Adipose-Derived Stem Cell Differentiation to the Adipogenic Lineage

Inizia seminando una piastra a sei pozzetti con 10.000 cellule staminali derivate dal tessuto adiposo per centimetro quadrato. Una volta che le cellule diventano confluenti dal 60 all'80%, aggiungere il mezzo di differenziazione. Il giorno 12, lavare le cellule con PBS e incubarle con 500 microlitri di formalina al 4% per un'ora a temperatura ambiente.

Una volta che le cellule sono state lavate con acqua distillata, lavarle con isopropanolo al 60% per cinque minuti e lasciarle asciugare. Aggiungere 500 microlitri di colorante colorante rosso olio O diluito in alcool al 60%. Dopo l'incubazione a temperatura ambiente lavare i pozzetti due volte con un millilitro di acqua distillata e osservare la piastra al microscopio invertito.

Le cellule staminali derivate dall'adiposio si sono differenziate verso la linea adipogena mostrando dimensioni cellulari ridotte e forma arrotondata entro 48 ore. Dopo sette giorni, erano visibili vescicole lipidiche, che erano positive per la colorazione rosso olio 12 giorni dopo la differenziazione.