoni si sono sbiancati e il perfusato che scorre dal cuore appare chiaro. La perfusione di successo è stata osservata in tutti i tessuti tranne il fegato, rendendoli nettamente più leggeri e meno saturi di sangue.
Questo è più visibile negli albini.
